新型免疫抑制剂来氟米特药效学实验研究
作者：张丽丽 宋丹青 胡志君 高萍 李嗣英
单位：中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所，北京 100050
关键词：来氟米特(LFM)；自身免疫病；器官移植
中国抗生素杂志000316 摘 要 为验证来氟米特(LFM)的免疫抑制作用，应用BALB/C小鼠自身溶血性贫血、Wistar大鼠佐剂性关节炎及C57BL/6->BALB/C小鼠心肌移植模型，观察了LFM对抗自身红细胞抗体产生、炎症及移植排斥反应的预防和治疗作用。结果表明：(1)LFM 10mg/kg预防给药可明显抑制抗自身红细胞抗体的产生，治疗组30mg/kg可使升高的自身抗体水平显著降低；(2)LFM 10、20mg/kg预防给药可显著抑制关节的原发和继发性肿胀，20mg/kg治疗给药可使已肿胀的关节显著消退；(3)LFM 20mg/kg可使小鼠心肌移植存活时间显著延长。实验证明LFM在自身免疫病和器官移植等方面均具有良好的免疫抑制作用。
, 百拇医药
Pharmacodynamic study of leflunomide——a new immunosuppressant
Zhang Lili，Song Danqing，Hu Zhijun，Gao Ping，Li Siying
(Institute of Medicinal Biotechnology,CAMS & PUMC，Beijing 100050)
ABSTRACT Experimental autoimmune haemolytic anaemia in BALB/C mice,adjuvant arthritis in Wistar rats and murine split heart transplantation model from C57BL/6 to BALB/C mice were used to evaluate the immunosuppressive effects of leflunomide (LFM).Three aspects of results have been obtained.(1) LFM 10mg/kg/day effectively prevented the production of anti-erythrocyte auto antibodies and the treatment of LFM 30mg/(kg.day) led to a remarkable depression of the raised autoantibodies level.(2) 10 and 20mg/(kg.day) of LFM significantly inhibited the primary and secondary paw edema of the arthritis rats and LFM 20mg/(kg.day) reduced the paw edema of the established adjuvant arthrisis.(3) LFM 20mg/(kg.day) significantly prolonged the survival time of split transplanted hearts.In conclusion,LFM showed good immunesuppressive effects in autoimmune diseases and organ transplantation in mice and rats.
, 百拇医药
KEY WORDS Leflunomide (LFM)；Autoimmune disease；Organ transplantation
来氟米特(leflunomide，LFM)是1978年由德国的Hoechst公司合成的具有很强免疫调节和免疫抑制作用的异恶唑类小分子化合物，1985年以后在多种实验性自身免疫病如大鼠佐剂性关节炎，实验性过敏性脑脊髓炎、肾炎和小鼠SLE样病等中研究了它的抗炎和免疫抑制作用，结果表明它不仅可以预防这些实验性自身免疫病的发生，而且还表现了很好的治疗作用，停药后并不出现反跳[1～4]。在各种器官移植模型中它也具有显著的抗排斥作用。与亚治疗剂量CyA合用效果更显著[5～7]。我们使用本所合成室提供的LFM进行了免疫抑制作用的药效学研究，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
, 百拇医药
1.1.1 实验动物 Wistar大鼠，雄性，体重180～200g；BALB/C小鼠，18～20g雌雄不限；C57BL/6J乳鼠(<48h)，随机分组，每组5只。均购自中国医学科学院实验动物研究所繁殖场。
1.1.2 主要试剂 福氏完全佐剂：羊毛脂、石蜡油1∶2混匀灭菌；卡介菌(购自中国药品生物制品检定所)溶于生理水中与前者以1∶1混匀，制成乳剂。卡介苗终浓度10mg/ml，Coomb′s血清，本室自制[8]。
