30例非甲～戊型肝炎中庚型肝炎病毒感染分析
作者：罗湘蓉 贺永文 冯彦文
单位：430022 武汉,同济医科大学附属协和医院传染科
关键词：庚型肝炎病毒；非甲～戊型肝炎；抗-HGV；肝炎,庚型
临床内科杂志/990410 【摘要】 目的 了解庚型肝炎病毒(HGV)在本地区非甲～戊型肝炎中的流行情况及其临床特征。方法 用RT-PCR和ELISA法对30例非甲～戊型肝炎患者的血清进行HGV-RNA和抗-HGV检测。结果 30例非甲～戊型肝炎患者中检出3例(10%)HGV-RNA阳性,其中2例为急性肝炎,1例为慢性肝炎。30例中检出抗-HGV阳性3例(10%),3例均为急性肝炎,HGV-RNA均为阴性。结论 HGV不是非甲～戊型肝炎的主要病因,抗-HGV可能与急性HGV感染后病毒被清除有关。
Analysis of Infection with Hepatitis G Virus in 30 cases of non-A-E Hepatitis
, 百拇医药
Luo Xiang rong,He Yonguen,Feng yanwen.
Xiehe hospital of Tongji medical university wehan 430022.
【Abstract】 Objective To investigate the prevalence of HGV infection in patients with non-A-E hepatitis and its clinical characteristics in Wuhan.Methods The sera of 30 patients with non-A-E hepatitis were collected,then HGVRNA and anti-HGV were detected by RT-PCR and ELISA respectively.Results 3/30(10%)patients were detected HGVRNA positive.Among them,2 were acute hepatitis,1 were chronic hepatitis.3/30 patients were detected anti-HGV positive and were acute hepatieis,but the HGVRNAwere negative among them. Conclusion HGV was nat the main cause of non-A-E hepatieis.Anti-HGV may assocsated with the clearance of virus after acute HGV infection.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis G virus Non-A-E hepatitis Anti-HGV Hepatitis,G
庚型肝炎病毒HGV[1,2]是一类与人类肝炎相关的RNA病毒,认为可能是非甲～戊型肝炎的致病因子,为了解HGV在本地区非甲～戊型肝炎中的流行情况以及HGV感染的临床特征,我们用RT-PCR和ELISA 法对30例非甲～戊型肝炎患者的血清进行HGV-RNA和抗-HGV检测。现将结果报道如下。
对象和方法
一、对象:30例病人均为本院传染科和武汉市传染病医院1996年12月至1997年10月收治的住院病人,全部病人均经ELISA法和RT-PCR法排除甲、乙、丙、戊型肝炎病毒感染。
二、方法
, 百拇医药 (一)HGV引物:根据国外报道的HGV序列[1],在HGV5UTR设计两对套式引物,序列如下:
G1 5GGTGGATGGGTGATGACAGGGTTG3
G2 5GGAGCTGGGTGGCCCCATGCATTT3
G3 5GGTAGCCACTATAGGGTCTTA3
G4 5CACTGGTCCTTGTCAACTCGC3
其中G1和G2为外引物,G3和G4为内引物,扩增产物长度为238 bp。
, 百拇医药
(二)RT—PCR反应:采用异硫氰酸胍一步法提取血清HGV-RNA。在沉淀管中加入DEPC水28 ml,5×逆转录缓冲液10 ml,dNTPs 4ml,RNaisn 40u(华美公司)Mo-MLV 200u(GZBCO公司),外引物各30 pmol/L,Taq酶3U(SABC公司)。混匀后加石蜡油封顶。37℃温育1小时。逆转录后直接扩增。94℃60秒、50℃60秒、72℃60秒,共35个循环。第二次PCR体系含内引物各20 pmol/L,Taq酶3U,dNTPs 3μl,10×butter 3μl,第一次PCR产物5μl,加双蒸水至30μl,循环条件同上。PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳,在238 bp处出现荧光带者为阳性。
