依替米星中耳用药后耳蜗功能及形态学初步观察
作者：孙建和 于宇 李兴启 范瑾 赵敏
单位：孙建和 于宇 李兴启(解放军总医院耳鼻咽喉科研究所， 北京100853)；范瑾 赵敏(江苏省微生物研究所， 无锡214063)
关键词：依替米星；氯霉素；耳蜗动作电位；耳石；毛细胞
摘 要 采用依替米星 摘 要 采用依替米星(ETM)、氯霉素(剂量均为50mg/kg)和丙二醇溶媒(0.2ml)为对照作中耳腔给药观察耳蜗功能和形态变化，结果表明ETM和氯霉素对听觉功能的影响在统计学上无显著性差异，从耳蜗动作电位阈移曲线看，氯霉素对听觉功能的影响要比ETM大一些。ETM和氯霉素均可引起前庭器官耳石膜耳石变形，氯霉素还可造成耳蜗和前庭毛细胞缺失。综合分析ETM用作滴耳剂优于氯霉素。
Observation of the cochlear function and morphology of the
, 百拇医药
intratympanic application of etimicin
Sun Jianhe Yu Ning Li Xingqi
(Institute of ENT, PLA General Hospital， Beijing 10083)
Fan Jin Zhao Min
(Jiangsu Institute of Microbiology， Wuxi 214063)
ABSTRACT The changes of the cochlear function and morphology were observed after the intratympanic application of etimicin (50mg/kg), chloramphenicol (50mg/kg) and propylere glycol (0.2ml) as control. The result shows that there is no statistically significant difference in the effect of etimicin and chloramphenicol on the auditory function. The influence of the auditory function is more severe in chloramphenicol than in etimicin from the curve of the threshold shift of cochlear action potential (CAP). The degeneration of the otoconia in the vestibular organ was boserved in the etimicin and chloramphenicol group. In the chloramphenicol was found the loss of hair cells in the cochlear and vestibular organ. To sum up, etimicin is superior to chloramphenicol as an auristilla.
, 百拇医药
KEY WORDS Etimicin； Chloramphenicol； Cochlear action potential (CAP)； Otoconia； Hair cells▲
依替米星(etimicin，ETM，抗生素89-07，爱大霉素)是氨基糖苷类抗菌新药，其抗菌谱广、抗菌力强[1]，经试验观察未发现有明显的耳毒性[2～4]。目前临床常用氯霉素作滴耳剂，但它具有一定的药物不良反应，为寻求替代药物提供依据，故本试验对ETM中耳用药后耳蜗功能及形态学进行了试验观察，并以氯霉素作为对照，溶媒组为空白对照，现将实验结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物分组
