复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清IL-2及SIL-2R水平的研究△
作者：张华 宋宏文 郭绒霞 孙乃学 刘华
单位：272111 山东省济宁市第一人民医院眼科(张华、宋宏文，现西安医科大学研究生)；西安医科大学第二临床医学院(郭绒霞，孙乃学)；西安医科大学基础医学院(刘华，现博士研究生)
关键词：单纯疱疹性角膜炎；血清白细胞介素-2；白细胞介素-2受体
眼科新进展990208 摘要 目的 研究复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清白细胞介素-2(IL-2)及其可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)水平。方法 本文测定了30例复发性单纯疱疹性角膜炎患者(实验组)和25例健康人(对照组)血清白细胞介素-2(IL-2)及其可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)的水平。结果 对照组IL-2的水平为5.41±1.45mg.L-1，实验组IL-2R水平为2.80±1.47mg.L-1，2组比较t=2.90，P<0.01，说明复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清IL-2水平较对照组明显降低。对照组SIL-2R水平为90.86±17.90mg.L-1，实验组SIL-2R水平为171.46±19.30mg.L-1，2组比较t=5.17,P<0.01。复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清SIL-2R水平较对照组显著升高。结论 复发性单纯疱疹性角膜炎患者体内免疫功能紊乱，血清IL-2活性降低、SIL-2R水平升高可能是其原因之一，这也为免疫治疗提供了一定依据。
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Study on the levels of serum interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor in patients with recurrent simple herpetic keratitis
ZHANG Hua,SONG Hong-Wen,GUO Rong-Xia,SUN Nai-Xue,LIU Hua
Abstract Objective To study the levels of serum interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor(SIL-2R) in recurrent patients with simple herpetic keratitis.Methods The interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor(SIL-2R) in 30 cases of recurrent simple herpetic keratitis experimental group and 25 cases of healthy persons(control group) were determined.Results The serum IL-2 level was 5.41±1.45mg.L-1in normal group,and 2.80±1.47mg.L-1in the patients with recurrent simple herpetic keratitis.The serum IL-2 level in recurrent simple herpetic keratitis was significantly lower than that in normal group(t=2.90,P<0.01).The serum SIL-2R level was 90.86±17.90mg.L-1 in normal group and 171.46±19.30mg.L-1 in the patients with recurrent simple herpetic keratitis.The serum SIL-2 level in recurrent simple herpetic keratitis was significantly higher than that in normal group(t=5.17,P<0.01).Conclusions Immune function of recurrent simple herpetic keratitis is lower than that of healthy people.A significant decrease in IL-2 level and a significant increase in SIL-2R level maybe one of causes of this condition.The findings can provide foundation for immunotherapy.
, 百拇医药
Key words simple herpetic keratitis;interleukin-2;interleukin-2 receptor