1.1.3 实验药物 LFM为本所合成室制备的白色结晶，纯度为98.7%，用0.1% CMC混悬至所需浓度。环孢素(CyA)为华北制药厂生产，批号950410，用少量无水乙醇溶解后加入橄榄油配成所需浓度。均口服给药，每日1次。
1.2 方法
1.2.1 小鼠自身溶血性贫血模型的建立 取SD大鼠心脏血，经洗涤后配成1×109个/ml的红细胞悬液，免疫BALB/C小鼠每只0.2ml(ip)，每周1次，共4次。每次免疫前从眼眶后静脉丛取血，用Coomb′s血清检测抗自身红细胞抗体产生及其滴度。各组实验数据取自然对数后，用t检验分析[8]。
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1.2.2 大鼠佐剂性关节炎模型的建立 Wistar大鼠乙醚麻醉，左足皮内注射福氏完全佐剂每只0.1ml，从注射当天(0d)起用排水法测定两踝关节以下的足爪体积，观察足肿胀及尾、耳结节形成情况，以右足肿胀程度作为继发性病变。结果用X±SD表示，t检验分析。
1.2.3 小鼠心肌移植实验 用1%戊巴比妥钠50mg/kg麻醉BALB/C小鼠作为为受试者，于耳廓背侧分离出约2mm×6mm的皮下隧道，取供者C57BL/6J乳鼠心脏，沿纵轴切开，半心移植至受者耳廓隧道内，术后第7天开始用心电图机监测移植心肌的存活情况，每天1次，心电消失之日即为心肌存活的终止时间。结果用平均存活天数±标准差表示(MST±SD)。
2 结果
2.1 LFM对实验性溶血性贫血小鼠产生抗自身红细胞抗体的抑制作用
LFM预防组从0～14d，治疗组从21～30d给药，结果(表1)表明，LFM预防组10mg/kg在用药过程中可以明显抑制抗自身红细胞抗体的产生，停药后呈轻度上升趋势，但仍明显低于对照组；20mg/kg可完全抑制自身抗体的升高，而且停药后观察20多天未见升高；治疗组(30mg/kg)用药1周后，自身抗体滴度由16.50±3.11降至5.00±0。停药后仍维持抵水平，且明显低于对照组。
, 百拇医药
表1 LFM对实验性溶血性贫血小鼠产生抗自身红细胞
抗体的抑制作用(抗体滴度，Log2值±SD) 剂量
(mg/kg)
大鼠红细胞免疫后的天数
14d
21d
28d
35d
预防给药
对照
8.67±1.03
9.83±0.98
, http://www.100md.com
11.67±6.35
13.5±7.78
10.0
6.17±0.41
6.17±0.41*
7.52±3.86
8.25±4.50
20.0
6.00±0.71
5.60±0.55*
5.25±0.50
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5.25±0.50
治疗给药
30.0
7.33±1.21
16.50±3.11
5.00±0
5.25±0.50+
与对照组相比：* P<0.01；与给药前相比：+ P<0.01。
2.2 LFM对大鼠佐剂性关节炎的预防和治疗作用
2.2.1 LFM对大鼠佐剂性关节炎原发性肿胀的抑制作用 LFM 10、20mg/kg预防给药(0～9d)，以CyA(50mg/kg)为对照药，结果(表2)表明LFM大剂量对注射佐剂引起的急性期肿胀有显著抑制作用，小剂量也有一定的抑制作用，但较弱。CyA在停药后10多天出现反跳，足肿程度显著升高，而LFM组虽略有增加，但明显小于CyA组。LFM以20mg/kg治疗给药(9～18d)可使已肿胀的关节显著消退。
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表2 LFM对大鼠佐剂性关节炎注射侧原发性足肿胀的抑制作用 组别
剂量
(mg/kg)
免疫后不同时间(d)的关节肿胀程度(ml±SD)
0d
3d
10d
13d
16d
28d
对照
0
, 百拇医药
1.11±0.05
3.27±0.40
2.99±0.59
2.96±0.66
3.36±0.83
2.71±0.34
LFM
10
1.16±0.07
2.92±0.30
2.52±0.22
2.32±0.17
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2.23±0.12*
2.33±0.27
20
1.10±0.04
2.36±0.28***
1.52±0.22
1.61±0.11
1.65±0.15***
1.99±0.30+
CyA
50
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1.14±0.04
2.05±0.63***
1.73±0.70
1.63±0.09
1.71±0.30**
4.10±0.71++
治疗
LFM
20
1.13±0.05
3.12±0.40
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2.79±0.57
2.43±0.31
2.07±0.24**
