北京地区学龄前儿童鼻咽部菌群的调查
作者：陈东科 王大光 梁玉珍 张秀珍
单位：100730 卫生部北京医院检验科
关键词：
中华儿科杂志990816 急性下呼吸道感染是发展中国家儿童发病和死亡的主要病因。在我国流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌是引起儿童急性细菌性肺炎的主要致病菌种。寄生于上呼吸道的菌群，在机体抵抗力降低时，可引起局部及全身感染。因此，了解正常小儿上呼吸道菌群状况，有助于阐明致病的机理。我们于1998年2月对本市3所幼儿园的156 名健康儿童鼻咽拭子进行了细菌培养和鉴定，以了解带菌情况，并对结果进行了分析和讨论。
对象：北京地区3所幼儿园健康儿童156名。其中男童 84名，女童72名，1～3岁年龄组28名，4～6岁年龄组128名。调查当时幼儿园内无流感流行。
, 百拇医药 方法：用消毒棉棒取小儿鼻咽分泌物无菌封闭保存，在半小时内送实验室进行接种培养。每份样品分别接种在5%羊血琼脂平板及含50 μg/ml万古霉素的5%兔血巧克力平板上，在8%CO2环境中，35℃过夜培养。菌种的分离、鉴定及药物敏感试验均按照文献[1]进行。嗜血杆菌鉴定用Ⅹ、Ⅴ因子及Nitrocefin(测β-内酰胺酶用)购自美国BBL公司；培养基、API鉴定试条、葡萄球菌凝固酶血凝试剂及苯唑青霉素(OX)药敏纸片均购自法国生物梅里埃公司；流感嗜血杆菌分型血清由卫生部北京生物制品研究所吴丽华教授提供。实验过程以金黄色葡萄球菌ATCC25923、肺炎链球菌ATCC49619、流感嗜血杆菌ATCC10211和ATCC49766为质控菌种。
结果：(1)小儿鼻咽分泌物中的细菌检出率为100%(表1)，共分离出10种294株细菌。156名被检儿童标本中， 1份样品中同时检出3种(或以上)细菌的有39例(25.0%)，同时检出2种细菌的有70例(44.9%)，检出1种细菌的有47例(30.1%)。(2)两个年龄组细菌检出率比较：1～3岁年龄组中肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌和流感嗜血杆菌的检出率分别为71%(20/28)、7%(2/28)和14%(4/28); 4～6岁年龄组的检出率分别为30%(38/128)、18%(23/128)和13%(16/128)。(3)不同性别细菌检出率比较：男童中上述三菌的检出率分别为36%(30/84)、18%(15/84)和14%(12/84)；女童检出率分别为39%(28/72)、14%(10/72)和11%(8/72)。(4)流感嗜血杆菌血清分型结果：Hib 1株、Hie 1株、Hif 1株，各占5%，不可分型17株，占85%(17/20)；β-内酰胺酶检测均为阴性。(5) 对分离到的58株肺炎链球菌用1 μg的OX纸片对耐青霉素的肺炎链球菌(PRP)进行筛选，共检出5株PRP，占9%(5/58)，处于中界(I)范围1株，占2%(1/58)，所有菌株β-内酰胺酶测试结果均为阴性。(6)分离出的25株金黄色葡萄球菌中，产生β-内酰胺酶的占76%(19/25)，对苯唑青霉素耐药的菌株检出率为4%(1/25)。
, 百拇医药
表1 156名儿童鼻咽分泌物中的细菌检出率 细菌种类
分离
株数
检出率
(%)
构成比
(%)
假白喉棒状杆菌
93
59.6
31.6
肺炎链球菌
56
, 百拇医药
35.9
19.7
副流感嗜血杆菌
40
24.4
13.6
表皮葡萄球菌
32
20.5
10.9
金黄色葡萄球菌
25
17.3
, 百拇医药
8.5
流感嗜血杆菌
20
12.8
6.8
草绿色链球菌
11
7.1
3.8
莫拉菌属
10
6.4
3.4
, 百拇医药
奈瑟菌属
4
2.6
1.4
A群链球菌
1
0.6
0.3
合计
294
100
讨论：(1)调查结果显示，健康儿童鼻咽部寄生菌谱较为宽广。临床上引起小儿呼吸道感染的主要致病菌种，如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌及流感嗜血杆菌，在本次调查中分离出的10 种细菌中占第2、第5和第6位，这一结果不容忽视。(2)学龄前儿童鼻咽部肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌及流感嗜血杆菌的携带率与年龄有相关性，而与性别无关。(3)肺炎链球菌是小儿细菌性肺炎的主要致病菌种，我们的调查结果显示肺炎链球菌在健康儿童鼻咽部的携带率为35.9%,其中PRP占所分离肺炎链球菌的10%(6/58)，这一结果足以引起流行病及临床医生的重视。(4)在早先的报道中，金黄色葡萄球菌在小儿细菌性肺炎中占首位。近年来，由于分离培养技术的提高，流感嗜血杆菌及肺炎链球菌的分离率逐渐上升，金黄色葡萄球菌的分离率降至第3、4位。我们的调查结果表明，在健康儿童鼻咽部 金黄色葡萄球菌的携带率为 17.3%(25/156)，其中产酶株占76%，对苯唑青霉素耐药株为4%。由于该菌引起感染的严重性，国内外报道很多，应引起有关部门的重视。(5)文献报道在严重的下呼吸道感染中，约有5%～10%是由流感嗜血杆菌引起，其中以Hib感染最为严重。但寄生于呼吸道的流感嗜血杆菌多为荚膜缺陷型，现有的分型血清是由流感嗜血杆菌的荚膜多糖制备而成，故不能将其分型。我们对所分离的20株 流感嗜血杆菌血型分型结果进行分析， 不可分型株占85%(17/20)，Hib只分离到1株， 所有菌株β-内酰胺酶均为阴性。
本次调查中所分离到的其他菌群，或是临床意义不明确，或是分离率不高，这里不多作讨论，有待日后进一步研究。
参考文献
1 叶应妮，王毓三. 全国临床检验操作规程.第2版 .南京：东南大学出版社出版, 1997. 347-570.