作者简介 张华，男，1965年11月出生于山东省济宁市，汉族，中共党员，已获医学硕士学位，主治医师，现为西安医科大学博士研究生，中华青年联合会山东省济宁市委员，国外医学医学地理分册特邀编委兼山东组组长，获山东省济宁市新长征突击手、济宁市优秀青年科技人材称号。获省市科技进步奖6项，在国内外学术期刊上共发表论文近50篇，参编著书2部。研究方向：单纯疱疹性角膜炎的免疫机制及治疗。联系电话：0537-2250663，0537-2325103 临床观察和实验研究表明，复发性单纯疱疹性角膜炎患者存在着免疫功能低下[1～4]；为进一步了解复发性单纯疱疹性角膜炎患者的免疫状态，为复发性单纯疱疹性角膜炎患者的免疫治疗提供新的思路，我课题组在对复发性单纯疱疹性角膜炎患者进行深入研究[5，6]的基础上，继续探讨复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清白细胞介素-2(Interleukin-2，IL-2)及可溶性白细胞介素-2受体(soluble interleukin-2 receptor,SIL-2R)水平的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 一般资料 观察组：30例(30只眼)单纯疱疹性角膜炎患者(树枝状角膜炎或地图状角膜炎)全部具有复发史，均经裂隙灯显微镜角膜荧光素染色检查确诊，其中男17例，女13例；右眼16例，左眼14例；年龄≤20a者3例，21～40a者12例，41～60a者13例，≥61a者2例；年龄11～67a，平均35.40±15.47a。正常对照组：25例健康人外周血由我院血站提供，25例25只眼，其中男15例，女10例；右眼13例，左眼12例；年龄≤20a者2例，21～40a者11例，41～60a者10例，≥61a者2例；年龄12～65a，平均为34.60±13.57a。
1.2 血清IL-2测定 试剂盒购自长春恩华生物公司，采用夹心ELISA方法，全部操作严格按说明书进行。
1.3 血清SIL-2R测定 试剂盒购自白求恩医科大学免疫室，全部操作严格按说明书进行。采用ELISA双抗夹心法，加抗白细胞介素-2受体(IL-2R)单抗于聚乙烯板(5mg.L-1)4℃ 48h后加封闭液每孔200μL，37℃ 1.5h洗涤加样品稀释液每孔100μL及待测血清50μL混匀。同时设空白对造及标准品系列孔，37℃ 2h洗3遍，各孔加多克隆抗IL-2R多抗100μL、37℃ 2h洗3遍，各孔加驴抗兔抗体100μL、37℃ 2h洗3遍加底物液100μL，10min加50mL终止液，用酶标仪于490nm波长处测OD值，绘制标准曲线，查出SIL-2R含量。
, 百拇医药
2 结果
2.1 2组血清IL-2及其SIL-2R的水平测定结果，见表1。
表1 2组血清IL-2及其SIL-2R测定结果
Table 1 The results of interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor in both groups(
±s) Group
n
IL-2(mg.L-1)
SIL-2R(mg.L-1)
, 百拇医药
Experimental group
30
2.80±1.47a
90.86±17.90b
Control group
25
5.41±1.45a
171.46±19.30b
Compared with healthy people group,a: t=2.90,P<0.01;b:t=5.17,P<0.001
, 百拇医药
本文表明复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清IL-2水平较正常对照组明显降低(P<0.01)。正常对照组SIL-2R水平为90.86±17.90mg.L-1，实验组即复发性单纯疱疹性角膜炎SIL-2R水平为171.46±19.30mg.L-1，2组比较t=5.17,P<0.01。复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清SIL-2R水平较正常对照组显著升高(P<0.001)。
3 讨论
IL-2是体内一种重要的免疫调节因子，通过促进T细胞持续生长、扩增及活化，使其分泌干扰素(IFN)等，诱导和增强NK细胞的杀伤活性，协同促进B细胞的增值和分泌Ig，因此，血清中IL-2含量高低直接反映机体的免疫功能。IL-2功能的发挥有赖于细胞膜白细胞介素-2受体(mIL-2R)表达的数量及质量的正常[7]。血清中游离的SIL-2R来自于mIL-2R中的低亲合力P55蛋白[8，9]，可于mIL-2R竞争结合IL-2，当SIL-2R处于高水平时，可阻断IL-2和mIL-2R的结合，抑制T细胞功能[3]。
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我们知道，单纯疱疹性角膜炎主要由单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染引起，HSV-1型不同于其它任何一种病毒的最大特点就是它具有在人体三叉神经节建立永久潜伏的特征。潜伏的病毒活化后，经轴浆运输达到角膜产生复发感染，对免疫力健全的个体局部可以不出现病变，反之局部或全身免疫抑制均可使病毒在上皮复制产生临床症状。这可能是单纯疱疹性角膜炎患者反复发作的根源，几年来，我课题组进行了较深入的研究[1～6]。
本文结果表明，复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清中SIL-2R的水平明显升高。由于SIL-2R以低亲合力结合IL-2，因而可与mIL-2R竞争IL-2。单纯疱疹性角膜炎反复发作，使淋巴细胞活化，细胞表达mIL-2R程度增强，而SIL-2R是mIL-2R主要廓清方式，因而产生增多；反过来与mIL-2R竞争结合IL-2，导致IL-2活性受抑制，另外，单纯疱疹性角膜炎可诱导巨噬细胞产生IL-2抑制因子，进一步使IL-2活性受抑制。
复发性单纯疱疹性角膜炎患者体内免疫功能紊乱由多因素造成，SIL-2R水平升高可能为其中之一，这也为免疫治疗提供了一定依据。
, http://www.100md.com
△ 山东省卫生厅资助课题
Accepted for publication Mar.15,1998
From the Department of Ophthalmology,The first people's Hospital of Jining City,Jining 272111,Shandong Province,China(ZHANG Hua,SONG Hong-Wen);Department of Ophthalmology,The Second Teaching Hospital of Xi'an Medical University,Xi'an 710004,Shanxi Province,China(GUO Rong-Xia,SUN Nai-Xue,LIU Hua)
参考文献
, 百拇医药 1 张华，迟福昌，王志安，等.单纯疱疹性角膜炎中药治疗前后血清微量元素和免疫功能的测定及临床意义.中西医结合眼科杂志1993；11(3)∶135-137
2 张华，迟福昌，王志安，等.单纯疱疹性角膜炎中药治疗前后T细胞亚群的测定及临床意义.中西医结合眼科杂志1996；14(3)∶131-133.