2.05±0.22#
与对照组相比：* P<0.05，** P<0.01，*** P<0.001； 与停药前相比：+ P<0.05，++ P<0.001；
与给药前相比：# P<0.001。
2.2.2 LFM对佐剂性关节炎大鼠继发性病变的抑制作用 以注射佐剂对侧足即右足肿胀作为继发性病变观察指标，结果(表3)表明，LFM预防和治疗给药均可显著抑制大鼠佐剂性关节炎的继发性足肿胀，且大剂量组作用优于CyA组，CyA在停药后有明显反跳现象，而LFM组虽略有增加，但无显著性区别。
, 百拇医药
2.3 LFM对小鼠心肌移植排斥反应的抑制作用
LFM 20mg/kg给药，结果(表4)给药组移植物存活时间显著长于对照组。
3 讨论
自1985年Bartlett等[1]将LFM作为抗风湿药用于预防动物佐剂性关节炎并取得满意效果后，国外对LFM进行了多方面的研究。在自身免疫病方面有佐剂性关节炎和糖蛋白诱发的多关节炎[9]、MFL/Lpr小鼠系统性红斑狼疮[4]、实验性过敏性脑脊髓炎[3]、器官特异性肾病[2]、实验性重症肌无力[10]、自身免疫性葡萄膜炎[11]、实验性自身免疫性糖尿病等，LFM在上述多种模型中均有显著的预防和治疗作用，可改善或减轻自身免疫病的各种观察指标，有效剂量是安全而能耐受的。
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小鼠实验性自身溶血性贫血是一种血液系统的自身免疫病，它类似于人体的热型自身溶血性贫血，给小鼠注射大鼠红细胞诱发产生抗小鼠自身红细胞抗体产生。用LFM预防和治疗，可显著抑制抗自身红细胞抗体产生，此结果进一步证实了LFM对自身免疫病的疗效。在我们进行预防和治疗大鼠佐剂性关节炎实验中，也表明LFM具有显著免疫抑制作用，并随剂量增大而疗效增强，且停药后基本不产生反跳现象，较CyA为好。
表3 LFM对大鼠佐剂注射对侧的继发性足肿胀的抑制作用 组别
剂量
(mg/kg)
免疫后不同时间(d)的关节肿胀程度(ml±SD)
0d
3d
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10d
13d
16d
28d
对照
0
1.07±0.06
1.13±0.04
1.34±0.06
1.54±0.53
1.81±0.60
1.57±0.31
, 百拇医药 LFM
10
1.16±0.06
1.13±0.03
1.22±0.10
1.31±0.07
1.28±0.07
1.31±0.11
20
1.10±0.04
1.08±0.08
1.12±0.08
, http://www.100md.com
1.13±0.03
1.15±0.08*
1.24±1.10
CyA
50
1.14±0.04
1.14±0.06
1.18±0.12
1.20±0.07
1.18±0.13*
1.85±0.35++
, 百拇医药
治疗
LFM
20
1.12±0.07
1.17±0.08
1.34±0.10
1.32±0.08
1.18±0.09*
1.31±0.15
与对照组相比：* P<0.05，** P<0.01，*** P<0.001； 与停药前相比：+ P<0.05，++ P<0.001。表4 LFM对小鼠心肌移植排斥反应的抑制 组别
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移植物存活天数±SD
P值
对照组
8.50±0.84
LFM 20mg/kg
12.0±1.09
<0.001
在抗移植排斥反应方面，国外的研究也很广泛，包括预防和治疗多种动物的实验性肾移植[5]、小肠移植[12]、心脏移植[6]等，LFM都表现了很强的抗排斥反应的作用，对异种移植的排斥反应有很好的效果[13]，与低剂量CyA合用好于单独使用[7]。我们的鼠心肌移植实验也证明它具有良好的抗排斥作用。
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随着LFM的研究不断深入，它的作用机制也逐渐被阐明。LFM可抑制T、B细胞的活化和增殖，抑制抗体产生[14，21，22]，抑制IL-2的产生和对IL-2的反应性[15，16]，促进免疫抑制性细胞因子(TGF-β1)的产生，同时抑制单核细胞的粘附作用及炎症反应中的诱导性环氧化酶(COX-2)通路[17，18]。因此LFM对细胞和体液等多种免疫机制均有抑制作用，在细胞周期中LFM抑制细胞进入S期和G2/M期[19]。对细胞核苷酸代谢的研究中发现，LFM最中心的作用是抑制嘧啶核苷酸生物合成的第四酶即DHO-DH，从而耗尽嘧啶核苷酸，抑制细胞增殖[20，23，24]。
综上所述，我们的实验结果与文献的报道均证明LFM在动物实验性自身免疫病和移植模型上均表现很好的预防和治疗作用。其作用机制与环孢素等常用免疫抑制不同，也与非甾体类抗炎药不同，所以在国内将其开发用于临床自身免疫病治疗的前景是非常好的。
, 百拇医药
张丽丽,女,生于1971年,在读硕士,实习研究员.