取健康白色豚鼠15只，体重300～400g，耳廓反射灵敏，分为溶媒组、氯霉素组、ETM组，每组动物5只。因ETM动物实验结果表明无明显耳毒性[2～4]，故本试验只设一个剂量组，但其大于临床用药剂量。采用鼓室给药法，动物经1%戊巴比妥纳(40mg/kg)麻醉，作耳后切口，向乳突部开一直径1mm小孔，植入自制银球电极，一周后动物听力稳定，再次手术给药。氯霉素组与ETM组剂量50mg/kg；溶媒组对应剂量空白成分0.2ml。
, 百拇医药
1.2 药物
ETM效价506μg/mg，批号P205，江苏省微生物研究所提供。5%氯霉素丙二醇滴耳剂及丙二醇溶媒均由解放军总医院制剂室提供。
1.3 听功能测试
在每组动物植入电极后，给药前及给药后均行耳蜗动作电位(CAP)阈值测试。仪器：丹麦2500型Madsen诱发电位平均器，选滤波短声(filtered click)刺激，平均叠加1000次，带通滤波范围250～10000Hz。记录电极置于圆窗龛，参考电极置于颅顶，地线接于鼻骨，耳机距豚鼠外耳道3cm。
1.4 形态学观察及标本制作方法
动物于给药后14d，进行听功能检查后断头处死，取颞骨用戊二醛蜗管灌流固定、10% EDTA脱钙、漂洗，经锇酸处理后在体视显微镜下分离出耳蜗Corti氏器及前庭的椭圆囊斑、球囊斑与3个壶腹嵴。用梯度酒精处理，临界点干燥，以导电胶将标本粘附于样品台上，真空喷镀金膜，扫描电镜观察[5]，详细检查Corti氏器、壶腹嵴、椭圆囊斑、球囊斑上皮表面的超微结构。
, 百拇医药
2 结果
2.1 听功能测试结果
由表1可见鼓室给药前后CAP阈移分析，氯霉素组和ETM组各个频率段与溶媒组相比增多无显著性差异(P>0.05)。ETM组与溶媒组各频率段CAP阈移值基本相同，而氯霉素组CAP阈移高于ETM组和溶煤组。说明氯霉素和ETM对听觉功能的影响没有明显差异，但氯霉素组对内耳功能的影响要比ETM大一些。
表1 给药前后CAP阈移(
±Sx，dB)
频率(KHz)
溶媒组
, 百拇医药
氯霉素组
依替米星组
10
3.00±4.11
1.25±0.16
3.57±1.97
8
2.75±1.14
4.24±1.61
3.10±1.91
4
1.88±0.89
, 百拇医药
4.30±1.26
1.89±0.05
2
2.53±1.24
4.00±1.04
3.10±0.42
1
2.56±0.95
5.13±1.83
3.00±0.94
0.5
3.50±1.29
, 百拇医药
5.20±1.80
3.34±0.85
0.25
2.89±0.70
4.06±2.44
3.00±0.34
2.2 形态学观察结果
溶媒组5只豚鼠有2只中耳结构正常，2只中耳腔充血化脓内耳完全破坏。3只豚鼠未见耳蜗内、外毛细胞缺失。前庭球囊斑和椭圆囊斑及3个壶腹嵴均未见病理变化。
ETM组5只豚鼠中耳腔均未见炎症反应，中耳粘膜结构正常。5只豚鼠耳蜗均未见病理变化(图1)，只有2只豚鼠内耳椭圆囊斑耳石变形呈哑铃形(图2)，球囊班和3个壶腹峭均未见病理变化。
, 百拇医药
氯霉素组4只豚鼠中耳腔正常，2只豚鼠可见中耳粘膜充血。2只豚鼠可见局限性外毛细胞全部缺失或广泛性外毛细胞散在性缺失(图3)。3只动物椭圆囊斑、球囊斑耳石膜变薄，耳石呈哑铃状变形，感觉细胞纤毛广泛缺失(图4)。3个壶腹峭未见明显病理变化。
3 小结
听功能测试结果表明氯霉素和ETM对听觉功能影响在统计学上无显著性差异，但从CAP阈移值看氯霉素对听功能的影响要比ETM大一些。
图1 ETM组耳蜗第一圈内毛细胞和四排外毛细胞
纤毛形态正常(×1700)
, 百拇医药
图2 ETM组椭圆囊斑可见少量巨大变形的耳石
(×1500)
图3 氯霉素组第一圈外毛细胞散在性缺失
(×1500)
图4 氯霉素组球囊斑感觉细胞纤毛广泛性缺失
(×1500)
, http://www.100md.com 形态学观察结果显示ETM对抑制中耳炎症效果最好。ETM和氯霉素均可使前庭器官耳石膜耳石变形，氯霉素还可造成前庭器官感觉细胞损伤。综合分析ETM用作滴耳剂优于氯霉素。■
孙建和：男，生于1951年,主任技师.
