PCR法检测戊型肝炎患者唾液和尿液中的HEVRNA
作者：芮志莲 吴家明
单位：溧阳市人民医院(213300)
关键词：
江苏医药991235 关于戊型肝炎(戊肝)患者体液有无传染性的问题，极少有报道。为此我们收集了我院1997年～1998年间38例戊肝患者的唾液和尿液，检测HEVRNA，并对其意义进行探讨，现将结果报告如下。
资料与方法
一、资料：38份血清采自本院传染科住院的38例戊肝患者，男22例，女16例，年龄18～67岁，平均40.5岁，病程1～6个月不等。血清抗HEV-IgM和抗HEV-IgG反复阳性，ALT反复异常，病后未经过抗病毒治疗。
二、标本处理：在采集血标本的同一天内，用无菌容器收集患者清晨和进食前的唾液；第一次中段尿液3ml。并于采集后1小时内，将唾液和尿液分别离心20分钟，弃上清液，留取沉淀，置-70℃冰箱保存直至进行HEVRNA的检测。
三、检测试剂与仪器：HEVRNA试剂为华美生物工程有限公司生产，扩增仪为美国PE-2400型。
四、检测方法：严格按试剂盒说明书操作，所用试剂每一包装仅供一批实验应用；实验所用反应管、离心管、吸头均无菌消毒后一次性使用；每份标本均重复二次测定，结果均相符。
结果
38份唾液和尿液均无特异性扩增带出现，均为HEVRNA阴性，而用同样PCR方法所检测的38例血清在预期位置上均出现特异性扩增带，均为HEVRNA阳性。同时我们检测了30例正常人血清HEVRNA，结果均为阴性，说明本次实验结果是可信的。
讨论
本文所检测的38份血清HEVRNA均为阳性，说明该方法的敏感性较好，可排除方法本身对结果的影响。对象为住院病人，血清ALT反复异常，黄疸较重，其血清中HEV的滴度至少不低于一般水平，故避免了病情的轻重对体液中HEVRNA检出率的影响。
唾液和尿液中未能检测出HEVRNA，可能由于(1)乙肝患者，其HBV在血清和体液间浓度梯度高达109～1010病毒颗粒/ml，易形成病毒在血清与体液间的被动扩散。而戊肝患者血清HEV滴度很低，即使HEV能通过破损的脉管和上皮组织进入体液，经过体液的进一步稀释，其含量也是极微量的，我们认为这可能是唾液和尿液中未能检出HEVRNA的一个重要原因。(2)体液中RNA酶能降解破坏HEVRNA。我们在采集唾液和尿液标本时，于采集后一小时内作标本处理，后置-70℃保存。可能戊肝病毒在体内时，已被存在于体液中的RNA酶降解，以至不能检出。
本文结果表明，我们未能在戊肝患者的唾液和尿液中检出HEVRNA，是否戊肝患者通过尿液和唾液传染性的可能性较小。但我们的结果仅是初步探讨，有关戊肝患者唾液和尿液的传染性问题，尚待进一步研究和探索。, 百拇医药
单位：溧阳市人民医院(213300)
关键词：
江苏医药991235 关于戊型肝炎(戊肝)患者体液有无传染性的问题，极少有报道。为此我们收集了我院1997年～1998年间38例戊肝患者的唾液和尿液，检测HEVRNA，并对其意义进行探讨，现将结果报告如下。
资料与方法
一、资料：38份血清采自本院传染科住院的38例戊肝患者，男22例，女16例，年龄18～67岁，平均40.5岁，病程1～6个月不等。血清抗HEV-IgM和抗HEV-IgG反复阳性，ALT反复异常，病后未经过抗病毒治疗。
二、标本处理：在采集血标本的同一天内，用无菌容器收集患者清晨和进食前的唾液；第一次中段尿液3ml。并于采集后1小时内，将唾液和尿液分别离心20分钟，弃上清液，留取沉淀，置-70℃冰箱保存直至进行HEVRNA的检测。
三、检测试剂与仪器：HEVRNA试剂为华美生物工程有限公司生产，扩增仪为美国PE-2400型。
四、检测方法：严格按试剂盒说明书操作，所用试剂每一包装仅供一批实验应用；实验所用反应管、离心管、吸头均无菌消毒后一次性使用；每份标本均重复二次测定，结果均相符。
结果
38份唾液和尿液均无特异性扩增带出现，均为HEVRNA阴性，而用同样PCR方法所检测的38例血清在预期位置上均出现特异性扩增带，均为HEVRNA阳性。同时我们检测了30例正常人血清HEVRNA，结果均为阴性，说明本次实验结果是可信的。
讨论
本文所检测的38份血清HEVRNA均为阳性，说明该方法的敏感性较好，可排除方法本身对结果的影响。对象为住院病人，血清ALT反复异常，黄疸较重，其血清中HEV的滴度至少不低于一般水平，故避免了病情的轻重对体液中HEVRNA检出率的影响。
唾液和尿液中未能检测出HEVRNA，可能由于(1)乙肝患者，其HBV在血清和体液间浓度梯度高达109～1010病毒颗粒/ml，易形成病毒在血清与体液间的被动扩散。而戊肝患者血清HEV滴度很低，即使HEV能通过破损的脉管和上皮组织进入体液，经过体液的进一步稀释，其含量也是极微量的，我们认为这可能是唾液和尿液中未能检出HEVRNA的一个重要原因。(2)体液中RNA酶能降解破坏HEVRNA。我们在采集唾液和尿液标本时，于采集后一小时内作标本处理，后置-70℃保存。可能戊肝病毒在体内时，已被存在于体液中的RNA酶降解，以至不能检出。
本文结果表明，我们未能在戊肝患者的唾液和尿液中检出HEVRNA，是否戊肝患者通过尿液和唾液传染性的可能性较小。但我们的结果仅是初步探讨，有关戊肝患者唾液和尿液的传染性问题，尚待进一步研究和探索。, 百拇医药