参考文献
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收稿：1999-07-02, 百拇医药
单位：中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所，北京 100050
关键词：来氟米特(LFM)；自身免疫病；器官移植
中国抗生素杂志000316 摘 要 为验证来氟米特(LFM)的免疫抑制作用，应用BALB/C小鼠自身溶血性贫血、Wistar大鼠佐剂性关节炎及C57BL/6->BALB/C小鼠心肌移植模型，观察了LFM对抗自身红细胞抗体产生、炎症及移植排斥反应的预防和治疗作用。结果表明：(1)LFM 10mg/kg预防给药可明显抑制抗自身红细胞抗体的产生，治疗组30mg/kg可使升高的自身抗体水平显著降低；(2)LFM 10、20mg/kg预防给药可显著抑制关节的原发和继发性肿胀，20mg/kg治疗给药可使已肿胀的关节显著消退；(3)LFM 20mg/kg可使小鼠心肌移植存活时间显著延长。实验证明LFM在自身免疫病和器官移植等方面均具有良好的免疫抑制作用。
, 百拇医药
Pharmacodynamic study of leflunomide——a new immunosuppressant
Zhang Lili，Song Danqing，Hu Zhijun，Gao Ping，Li Siying
(Institute of Medicinal Biotechnology,CAMS & PUMC，Beijing 100050)
ABSTRACT Experimental autoimmune haemolytic anaemia in BALB/C mice,adjuvant arthritis in Wistar rats and murine split heart transplantation model from C57BL/6 to BALB/C mice were used to evaluate the immunosuppressive effects of leflunomide (LFM).Three aspects of results have been obtained.(1) LFM 10mg/kg/day effectively prevented the production of anti-erythrocyte auto antibodies and the treatment of LFM 30mg/(kg.day) led to a remarkable depression of the raised autoantibodies level.(2) 10 and 20mg/(kg.day) of LFM significantly inhibited the primary and secondary paw edema of the arthritis rats and LFM 20mg/(kg.day) reduced the paw edema of the established adjuvant arthrisis.(3) LFM 20mg/(kg.day) significantly prolonged the survival time of split transplanted hearts.In conclusion,LFM showed good immunesuppressive effects in autoimmune diseases and organ transplantation in mice and rats.
, 百拇医药
KEY WORDS Leflunomide (LFM)；Autoimmune disease；Organ transplantation
来氟米特(leflunomide，LFM)是1978年由德国的Hoechst公司合成的具有很强免疫调节和免疫抑制作用的异恶唑类小分子化合物，1985年以后在多种实验性自身免疫病如大鼠佐剂性关节炎，实验性过敏性脑脊髓炎、肾炎和小鼠SLE样病等中研究了它的抗炎和免疫抑制作用，结果表明它不仅可以预防这些实验性自身免疫病的发生，而且还表现了很好的治疗作用，停药后并不出现反跳[1～4]。在各种器官移植模型中它也具有显著的抗排斥作用。与亚治疗剂量CyA合用效果更显著[5～7]。我们使用本所合成室提供的LFM进行了免疫抑制作用的药效学研究，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
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1.1.1 实验动物 Wistar大鼠，雄性，体重180～200g；BALB/C小鼠，18～20g雌雄不限；C57BL/6J乳鼠(<48h)，随机分组，每组5只。均购自中国医学科学院实验动物研究所繁殖场。
1.1.2 主要试剂 福氏完全佐剂：羊毛脂、石蜡油1∶2混匀灭菌；卡介菌(购自中国药品生物制品检定所)溶于生理水中与前者以1∶1混匀，制成乳剂。卡介苗终浓度10mg/ml，Coomb′s血清，本室自制[8]。