参考文献
1，李家泰，刘建，张烨，等. 新氨基糖苷类抗生素89-07体外抗菌作用研究. 中国抗生素杂志，1995；20：407
2，戴树宏，吕力为，缪亦安，等. 抗生素89-07的耳毒性初步观察. 新药研究基金会报，1992；2：75
3，李兴启，方耀云，孙建和，等. 抗生素89-07、庆大霉素和阿米卡星的耳毒性比较. 中国抗生素杂志，1995；20：442
4，王沛英，李兴启，方耀云，等. 抗生素89-07与奈替米星对豚鼠耳毒性的比较. 中国抗生素杂志，1995；20：448
5，Hanter-Duvar I M. Electron microscopic assessment of the cochlea some techniques and results. Acta otolaryngol，1987；351(Suppl)：3
, 百拇医药
单位：孙建和 于宇 李兴启(解放军总医院耳鼻咽喉科研究所， 北京100853)；范瑾 赵敏(江苏省微生物研究所， 无锡214063)
关键词：依替米星；氯霉素；耳蜗动作电位；耳石；毛细胞
摘 要 采用依替米星 摘 要 采用依替米星(ETM)、氯霉素(剂量均为50mg/kg)和丙二醇溶媒(0.2ml)为对照作中耳腔给药观察耳蜗功能和形态变化，结果表明ETM和氯霉素对听觉功能的影响在统计学上无显著性差异，从耳蜗动作电位阈移曲线看，氯霉素对听觉功能的影响要比ETM大一些。ETM和氯霉素均可引起前庭器官耳石膜耳石变形，氯霉素还可造成耳蜗和前庭毛细胞缺失。综合分析ETM用作滴耳剂优于氯霉素。
Observation of the cochlear function and morphology of the
, 百拇医药
intratympanic application of etimicin
Sun Jianhe Yu Ning Li Xingqi
(Institute of ENT, PLA General Hospital， Beijing 10083)
Fan Jin Zhao Min
(Jiangsu Institute of Microbiology， Wuxi 214063)
ABSTRACT The changes of the cochlear function and morphology were observed after the intratympanic application of etimicin (50mg/kg), chloramphenicol (50mg/kg) and propylere glycol (0.2ml) as control. The result shows that there is no statistically significant difference in the effect of etimicin and chloramphenicol on the auditory function. The influence of the auditory function is more severe in chloramphenicol than in etimicin from the curve of the threshold shift of cochlear action potential (CAP). The degeneration of the otoconia in the vestibular organ was boserved in the etimicin and chloramphenicol group. In the chloramphenicol was found the loss of hair cells in the cochlear and vestibular organ. To sum up, etimicin is superior to chloramphenicol as an auristilla.
, 百拇医药
KEY WORDS Etimicin； Chloramphenicol； Cochlear action potential (CAP)； Otoconia； Hair cells▲
依替米星(etimicin，ETM，抗生素89-07，爱大霉素)是氨基糖苷类抗菌新药，其抗菌谱广、抗菌力强[1]，经试验观察未发现有明显的耳毒性[2～4]。目前临床常用氯霉素作滴耳剂，但它具有一定的药物不良反应，为寻求替代药物提供依据，故本试验对ETM中耳用药后耳蜗功能及形态学进行了试验观察，并以氯霉素作为对照，溶媒组为空白对照，现将实验结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物分组
