糖皮质激素快速抑制ATP引起的HT-4细胞［Ca2＋］I升高
作者：韩建中 娄淑杰 陈宜张
单位：第二军医大学神经生物学教研室，上海 200433
关键词：
目的
目的：糖皮质激素(GC)是体内一类重要的调节分子，其作用机制复杂而多样，既包括被普遍认同的基因组机制，又有以起效快速(潜伏期从数秒至数分钟)为特点的非基因组作用方式。本室在PC12细胞(大鼠嗜铬细胞瘤)中的研究表明，GC可通过百日咳毒素(PTX)敏感的G蛋白-蛋白激酶C(PKC)途径快速抑制烟碱引起的[Ca2+]i升高。为进一步研究GC的快速作用机制及其普遍性，本研究观察了GC对ATP引起的HT-4细胞(小鼠神经细胞系)[Ca2+]i升高的影响，并研究了其中的信号转导途径。方法：本研究利用荧光指示剂Fura-2进行钙离子成像，激发波长为340和380 nM，发射波长为510 nM。结果：我们首次发现在HT-4细胞上同时存在P2X和P2Y受体，两者共同参与细胞对ATP的反应。P2X受体是一种配基门控阳离子通道，活化后可引起胞外Ca2+内流。本研究首次发现，在HT-4细胞中，PKA和PKC活性的增加可抑制P2X受体介导的胞外Ca2+内流。P2Y受体是G蛋白耦联受体，引起胞内Ca2+释放。本研究发现该信号转导过程受PKC的负性调节，但对PKA活性的变化不敏感。我们还发现，GC(如皮质酮)可快速抑制(潜伏期5 min)ATP引起的胞外Ca2+内流，而对胞内Ca2+释放没有影响，皮质酮的快速抑制作用不依赖于胞内受体，而与HT-4细胞胞膜上的特定结构有关。抑制PKA活性的药物可完全消除皮质酮产生的抑制作用，而PKC抑制剂Ro31-8220对皮质酮的作用没有影响，提示皮质酮调节ATP反应的快速作用可能依赖PKA的激活。结论：GC能够以快速作用方式影响蛋白激酶(PKA、PKC等)的活性，其作用机制具有多样性特征。, 百拇医药
单位：第二军医大学神经生物学教研室，上海 200433
关键词：
目的
目的：糖皮质激素(GC)是体内一类重要的调节分子，其作用机制复杂而多样，既包括被普遍认同的基因组机制，又有以起效快速(潜伏期从数秒至数分钟)为特点的非基因组作用方式。本室在PC12细胞(大鼠嗜铬细胞瘤)中的研究表明，GC可通过百日咳毒素(PTX)敏感的G蛋白-蛋白激酶C(PKC)途径快速抑制烟碱引起的[Ca2+]i升高。为进一步研究GC的快速作用机制及其普遍性，本研究观察了GC对ATP引起的HT-4细胞(小鼠神经细胞系)[Ca2+]i升高的影响，并研究了其中的信号转导途径。方法：本研究利用荧光指示剂Fura-2进行钙离子成像，激发波长为340和380 nM，发射波长为510 nM。结果：我们首次发现在HT-4细胞上同时存在P2X和P2Y受体，两者共同参与细胞对ATP的反应。P2X受体是一种配基门控阳离子通道，活化后可引起胞外Ca2+内流。本研究首次发现，在HT-4细胞中，PKA和PKC活性的增加可抑制P2X受体介导的胞外Ca2+内流。P2Y受体是G蛋白耦联受体，引起胞内Ca2+释放。本研究发现该信号转导过程受PKC的负性调节，但对PKA活性的变化不敏感。我们还发现，GC(如皮质酮)可快速抑制(潜伏期5 min)ATP引起的胞外Ca2+内流，而对胞内Ca2+释放没有影响，皮质酮的快速抑制作用不依赖于胞内受体，而与HT-4细胞胞膜上的特定结构有关。抑制PKA活性的药物可完全消除皮质酮产生的抑制作用，而PKC抑制剂Ro31-8220对皮质酮的作用没有影响，提示皮质酮调节ATP反应的快速作用可能依赖PKA的激活。结论：GC能够以快速作用方式影响蛋白激酶(PKA、PKC等)的活性，其作用机制具有多样性特征。, 百拇医药