1.1.3 实验药物 LFM为本所合成室制备的白色结晶，纯度为98.7%，用0.1% CMC混悬至所需浓度。环孢素(CyA)为华北制药厂生产，批号950410，用少量无水乙醇溶解后加入橄榄油配成所需浓度。均口服给药，每日1次。
1.2 方法
1.2.1 小鼠自身溶血性贫血模型的建立 取SD大鼠心脏血，经洗涤后配成1×109个/ml的红细胞悬液，免疫BALB/C小鼠每只0.2ml(ip)，每周1次，共4次。每次免疫前从眼眶后静脉丛取血，用Coomb′s血清检测抗自身红细胞抗体产生及其滴度。各组实验数据取自然对数后，用t检验分析[8]。
, http://www.100md.com
1.2.2 大鼠佐剂性关节炎模型的建立 Wistar大鼠乙醚麻醉，左足皮内注射福氏完全佐剂每只0.1ml，从注射当天(0d)起用排水法测定两踝关节以下的足爪体积，观察足肿胀及尾、耳结节形成情况，以右足肿胀程度作为继发性病变。结果用X±SD表示，t检验分析。
1.2.3 小鼠心肌移植实验 用1%戊巴比妥钠50mg/kg麻醉BALB/C小鼠作为为受试者，于耳廓背侧分离出约2mm×6mm的皮下隧道，取供者C57BL/6J乳鼠心脏，沿纵轴切开，半心移植至受者耳廓隧道内，术后第7天开始用心电图机监测移植心肌的存活情况，每天1次，心电消失之日即为心肌存活的终止时间。结果用平均存活天数±标准差表示(MST±SD)。
2 结果
2.1 LFM对实验性溶血性贫血小鼠产生抗自身红细胞抗体的抑制作用
LFM预防组从0～14d，治疗组从21～30d给药，结果(表1)表明，LFM预防组10mg/kg在用药过程中可以明显抑制抗自身红细胞抗体的产生，停药后呈轻度上升趋势，但仍明显低于对照组；20mg/kg可完全抑制自身抗体的升高，而且停药后观察20多天未见升高；治疗组(30mg/kg)用药1周后，自身抗体滴度由16.50±3.11降至5.00±0。停药后仍维持抵水平，且明显低于对照组。
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表1 LFM对实验性溶血性贫血小鼠产生抗自身红细胞
抗体的抑制作用(抗体滴度，Log2值±SD) 剂量
(mg/kg)
大鼠红细胞免疫后的天数
14d
21d
28d
35d
预防给药
对照
8.67±1.03
9.83±0.98
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11.67±6.35
13.5±7.78
10.0
6.17±0.41
6.17±0.41*
7.52±3.86
8.25±4.50
20.0
6.00±0.71
5.60±0.55*
5.25±0.50
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5.25±0.50
治疗给药
30.0
7.33±1.21
16.50±3.11
5.00±0
5.25±0.50+
与对照组相比：* P<0.01；与给药前相比：+ P<0.01。
2.2 LFM对大鼠佐剂性关节炎的预防和治疗作用
2.2.1 LFM对大鼠佐剂性关节炎原发性肿胀的抑制作用 LFM 10、20mg/kg预防给药(0～9d)，以CyA(50mg/kg)为对照药，结果(表2)表明LFM大剂量对注射佐剂引起的急性期肿胀有显著抑制作用，小剂量也有一定的抑制作用，但较弱。CyA在停药后10多天出现反跳，足肿程度显著升高，而LFM组虽略有增加，但明显小于CyA组。LFM以20mg/kg治疗给药(9～18d)可使已肿胀的关节显著消退。
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表2 LFM对大鼠佐剂性关节炎注射侧原发性足肿胀的抑制作用 组别
剂量
(mg/kg)
免疫后不同时间(d)的关节肿胀程度(ml±SD)
0d
3d
10d
13d
16d
28d
对照
0
, 百拇医药
1.11±0.05
3.27±0.40
2.99±0.59
2.96±0.66
3.36±0.83
2.71±0.34
LFM
10
1.16±0.07
2.92±0.30
2.52±0.22
2.32±0.17
, http://www.100md.com
2.23±0.12*
2.33±0.27
20
1.10±0.04
2.36±0.28***
1.52±0.22
1.61±0.11
1.65±0.15***
1.99±0.30+
CyA
50
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1.14±0.04
2.05±0.63***
1.73±0.70
1.63±0.09
1.71±0.30**
4.10±0.71++
治疗
LFM
20
1.13±0.05
3.12±0.40
, http://www.100md.com
2.79±0.57
2.43±0.31
2.07±0.24**
2.05±0.22#
与对照组相比：* P<0.05，** P<0.01，*** P<0.001； 与停药前相比：+ P<0.05，++ P<0.001；