(三)抗-HGV检测:采用ELISA法,试剂购自北京肝炎试剂中心。
结果
一、30例病人HGVRNA和抗-HGV检测结果见表1。
, http://www.100md.com
表1 HGV在非甲～戊型肝炎中的流行情况 诊断
例数
HGVRNA(+)
例数(%)
抗-HGV(+)
例数(%)
急性肝炎
24
2(8.3%)
3(12.5%)*
慢性肝炎
5
, 百拇医药
1(20%)
0
重型肝炎
1
0
0
总 计
30
3(10%)
3(10%)
注:*3例抗-HGV阳性者HGVRNA均为阴性。
二、HGV感染的临床特征,见表2。HGVRNA阳性组,抗-HGV阳性和HGVRNA、抗-HGV均阴性组的年龄及临床指标的比较均无显著性差异(P>0.05)。表2 HGV感染的临床特征(
±s)
, 百拇医药
HGV-RNA(+)
(3例)
抗-HGV(+)
(3例)
HGV-RNA和
抗-HGV(-)(24例)
年 龄
40.7±21
34.7±11.9
41.5±16.3
胆红素
88.9±113.1
, 百拇医药
104.1±30.7
88.7±104.1
ALT
252.7±141.5
557.7±308.2
498.7±422.7
AST
132.7±71.4
270.7±171.7
297±159.3
三、临床转归:2例HGV-RNA和3例抗-HGV阳性的急性肝炎患者,均在2月内肝功能恢复正常,1例出院时HGV-RNA仍为阳性,慢性HGV感染者肝功能持续异常,ALT波动在100 U左右,无黄疸,半年后HGV-RNA仍为阳性。讨论
, http://www.100md.com
HGV的发现为寻找非甲～戊型肝炎的病原提供了新的线索。本结果显示在非甲～戊型肝炎中庚型肝炎病毒感染的阳性率为10%,与文献报道的6%～18%的阳性率相符[4],这一结果提示HGV并不是非甲～戊型肝炎的主要病因。
本组检出的3例HGV感染者均为男性,2例为急性黄疸型肝炎,临床表现与其它病毒所致的急性黄疸型肝炎类似,ALT一般不超过500 U/L,1例胆红素峰值为219.3 mmol/L,经常规护肝治疗,2月后2例病人肝功能均恢复正常。1例慢性HGV感染,发病时间不明确,无明显消化道症状,有轻度乏力,无黄疸,肝功能异常达半年之久,ALT一般在100 U/L左右,用常规护肝治疗,肝功能均无明显改善,血HGV-RNA持续阳性。以上结果提示HGV感染后,会出现临床表现的多样性。单纯HGV感染较少见[3,4],我们收集的病例有限,至于何种临床表现所占比例更大,以及临床表现与临床转归的关系,还需积累更多的病例。
抗-HGV检测的临床意义也是人们关注的热点,本组初步检测结果显示,3例抗-HGV阳性者,血HGV-RNA均为阴性,而且3例抗-HGV阳性者均为急性肝炎,2月内肝功能均恢复正常,这一现象似显示抗-HGV的出现预示病情的好转,病毒被清除,提示部分HGV感染的急性肝炎患者可完全康复,由于我们观察的病例数较少,有待进一步积累资料。
, http://www.100md.com
* 现在武汉市传染病医院工作。
参考文献
1.John N,Simons,Thomas P,et al.Isolation of novel virus-Like sequences associated with human hepatitis.Nature Med,1995,1∶564.
2.Linnen J,Wages Jr J,Zhang-Keckzy,et al.Melecular cloning and disease.Association of hepatitis G virus:A transfusion-transmissible agent.Science,1996,271∶505.
3.Alter MJ,Gallagder M,Morris T,et al.Acute Non-A-E hepatisits in the United states and role of hepatitis G virus infection.N Engl J Med,1997,336∶741.
4.Alter HJ,Nakalsujl Y,Melpolder J,et al.The incidence of transfusion-assotiated hepatitis G virus infection and its relation to liver disease.N Engl J Med,1999,336∶747.