取健康白色豚鼠15只，体重300～400g，耳廓反射灵敏，分为溶媒组、氯霉素组、ETM组，每组动物5只。因ETM动物实验结果表明无明显耳毒性[2～4]，故本试验只设一个剂量组，但其大于临床用药剂量。采用鼓室给药法，动物经1%戊巴比妥纳(40mg/kg)麻醉，作耳后切口，向乳突部开一直径1mm小孔，植入自制银球电极，一周后动物听力稳定，再次手术给药。氯霉素组与ETM组剂量50mg/kg；溶媒组对应剂量空白成分0.2ml。
, 百拇医药
1.2 药物
ETM效价506μg/mg，批号P205，江苏省微生物研究所提供。5%氯霉素丙二醇滴耳剂及丙二醇溶媒均由解放军总医院制剂室提供。
1.3 听功能测试
在每组动物植入电极后，给药前及给药后均行耳蜗动作电位(CAP)阈值测试。仪器：丹麦2500型Madsen诱发电位平均器，选滤波短声(filtered click)刺激，平均叠加1000次，带通滤波范围250～10000Hz。记录电极置于圆窗龛，参考电极置于颅顶，地线接于鼻骨，耳机距豚鼠外耳道3cm。
1.4 形态学观察及标本制作方法
动物于给药后14d，进行听功能检查后断头处死，取颞骨用戊二醛蜗管灌流固定、10% EDTA脱钙、漂洗，经锇酸处理后在体视显微镜下分离出耳蜗Corti氏器及前庭的椭圆囊斑、球囊斑与3个壶腹嵴。用梯度酒精处理，临界点干燥，以导电胶将标本粘附于样品台上，真空喷镀金膜，扫描电镜观察[5]，详细检查Corti氏器、壶腹嵴、椭圆囊斑、球囊斑上皮表面的超微结构。
, 百拇医药
2 结果
2.1 听功能测试结果
由表1可见鼓室给药前后CAP阈移分析，氯霉素组和ETM组各个频率段与溶媒组相比增多无显著性差异(P>0.05)。ETM组与溶媒组各频率段CAP阈移值基本相同，而氯霉素组CAP阈移高于ETM组和溶煤组。说明氯霉素和ETM对听觉功能的影响没有明显差异，但氯霉素组对内耳功能的影响要比ETM大一些。
表1 给药前后CAP阈移(
±Sx，dB)频率(KHz)
溶媒组
, 百拇医药
氯霉素组
依替米星组
10
3.00±4.11
1.25±0.16
3.57±1.97
8
2.75±1.14
4.24±1.61
3.10±1.91
4
1.88±0.89
, 百拇医药
4.30±1.26
1.89±0.05
2
2.53±1.24
4.00±1.04
3.10±0.42
1
2.56±0.95
5.13±1.83
3.00±0.94
0.5
3.50±1.29
, 百拇医药
5.20±1.80
3.34±0.85
0.25
2.89±0.70
4.06±2.44
3.00±0.34
2.2 形态学观察结果
溶媒组5只豚鼠有2只中耳结构正常，2只中耳腔充血化脓内耳完全破坏。3只豚鼠未见耳蜗内、外毛细胞缺失。前庭球囊斑和椭圆囊斑及3个壶腹嵴均未见病理变化。
ETM组5只豚鼠中耳腔均未见炎症反应，中耳粘膜结构正常。5只豚鼠耳蜗均未见病理变化(图1)，只有2只豚鼠内耳椭圆囊斑耳石变形呈哑铃形(图2)，球囊班和3个壶腹峭均未见病理变化。
, 百拇医药
氯霉素组4只豚鼠中耳腔正常，2只豚鼠可见中耳粘膜充血。2只豚鼠可见局限性外毛细胞全部缺失或广泛性外毛细胞散在性缺失(图3)。3只动物椭圆囊斑、球囊斑耳石膜变薄，耳石呈哑铃状变形，感觉细胞纤毛广泛缺失(图4)。3个壶腹峭未见明显病理变化。
3 小结
听功能测试结果表明氯霉素和ETM对听觉功能影响在统计学上无显著性差异，但从CAP阈移值看氯霉素对听功能的影响要比ETM大一些。
图1 ETM组耳蜗第一圈内毛细胞和四排外毛细胞
纤毛形态正常(×1700)
, 百拇医药
图2 ETM组椭圆囊斑可见少量巨大变形的耳石
(×1500)
图3 氯霉素组第一圈外毛细胞散在性缺失
(×1500)
图4 氯霉素组球囊斑感觉细胞纤毛广泛性缺失
(×1500)
, http://www.100md.com 形态学观察结果显示ETM对抑制中耳炎症效果最好。ETM和氯霉素均可使前庭器官耳石膜耳石变形，氯霉素还可造成前庭器官感觉细胞损伤。综合分析ETM用作滴耳剂优于氯霉素。■
孙建和：男，生于1951年,主任技师.
参考文献
1，李家泰，刘建，张烨，等. 新氨基糖苷类抗生素89-07体外抗菌作用研究. 中国抗生素杂志，1995；20：407
2，戴树宏，吕力为，缪亦安，等. 抗生素89-07的耳毒性初步观察. 新药研究基金会报，1992；2：75
3，李兴启，方耀云，孙建和，等. 抗生素89-07、庆大霉素和阿米卡星的耳毒性比较. 中国抗生素杂志，1995；20：442
4，王沛英，李兴启，方耀云，等. 抗生素89-07与奈替米星对豚鼠耳毒性的比较. 中国抗生素杂志，1995；20：448
5，Hanter-Duvar I M. Electron microscopic assessment of the cochlea some techniques and results. Acta otolaryngol，1987；351(Suppl)：3
, 百拇医药
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