3 张华，宋宏文，迟福昌，等.复发性单纯疱疹性角膜炎患者外周血T-淋巴细胞亚群的变化与SIL-2R水平的关系.眼科新进展1997；17(3)∶131-133
4 张 华，宋宏文，迟福昌，等.应用OKT单克隆抗体检测单纯疱疹性角膜炎中药治疗前后外周血T细胞亚群.西安医科大学学报1997；18(4)∶433-452.
5 Zhang H,Chi FC,Wang Z,et al.Clinical and experimental study on treatment of simple herpetic keratitis with decocted Chinese herbs ultrasonic-fog generat or to fumigate the eyes.15th congress of the Asia-Pacific Academy of Ophthalmology.Hong Kong 1995∶6-10.
, http://www.100md.com
6 Zhang H,Chi FC,Wang Z,et al.Measurement of serum trace element and immune function before and after treament with traditial Chinese medicine in simple herpetic keratitis and its significance.Second International Ophthalmologic Conference.Beijing 1995∶135.
7 Rose B,Gillespie A,Wunderlich D,et al.Differential effects of a murine and chimeric mouse/human anti-interleukin-2 receptor anti-body on human T-cell proliferation.Immunology 1992;76(3)∶452.
8 Verheul HA,Verveld M,Bos ES.Immunotherapy through the IL-2 receptor.Immunol Res 1992;11(4)∶42.
9 周世文.可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)临床应用的进展.中国实验临床免疫学杂志1991；3(3)∶43.
收稿 1998-03-15 修回 1998-07-17, 百拇医药
单位：272111 山东省济宁市第一人民医院眼科(张华、宋宏文，现西安医科大学研究生)；西安医科大学第二临床医学院(郭绒霞，孙乃学)；西安医科大学基础医学院(刘华，现博士研究生)
关键词：单纯疱疹性角膜炎；血清白细胞介素-2；白细胞介素-2受体
眼科新进展990208 摘要 目的 研究复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清白细胞介素-2(IL-2)及其可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)水平。方法 本文测定了30例复发性单纯疱疹性角膜炎患者(实验组)和25例健康人(对照组)血清白细胞介素-2(IL-2)及其可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)的水平。结果 对照组IL-2的水平为5.41±1.45mg.L-1，实验组IL-2R水平为2.80±1.47mg.L-1，2组比较t=2.90，P<0.01，说明复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清IL-2水平较对照组明显降低。对照组SIL-2R水平为90.86±17.90mg.L-1，实验组SIL-2R水平为171.46±19.30mg.L-1，2组比较t=5.17,P<0.01。复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清SIL-2R水平较对照组显著升高。结论 复发性单纯疱疹性角膜炎患者体内免疫功能紊乱，血清IL-2活性降低、SIL-2R水平升高可能是其原因之一，这也为免疫治疗提供了一定依据。
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Study on the levels of serum interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor in patients with recurrent simple herpetic keratitis
ZHANG Hua,SONG Hong-Wen,GUO Rong-Xia,SUN Nai-Xue,LIU Hua
Abstract Objective To study the levels of serum interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor(SIL-2R) in recurrent patients with simple herpetic keratitis.Methods The interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor(SIL-2R) in 30 cases of recurrent simple herpetic keratitis experimental group and 25 cases of healthy persons(control group) were determined.Results The serum IL-2 level was 5.41±1.45mg.L-1in normal group,and 2.80±1.47mg.L-1in the patients with recurrent simple herpetic keratitis.The serum IL-2 level in recurrent simple herpetic keratitis was significantly lower than that in normal group(t=2.90,P<0.01).The serum SIL-2R level was 90.86±17.90mg.L-1 in normal group and 171.46±19.30mg.L-1 in the patients with recurrent simple herpetic keratitis.The serum SIL-2 level in recurrent simple herpetic keratitis was significantly higher than that in normal group(t=5.17,P<0.01).Conclusions Immune function of recurrent simple herpetic keratitis is lower than that of healthy people.A significant decrease in IL-2 level and a significant increase in SIL-2R level maybe one of causes of this condition.The findings can provide foundation for immunotherapy.
