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编号:10289858
成人原发性肾炎肾组织乙肝病毒抗原沉积的研究
http://www.100md.com 《温州医学院学报》 2000年第2期
     作者:黄朝兴 李凡凡 吕吟秋

    单位:温州医学院附属第一医院 肾内科肾脏病理室,浙江 温州 325000)

    关键词:肾小球肾炎;乙型肝炎病毒;肾活检

    温州医学院学报000201 [摘 要] 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与成人原发性肾小球肾炎(肾炎)发病的联系。 方法:用间接免疫荧光法检测169例成人原发性肾炎患者肾活检冰冻切片组织HBsAg和HBcAg的沉积情况。按血清HBV感染标志物检测分血清阳性和阴性两组进行分析。 结果:肾组织HBsAg和HBcAg的阳性率分别为14.2%和10.9%。HBV抗原(HBAg)总阳性率为15.4%(26/169)。其中系膜毛细血管性肾炎、膜性肾病和系膜增生性肾炎的阳性率分别达100.0%、58.8%和37.5%。原发性肾炎血清HBV感染标志物阳性率为35.5%。血清阳性组肾组织HBAg的阳性率为38.3%,与血清阴性组(3.7%)相比,差别有统计学意义(χ2=34.6,P<0.001)。按病理类型分析发现,膜性肾病血清阳性组的肾组织HBAg阳性率为83.3%(10/12),与其血清阴性组(20.0%,1/5) 相比,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:成人原发性肾炎及原发性膜性肾病肾活检组织HBAg沉积与血清HBV感染标志物阳性之间存在正相关,提示成人原发性肾炎特别是膜性肾病的发病与HBV感染有关。
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    [中图分类号] R373.2 [文献标识码] A [文章编号] 1000-2138(2000)02-0091-04

    The deposition of Hepatitis B virus antigens in kidney tissues of primary glomerulonephritis in adults

    HUANG Zhao-xing LI Fan-fan LV Yin-qiu

    (Department of Nephrology,the First Affiliated Hospital,Wenzhou Medical College, 325000)

    Abstract: Objective:To clarify the relationships of hepatitis B virus(HBV) infection and primary glomerulonephritis (PGN) in adults.Methods:The deposition of HBV antigens (HBAg) were studied in 169 cases with primary glomerulonephritis in adults of serial renal biopsies on frozen sections by indirect immunofluorescence techniques.Results:Of 169 cases with PGN the frequencies of HBsAg and HBcAg detected on glomeruli were 14.2% and 10.9% respectively with the total HBAg positive freguency of 15.4%.Among these cases the high positive rate wao found in Mesangiocalpillary glomerulonephritis(MCGN,100%),membranous nephropathy(MN,58.8%) and Mesangial proliferative glomerulonephritis(MsPGN,37.5%).The detection of HBV infection markers in serum were simulatanously performed in the patients with PGN,and 35.5% wao positive.Positive freguency of HBAg on glomeruli was found in 38.3% of the cases.It was significantly different from that of the serum negative group(3.7%).By analysis of pathological typing, positive freguency of HBAg on glomeruli wao found in 83.3% of the serum positive group of MN. It was also significantly different from that of the serum negative group of MN (20%).Conclusion:HBV antigenemia was related to the deposition of HBAg in kidney tissues of PGN and primary MN in adults. HBV infection may have played a pathogenetic role in a proportion of PGN and primary MN in adults.
, 百拇医药
    Key words: glomerulonephritis; hepatitis B virus; renal biopsy

    自从1971年combes等首次报道一例乙型肝炎病毒(HBV)相关性膜性肾病以来,已证实携带HBV抗原的肾小球肾炎(肾炎)患者肾活检组织中可存在HBV抗原,如HBsAg、HBeAg或HBcAg。特别是在明确小儿膜性肾病与HBV感染血症之间存在强相关之后,HBV相关性肾炎应被作为一个独立疾病个体来认识的观点已成为普遍共识。然而,对于成人 HBV 相关性肾炎是否存在尚有争议。我们通过观察169例成人原发性肾炎肾活检组织HBV抗原检测状况,探讨HBV感染与成人原发性肾炎发病之间的联系。

    1 材料和方法

    1.1 研究对象 成人原发性肾炎169例,来自1996年3月至2000年1月我院肾活检资料。男113例,女56例。平均年龄32.3岁(15~76岁)。非肾炎对照组:20例,血清HBV感染标志物检查均阴性。其中正常肾组织8例,薄基膜肾病4例,急性肾小管坏死1例,移植肾排异反应7例。
, 百拇医药
    1.2 肾活检 负压抽吸法经皮肾穿刺获得组织。每例肾组织分三份。①石腊切片厚度2~3μm,常规HE、PAS、PASM及Masson染色。②冰冻切片厚度5μm,常规直接免疫荧光法检测IgG、IgA、IgM、补体C3、C4和C1q。③电镜检查。