收稿:1998-04-16 修回:1998-09-14, 百拇医药
单位：430022 武汉,同济医科大学附属协和医院传染科
关键词：庚型肝炎病毒；非甲～戊型肝炎；抗-HGV；肝炎,庚型
临床内科杂志/990410 【摘要】 目的 了解庚型肝炎病毒(HGV)在本地区非甲～戊型肝炎中的流行情况及其临床特征。方法 用RT-PCR和ELISA法对30例非甲～戊型肝炎患者的血清进行HGV-RNA和抗-HGV检测。结果 30例非甲～戊型肝炎患者中检出3例(10%)HGV-RNA阳性,其中2例为急性肝炎,1例为慢性肝炎。30例中检出抗-HGV阳性3例(10%),3例均为急性肝炎,HGV-RNA均为阴性。结论 HGV不是非甲～戊型肝炎的主要病因,抗-HGV可能与急性HGV感染后病毒被清除有关。
Analysis of Infection with Hepatitis G Virus in 30 cases of non-A-E Hepatitis
, 百拇医药
Luo Xiang rong,He Yonguen,Feng yanwen.
Xiehe hospital of Tongji medical university wehan 430022.
【Abstract】 Objective To investigate the prevalence of HGV infection in patients with non-A-E hepatitis and its clinical characteristics in Wuhan.Methods The sera of 30 patients with non-A-E hepatitis were collected,then HGVRNA and anti-HGV were detected by RT-PCR and ELISA respectively.Results 3/30(10%)patients were detected HGVRNA positive.Among them,2 were acute hepatitis,1 were chronic hepatitis.3/30 patients were detected anti-HGV positive and were acute hepatieis,but the HGVRNAwere negative among them. Conclusion HGV was nat the main cause of non-A-E hepatieis.Anti-HGV may assocsated with the clearance of virus after acute HGV infection.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis G virus Non-A-E hepatitis Anti-HGV Hepatitis,G
庚型肝炎病毒HGV[1,2]是一类与人类肝炎相关的RNA病毒,认为可能是非甲～戊型肝炎的致病因子,为了解HGV在本地区非甲～戊型肝炎中的流行情况以及HGV感染的临床特征,我们用RT-PCR和ELISA 法对30例非甲～戊型肝炎患者的血清进行HGV-RNA和抗-HGV检测。现将结果报道如下。
对象和方法
一、对象:30例病人均为本院传染科和武汉市传染病医院1996年12月至1997年10月收治的住院病人,全部病人均经ELISA法和RT-PCR法排除甲、乙、丙、戊型肝炎病毒感染。
二、方法
, 百拇医药 (一)HGV引物:根据国外报道的HGV序列[1],在HGV5UTR设计两对套式引物,序列如下:
G1 5GGTGGATGGGTGATGACAGGGTTG3
G2 5GGAGCTGGGTGGCCCCATGCATTT3
G3 5GGTAGCCACTATAGGGTCTTA3
G4 5CACTGGTCCTTGTCAACTCGC3
其中G1和G2为外引物,G3和G4为内引物,扩增产物长度为238 bp。
, 百拇医药
(二)RT—PCR反应:采用异硫氰酸胍一步法提取血清HGV-RNA。在沉淀管中加入DEPC水28 ml,5×逆转录缓冲液10 ml,dNTPs 4ml,RNaisn 40u(华美公司)Mo-MLV 200u(GZBCO公司),外引物各30 pmol/L,Taq酶3U(SABC公司)。混匀后加石蜡油封顶。37℃温育1小时。逆转录后直接扩增。94℃60秒、50℃60秒、72℃60秒,共35个循环。第二次PCR体系含内引物各20 pmol/L,Taq酶3U,dNTPs 3μl,10×butter 3μl,第一次PCR产物5μl,加双蒸水至30μl,循环条件同上。PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳,在238 bp处出现荧光带者为阳性。