与给药前相比：# P<0.001。
2.2.2 LFM对佐剂性关节炎大鼠继发性病变的抑制作用 以注射佐剂对侧足即右足肿胀作为继发性病变观察指标，结果(表3)表明，LFM预防和治疗给药均可显著抑制大鼠佐剂性关节炎的继发性足肿胀，且大剂量组作用优于CyA组，CyA在停药后有明显反跳现象，而LFM组虽略有增加，但无显著性区别。
, 百拇医药
2.3 LFM对小鼠心肌移植排斥反应的抑制作用
LFM 20mg/kg给药，结果(表4)给药组移植物存活时间显著长于对照组。
3 讨论
自1985年Bartlett等[1]将LFM作为抗风湿药用于预防动物佐剂性关节炎并取得满意效果后，国外对LFM进行了多方面的研究。在自身免疫病方面有佐剂性关节炎和糖蛋白诱发的多关节炎[9]、MFL/Lpr小鼠系统性红斑狼疮[4]、实验性过敏性脑脊髓炎[3]、器官特异性肾病[2]、实验性重症肌无力[10]、自身免疫性葡萄膜炎[11]、实验性自身免疫性糖尿病等，LFM在上述多种模型中均有显著的预防和治疗作用，可改善或减轻自身免疫病的各种观察指标，有效剂量是安全而能耐受的。
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小鼠实验性自身溶血性贫血是一种血液系统的自身免疫病，它类似于人体的热型自身溶血性贫血，给小鼠注射大鼠红细胞诱发产生抗小鼠自身红细胞抗体产生。用LFM预防和治疗，可显著抑制抗自身红细胞抗体产生，此结果进一步证实了LFM对自身免疫病的疗效。在我们进行预防和治疗大鼠佐剂性关节炎实验中，也表明LFM具有显著免疫抑制作用，并随剂量增大而疗效增强，且停药后基本不产生反跳现象，较CyA为好。
表3 LFM对大鼠佐剂注射对侧的继发性足肿胀的抑制作用 组别
剂量
(mg/kg)
免疫后不同时间(d)的关节肿胀程度(ml±SD)
0d
3d
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10d
13d
16d
28d
对照
0
1.07±0.06
1.13±0.04
1.34±0.06
1.54±0.53
1.81±0.60
1.57±0.31
, 百拇医药 LFM
10
1.16±0.06
1.13±0.03
1.22±0.10
1.31±0.07
1.28±0.07
1.31±0.11
20
1.10±0.04
1.08±0.08
1.12±0.08
, http://www.100md.com
1.13±0.03
1.15±0.08*
1.24±1.10
CyA
50
1.14±0.04
1.14±0.06
1.18±0.12
1.20±0.07
1.18±0.13*
1.85±0.35++
, 百拇医药
治疗
LFM
20
1.12±0.07
1.17±0.08
1.34±0.10
1.32±0.08
1.18±0.09*
1.31±0.15
与对照组相比：* P<0.05，** P<0.01，*** P<0.001； 与停药前相比：+ P<0.05，++ P<0.001。表4 LFM对小鼠心肌移植排斥反应的抑制 组别
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移植物存活天数±SD
P值
对照组
8.50±0.84
LFM 20mg/kg
12.0±1.09
<0.001
在抗移植排斥反应方面，国外的研究也很广泛，包括预防和治疗多种动物的实验性肾移植[5]、小肠移植[12]、心脏移植[6]等，LFM都表现了很强的抗排斥反应的作用，对异种移植的排斥反应有很好的效果[13]，与低剂量CyA合用好于单独使用[7]。我们的鼠心肌移植实验也证明它具有良好的抗排斥作用。
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随着LFM的研究不断深入，它的作用机制也逐渐被阐明。LFM可抑制T、B细胞的活化和增殖，抑制抗体产生[14，21，22]，抑制IL-2的产生和对IL-2的反应性[15，16]，促进免疫抑制性细胞因子(TGF-β1)的产生，同时抑制单核细胞的粘附作用及炎症反应中的诱导性环氧化酶(COX-2)通路[17，18]。因此LFM对细胞和体液等多种免疫机制均有抑制作用，在细胞周期中LFM抑制细胞进入S期和G2/M期[19]。对细胞核苷酸代谢的研究中发现，LFM最中心的作用是抑制嘧啶核苷酸生物合成的第四酶即DHO-DH，从而耗尽嘧啶核苷酸，抑制细胞增殖[20，23，24]。
综上所述，我们的实验结果与文献的报道均证明LFM在动物实验性自身免疫病和移植模型上均表现很好的预防和治疗作用。其作用机制与环孢素等常用免疫抑制不同，也与非甾体类抗炎药不同，所以在国内将其开发用于临床自身免疫病治疗的前景是非常好的。
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张丽丽,女,生于1971年,在读硕士,实习研究员.
参考文献
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收稿：1999-07-02, 百拇医药