    原发性肾炎病理分型诊断参照WHO(1982)分类法。本研究将IgA肾病划入原发性肾炎。

    1.3 肾组织HBV抗原(HBsAg和HBcAg)检查 ①试剂:HBsAg检查的一抗(鼠抗HBsAg)和二抗(兔抗鼠IgG-FITC)分别购自福州迈新公司和上海华美公司,HBcAg检查的一抗(兔抗HBcAg)和二抗(羊抗兔IgG-FITC分别购自DAKO公司和上海华美公司。②方法:在冰冻切片上行间接免疫荧光法。

    在本组肾组织HBV抗原检测中,少数HBsAg和多数HBcAg为有选择性地对血清HBV感染标志物阳性(血清阳性)病例进行检测,多数HBsAg和少数 HBcAg为随机检测。每次检测设必要的阴性对照和阳性对照试验,以血清HBV感染标志物阴性(血清阴性)的非肾炎对照组作阴性对照,以乙型肝炎患者肝脏标本或以往肾组织HBV抗原检测阳性的标本作阳性对照。
, 百拇医药
    1.4 血清HBV感染标志物检查 酶联免疫吸附法测血清HBsAg、抗HBs 、HBeAg、抗HBe和抗HBc,任何一项或一项以上阳性判断为血清阳性。排除乙肝疫苗注射史。

    1.5 统计学处理 用χ2检验及精确检验法。

    表1 169例成人原发性肾炎肾组织HBsAg、HBcAg阳性率 病理类型

    HBsAg

    HBc Ag

    总例数

    阳性数

    阳性率(%)

    总例数

, 百拇医药     阳性数

    阳性率(%)

    系膜毛细血管性肾炎

    3

    3

    100.0

    3

    0

    0

    膜性肾病

    17

    10

    58.8

, 百拇医药     10

    2

    20.0

    系膜增生性肾炎

    8

    3

    37.5

    5

    1

    20.0

    IgA肾病

    79

    5
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    6.3

    28

    4△△

    14.3

    局灶增殖性肾炎

    9

    1

    11.1

    2

    0

    0

    局灶节段性肾小球硬化

    10
, 百拇医药
    1

    10.0

    2

    0

    0

    微小病变肾病

    18

    1

    5.6

    12

    1

    8.3

    其他
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    25

    0

    0

    11

    0

    0

    合计

    169

    24

    14.2

    73

    8

    10.9

    注:△:伴HBsAg阳性;△△:其中2例伴HBsAg阳性表2 原发性肾炎肾组织HBV抗原(HBAg)沉积与血清HBV感染
, 百拇医药
    标志物的相关性分析 病理类型

    血清HBV

    感染标志物

    肾组织HBAg

    检测例数

    阳性例数(%)

    原发性肾炎

    +

    60

    23(38.3)

    -

    109
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    4(3.7)

    系膜毛细血管性肾炎

    +

    3

    3(100.0)

    -

    0

    0(0)

    膜性肾病

    +

    12

    10(83.3)

    -
, 百拇医药
    5

    1(20.0)

    系膜增殖性肾炎

    +

    5

    3(60.0)

    -

    3

    0(0)

    IgA肾病

    +

    25

    4(16.0)
, 百拇医药
    -

    54

    3(5.6)

    局灶增殖性肾炎

    +

    1

    1(100.0)

    -

    8

    0(0)

    局灶节段性肾小球硬化

    +

    2
, 百拇医药
    1(50.0)

    -

    8

    0(0)

    微小病变肾病

    +

    6

    1(16.7)

    -

    12

    0(0)

    其他

    +
, 百拇医药
    6

    0(0)

    -

    19

    0(0)

    注:+:阳性;-:阴性;与相应阴性组比:P<0.05,P<

    0.001

    2 结果

    2.1 肾组织HBV抗原检出情况 见表1。169例肾活检冰冻切片组织用间接免疫荧光法检测HBsAg,其中73例同时检测HBcAg。肾组织HBsAg和HBcAg的阳性率分别为14.2%(24/169)和10.9%(8/73),HBV抗原总阳性率为15.4%(26/169例)。其中,HBsAg阳性率以系膜毛细血管性肾炎最高达100.0%(3/3),其次是膜性肾病和系膜增生性肾炎,分别为58.8%(10/17)和37.5%(3/8)。IgA肾病的肾组织HBsAg阳性率为6.3%(5/79),HBcAg阳性率为14.3%(4/28),HBV抗原总阳性率为8.9%(7/79)。非肾炎组20例肾组织检查HBsAg均阴性,其中11例同时检查HBcAg均阴性。
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    2.2 血清HBV感染标志物阳性与肾组织HBV抗原沉积的联系 见表2。在169例肾炎中,血清阳性者60例(35.5%)。肾组织HBV抗原阳性率在血清阳性组为38.3%(23/60),与血清阴性组(3.7%,4/109)相比,差异有极显著性(χ2=34.6,P<0.001)。各种病理类型中,膜性肾病血清阳性组的肾组织HBV抗原阳性率为83.3%(10/12),与其血清阴性组(20.0%,1/5) 相比,差异有显著性(P<0.05, 用精确检验法);其余病理类型血清阳性组肾组织HBV抗原的阳性率与血清阴性组的差别均无统计学意义。