(三)抗-HGV检测:采用ELISA法,试剂购自北京肝炎试剂中心。
结果
一、30例病人HGVRNA和抗-HGV检测结果见表1。
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表1 HGV在非甲～戊型肝炎中的流行情况 诊断
例数
HGVRNA(+)
例数(%)
抗-HGV(+)
例数(%)
急性肝炎
24
2(8.3%)
3(12.5%)*
慢性肝炎
5
, 百拇医药
1(20%)
0
重型肝炎
1
0
0
总 计
30
3(10%)
3(10%)
注:*3例抗-HGV阳性者HGVRNA均为阴性。
二、HGV感染的临床特征,见表2。HGVRNA阳性组,抗-HGV阳性和HGVRNA、抗-HGV均阴性组的年龄及临床指标的比较均无显著性差异(P>0.05)。表2 HGV感染的临床特征(
±s), 百拇医药
HGV-RNA(+)
(3例)
抗-HGV(+)
(3例)
HGV-RNA和
抗-HGV(-)(24例)
年 龄
40.7±21
34.7±11.9
41.5±16.3
胆红素
88.9±113.1
, 百拇医药
104.1±30.7
88.7±104.1
ALT
252.7±141.5
557.7±308.2
498.7±422.7
AST
132.7±71.4
270.7±171.7
297±159.3
三、临床转归:2例HGV-RNA和3例抗-HGV阳性的急性肝炎患者,均在2月内肝功能恢复正常,1例出院时HGV-RNA仍为阳性,慢性HGV感染者肝功能持续异常,ALT波动在100 U左右,无黄疸,半年后HGV-RNA仍为阳性。讨论
, http://www.100md.com
HGV的发现为寻找非甲～戊型肝炎的病原提供了新的线索。本结果显示在非甲～戊型肝炎中庚型肝炎病毒感染的阳性率为10%,与文献报道的6%～18%的阳性率相符[4],这一结果提示HGV并不是非甲～戊型肝炎的主要病因。
本组检出的3例HGV感染者均为男性,2例为急性黄疸型肝炎,临床表现与其它病毒所致的急性黄疸型肝炎类似,ALT一般不超过500 U/L,1例胆红素峰值为219.3 mmol/L,经常规护肝治疗,2月后2例病人肝功能均恢复正常。1例慢性HGV感染,发病时间不明确,无明显消化道症状,有轻度乏力,无黄疸,肝功能异常达半年之久,ALT一般在100 U/L左右,用常规护肝治疗,肝功能均无明显改善,血HGV-RNA持续阳性。以上结果提示HGV感染后,会出现临床表现的多样性。单纯HGV感染较少见[3,4],我们收集的病例有限,至于何种临床表现所占比例更大,以及临床表现与临床转归的关系,还需积累更多的病例。
抗-HGV检测的临床意义也是人们关注的热点,本组初步检测结果显示,3例抗-HGV阳性者,血HGV-RNA均为阴性,而且3例抗-HGV阳性者均为急性肝炎,2月内肝功能均恢复正常,这一现象似显示抗-HGV的出现预示病情的好转,病毒被清除,提示部分HGV感染的急性肝炎患者可完全康复,由于我们观察的病例数较少,有待进一步积累资料。
, http://www.100md.com
* 现在武汉市传染病医院工作。
参考文献
1.John N,Simons,Thomas P,et al.Isolation of novel virus-Like sequences associated with human hepatitis.Nature Med,1995,1∶564.
2.Linnen J,Wages Jr J,Zhang-Keckzy,et al.Melecular cloning and disease.Association of hepatitis G virus:A transfusion-transmissible agent.Science,1996,271∶505.
3.Alter MJ,Gallagder M,Morris T,et al.Acute Non-A-E hepatisits in the United states and role of hepatitis G virus infection.N Engl J Med,1997,336∶741.
4.Alter HJ,Nakalsujl Y,Melpolder J,et al.The incidence of transfusion-assotiated hepatitis G virus infection and its relation to liver disease.N Engl J Med,1999,336∶747.
收稿:1998-04-16 修回:1998-09-14, 百拇医药