, 百拇医药
Key words simple herpetic keratitis;interleukin-2;interleukin-2 receptor
作者简介 张华，男，1965年11月出生于山东省济宁市，汉族，中共党员，已获医学硕士学位，主治医师，现为西安医科大学博士研究生，中华青年联合会山东省济宁市委员，国外医学医学地理分册特邀编委兼山东组组长，获山东省济宁市新长征突击手、济宁市优秀青年科技人材称号。获省市科技进步奖6项，在国内外学术期刊上共发表论文近50篇，参编著书2部。研究方向：单纯疱疹性角膜炎的免疫机制及治疗。联系电话：0537-2250663，0537-2325103 临床观察和实验研究表明，复发性单纯疱疹性角膜炎患者存在着免疫功能低下[1～4]；为进一步了解复发性单纯疱疹性角膜炎患者的免疫状态，为复发性单纯疱疹性角膜炎患者的免疫治疗提供新的思路，我课题组在对复发性单纯疱疹性角膜炎患者进行深入研究[5，6]的基础上，继续探讨复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清白细胞介素-2(Interleukin-2，IL-2)及可溶性白细胞介素-2受体(soluble interleukin-2 receptor,SIL-2R)水平的关系。
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1 材料和方法
1.1 一般资料 观察组：30例(30只眼)单纯疱疹性角膜炎患者(树枝状角膜炎或地图状角膜炎)全部具有复发史，均经裂隙灯显微镜角膜荧光素染色检查确诊，其中男17例，女13例；右眼16例，左眼14例；年龄≤20a者3例，21～40a者12例，41～60a者13例，≥61a者2例；年龄11～67a，平均35.40±15.47a。正常对照组：25例健康人外周血由我院血站提供，25例25只眼，其中男15例，女10例；右眼13例，左眼12例；年龄≤20a者2例，21～40a者11例，41～60a者10例，≥61a者2例；年龄12～65a，平均为34.60±13.57a。
1.2 血清IL-2测定 试剂盒购自长春恩华生物公司，采用夹心ELISA方法，全部操作严格按说明书进行。
1.3 血清SIL-2R测定 试剂盒购自白求恩医科大学免疫室，全部操作严格按说明书进行。采用ELISA双抗夹心法，加抗白细胞介素-2受体(IL-2R)单抗于聚乙烯板(5mg.L-1)4℃ 48h后加封闭液每孔200μL，37℃ 1.5h洗涤加样品稀释液每孔100μL及待测血清50μL混匀。同时设空白对造及标准品系列孔，37℃ 2h洗3遍，各孔加多克隆抗IL-2R多抗100μL、37℃ 2h洗3遍，各孔加驴抗兔抗体100μL、37℃ 2h洗3遍加底物液100μL，10min加50mL终止液，用酶标仪于490nm波长处测OD值，绘制标准曲线，查出SIL-2R含量。
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2 结果
2.1 2组血清IL-2及其SIL-2R的水平测定结果，见表1。
表1 2组血清IL-2及其SIL-2R测定结果
Table 1 The results of interleukin-2 and soluble interleukin-2 receptor in both groups(
±s) Groupn
IL-2(mg.L-1)
SIL-2R(mg.L-1)
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Experimental group
30
2.80±1.47a
90.86±17.90b
Control group
25
5.41±1.45a
171.46±19.30b
Compared with healthy people group,a: t=2.90,P<0.01;b:t=5.17,P<0.001
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本文表明复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清IL-2水平较正常对照组明显降低(P<0.01)。正常对照组SIL-2R水平为90.86±17.90mg.L-1，实验组即复发性单纯疱疹性角膜炎SIL-2R水平为171.46±19.30mg.L-1，2组比较t=5.17,P<0.01。复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清SIL-2R水平较正常对照组显著升高(P<0.001)。
3 讨论
IL-2是体内一种重要的免疫调节因子，通过促进T细胞持续生长、扩增及活化，使其分泌干扰素(IFN)等，诱导和增强NK细胞的杀伤活性，协同促进B细胞的增值和分泌Ig，因此，血清中IL-2含量高低直接反映机体的免疫功能。IL-2功能的发挥有赖于细胞膜白细胞介素-2受体(mIL-2R)表达的数量及质量的正常[7]。血清中游离的SIL-2R来自于mIL-2R中的低亲合力P55蛋白[8，9]，可于mIL-2R竞争结合IL-2，当SIL-2R处于高水平时，可阻断IL-2和mIL-2R的结合，抑制T细胞功能[3]。