    2.3 肾组织HBV抗原分布与病理类型的联系 本组肾活检免疫荧光检测显示,肾组织HBV抗原[HBsAg及(或)HBcAg]在膜性肾病和系膜毛细血管性肾炎主要沿肾小球毛细血管壁弥漫性颗粒状沉积(图1、2);在IgA肾病和系膜增殖性肾炎沿系膜区弥漫性颗粒状沉积。在以上免疫复合物性肾炎中,HBV抗原的分布形状和部位与免疫球蛋白及补体成分相一致。在局灶节段性肾小球硬化、局灶增殖性肾炎和微小病变肾病中,偶见个别病例HBsAg沿系膜区颗粒状沉积。
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    图1 HBV-MN、IIF显示HBsAg沿肾小球毛细血管壁呈细颗

    粒状沉积 (20×10)

    图2 HBV-MN、IIF显示HBcAg沿肾小球毛细血管壁呈细颗粒

    状沉积 (40×10)

    3 讨论

    关于成人HBV相关性肾炎是否存在尚有争议。台湾王氏曾报道98例成人原发性肾炎不同病理类型肾组织HBsAg检测均获阴性结果,该组病例血清HBsAg阳性率为11.3%[1]。除此以外,国内未见成人原发性肾炎肾活检组织HBV抗原检测的专题报道。本文资料结果显示,成人原发性肾炎肾活检组织HBV抗原沉积与血清HBV感染标志物阳性之间存在正相关。提示HBV感染与成人原发性肾炎发病有关。
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    一般认为,HBV相关性肾炎的主要病理类型为膜性肾病、系膜毛细血管性肾炎和系膜增殖性肾炎[2,3]。本文资料中系膜毛细血管性肾炎、膜性肾病和系膜增殖性肾炎肾组织HBV抗原阳性率较高,提示HBV感染在这些病理类型肾炎发病中可能起一定作用。现已明确小儿膜性肾病与HBV感染血症之间存在强相关,但是,至今尚未明确HBV感染与成人原发性肾炎病理类型之间的相关性。陈国柱等曾用免疫酶联吸附技术对膜型狼疮以外的67例成人膜性肾病患者肾组织HBV抗原进行检测,阳性率高达68.7%[11]。本文资料结果显示,成人原发性膜性肾病肾活检组织HBV抗原沉积与血清HBV感染标志物阳性之间存在正相关,提示成人原发性膜性肾病发病与HBV感染有关。鉴于本组资料观察例数有限,有必要积累更多例数进一步证实。

    文献报道IgA肾病患者肾组织HBV抗原阳性检出率为0%~40%[4~9],差异较大。本文资料IgA肾病肾组织HBV抗原阳性检出率较低(8.9%,7/79例)。HBV感染与IgA肾病的关系有待继续探讨。
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    此外,我们也注意到在原发性肾炎患者血清HBV感染标志物和肾组织HBV抗原阳性情况虽然有相关性但并不完全一致。即在血清阴性组中部分患者(3.7%)肾组织HBV抗原阳性。这一方面要考虑到肾组织HBV抗原比血清中消长慢,可能属血清假阴性,通过反复检测或用更敏感方法检测血清有助鉴别。另一方面,也要考虑可能为肾组织HBV抗原检测技术上假阳性,用抗IgM抗体预处理或用抗体的F(ab')2片段检测有助鉴别[10]

    本文资料肾组织HBV抗原表达主要见于膜性肾病、系膜毛细血管性肾炎、系膜增殖性肾炎和IgA肾病等免疫复合物性肾炎,HBV抗原的沉积部位和性状与免疫球蛋白及补体成分一致,说明HBV相关性肾炎的主要发病机制为免疫复合物性肾炎。

    肾组织HBV抗原检测是诊断HBV相关性肾炎的先决条件,对于成人患者尤其重要。本组169例成人原发性肾炎患者肾活检组织HBV抗原检测阳性26例,说明对成人原发性肾炎肾活检组织应常规进行肾活检组织HBV抗原检测以提高HBV相关性肾炎的诊断率。文献统计原发性肾炎患者肾组织HBV抗原的阳性率差异很大,这可能与所采用的免疫病理检测技术敏感性有关。本研究采用间接免疫荧光法检测169例成人原发性肾炎肾活检冰冻切片组织HBsAg和HBcAg,阳性率分别为14.2%和10.9%,阳性信号清晰,背景良好,方法简便,建议推广应用。
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    作者简介:黄朝兴(1958-),男,浙江苍南人,温州医学院附属第一医院肾内科副主任医师,研究方向:肾脏病理与临床。

    参考文献

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    [10] 谌贻璞.乙型肝炎病毒相关肾炎[J].中华肾脏病杂志,1992,8:360.

    [11] 陈国柱,章友康,邹万忠,等.乙型肝炎病毒在我国成人膜性肾病中的致病作用.中华肾脏病杂志,1996,12:176.

    收稿日期:1999-08-18

    修回日期:2000-02-07, 百拇医药