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我们知道，单纯疱疹性角膜炎主要由单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染引起，HSV-1型不同于其它任何一种病毒的最大特点就是它具有在人体三叉神经节建立永久潜伏的特征。潜伏的病毒活化后，经轴浆运输达到角膜产生复发感染，对免疫力健全的个体局部可以不出现病变，反之局部或全身免疫抑制均可使病毒在上皮复制产生临床症状。这可能是单纯疱疹性角膜炎患者反复发作的根源，几年来，我课题组进行了较深入的研究[1～6]。
本文结果表明，复发性单纯疱疹性角膜炎患者血清中SIL-2R的水平明显升高。由于SIL-2R以低亲合力结合IL-2，因而可与mIL-2R竞争IL-2。单纯疱疹性角膜炎反复发作，使淋巴细胞活化，细胞表达mIL-2R程度增强，而SIL-2R是mIL-2R主要廓清方式，因而产生增多；反过来与mIL-2R竞争结合IL-2，导致IL-2活性受抑制，另外，单纯疱疹性角膜炎可诱导巨噬细胞产生IL-2抑制因子，进一步使IL-2活性受抑制。
复发性单纯疱疹性角膜炎患者体内免疫功能紊乱由多因素造成，SIL-2R水平升高可能为其中之一，这也为免疫治疗提供了一定依据。
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Accepted for publication Mar.15,1998
From the Department of Ophthalmology,The first people's Hospital of Jining City,Jining 272111,Shandong Province,China(ZHANG Hua,SONG Hong-Wen);Department of Ophthalmology,The Second Teaching Hospital of Xi'an Medical University,Xi'an 710004,Shanxi Province,China(GUO Rong-Xia,SUN Nai-Xue,LIU Hua)
参考文献
, 百拇医药 1 张华，迟福昌，王志安，等.单纯疱疹性角膜炎中药治疗前后血清微量元素和免疫功能的测定及临床意义.中西医结合眼科杂志1993；11(3)∶135-137
2 张华，迟福昌，王志安，等.单纯疱疹性角膜炎中药治疗前后T细胞亚群的测定及临床意义.中西医结合眼科杂志1996；14(3)∶131-133.
3 张华，宋宏文，迟福昌，等.复发性单纯疱疹性角膜炎患者外周血T-淋巴细胞亚群的变化与SIL-2R水平的关系.眼科新进展1997；17(3)∶131-133
4 张 华，宋宏文，迟福昌，等.应用OKT单克隆抗体检测单纯疱疹性角膜炎中药治疗前后外周血T细胞亚群.西安医科大学学报1997；18(4)∶433-452.
5 Zhang H,Chi FC,Wang Z,et al.Clinical and experimental study on treatment of simple herpetic keratitis with decocted Chinese herbs ultrasonic-fog generat or to fumigate the eyes.15th congress of the Asia-Pacific Academy of Ophthalmology.Hong Kong 1995∶6-10.
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6 Zhang H,Chi FC,Wang Z,et al.Measurement of serum trace element and immune function before and after treament with traditial Chinese medicine in simple herpetic keratitis and its significance.Second International Ophthalmologic Conference.Beijing 1995∶135.
7 Rose B,Gillespie A,Wunderlich D,et al.Differential effects of a murine and chimeric mouse/human anti-interleukin-2 receptor anti-body on human T-cell proliferation.Immunology 1992;76(3)∶452.
8 Verheul HA,Verveld M,Bos ES.Immunotherapy through the IL-2 receptor.Immunol Res 1992;11(4)∶42.
9 周世文.可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)临床应用的进展.中国实验临床免疫学杂志1991；3(3)∶43.
收稿 1998-03-15 修回 1998-07-17, 百拇医药