(收稿：1998-08-10 修回：1999-01-25), 百拇医药
单位：100730 卫生部北京医院检验科
关键词：
中华儿科杂志990816 急性下呼吸道感染是发展中国家儿童发病和死亡的主要病因。在我国流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌是引起儿童急性细菌性肺炎的主要致病菌种。寄生于上呼吸道的菌群，在机体抵抗力降低时，可引起局部及全身感染。因此，了解正常小儿上呼吸道菌群状况，有助于阐明致病的机理。我们于1998年2月对本市3所幼儿园的156 名健康儿童鼻咽拭子进行了细菌培养和鉴定，以了解带菌情况，并对结果进行了分析和讨论。
对象：北京地区3所幼儿园健康儿童156名。其中男童 84名，女童72名，1～3岁年龄组28名，4～6岁年龄组128名。调查当时幼儿园内无流感流行。
, 百拇医药 方法：用消毒棉棒取小儿鼻咽分泌物无菌封闭保存，在半小时内送实验室进行接种培养。每份样品分别接种在5%羊血琼脂平板及含50 μg/ml万古霉素的5%兔血巧克力平板上，在8%CO2环境中，35℃过夜培养。菌种的分离、鉴定及药物敏感试验均按照文献[1]进行。嗜血杆菌鉴定用Ⅹ、Ⅴ因子及Nitrocefin(测β-内酰胺酶用)购自美国BBL公司；培养基、API鉴定试条、葡萄球菌凝固酶血凝试剂及苯唑青霉素(OX)药敏纸片均购自法国生物梅里埃公司；流感嗜血杆菌分型血清由卫生部北京生物制品研究所吴丽华教授提供。实验过程以金黄色葡萄球菌ATCC25923、肺炎链球菌ATCC49619、流感嗜血杆菌ATCC10211和ATCC49766为质控菌种。
结果：(1)小儿鼻咽分泌物中的细菌检出率为100%(表1)，共分离出10种294株细菌。156名被检儿童标本中， 1份样品中同时检出3种(或以上)细菌的有39例(25.0%)，同时检出2种细菌的有70例(44.9%)，检出1种细菌的有47例(30.1%)。(2)两个年龄组细菌检出率比较：1～3岁年龄组中肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌和流感嗜血杆菌的检出率分别为71%(20/28)、7%(2/28)和14%(4/28); 4～6岁年龄组的检出率分别为30%(38/128)、18%(23/128)和13%(16/128)。(3)不同性别细菌检出率比较：男童中上述三菌的检出率分别为36%(30/84)、18%(15/84)和14%(12/84)；女童检出率分别为39%(28/72)、14%(10/72)和11%(8/72)。(4)流感嗜血杆菌血清分型结果：Hib 1株、Hie 1株、Hif 1株，各占5%，不可分型17株，占85%(17/20)；β-内酰胺酶检测均为阴性。(5) 对分离到的58株肺炎链球菌用1 μg的OX纸片对耐青霉素的肺炎链球菌(PRP)进行筛选，共检出5株PRP，占9%(5/58)，处于中界(I)范围1株，占2%(1/58)，所有菌株β-内酰胺酶测试结果均为阴性。(6)分离出的25株金黄色葡萄球菌中，产生β-内酰胺酶的占76%(19/25)，对苯唑青霉素耐药的菌株检出率为4%(1/25)。
, 百拇医药
表1 156名儿童鼻咽分泌物中的细菌检出率 细菌种类
分离
株数
检出率
(%)
构成比
(%)
假白喉棒状杆菌
93
59.6
31.6
肺炎链球菌
56
, 百拇医药
35.9
19.7
副流感嗜血杆菌
40
24.4
13.6
表皮葡萄球菌
32
20.5
10.9
金黄色葡萄球菌
25
17.3
, 百拇医药
8.5
流感嗜血杆菌
20
12.8
6.8
草绿色链球菌
11
7.1
3.8
莫拉菌属
10
6.4
3.4
, 百拇医药
奈瑟菌属
4
2.6
1.4
A群链球菌
1
0.6
0.3
合计
294
100
讨论：(1)调查结果显示，健康儿童鼻咽部寄生菌谱较为宽广。临床上引起小儿呼吸道感染的主要致病菌种，如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌及流感嗜血杆菌，在本次调查中分离出的10 种细菌中占第2、第5和第6位，这一结果不容忽视。(2)学龄前儿童鼻咽部肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌及流感嗜血杆菌的携带率与年龄有相关性，而与性别无关。(3)肺炎链球菌是小儿细菌性肺炎的主要致病菌种，我们的调查结果显示肺炎链球菌在健康儿童鼻咽部的携带率为35.9%,其中PRP占所分离肺炎链球菌的10%(6/58)，这一结果足以引起流行病及临床医生的重视。(4)在早先的报道中，金黄色葡萄球菌在小儿细菌性肺炎中占首位。近年来，由于分离培养技术的提高，流感嗜血杆菌及肺炎链球菌的分离率逐渐上升，金黄色葡萄球菌的分离率降至第3、4位。我们的调查结果表明，在健康儿童鼻咽部 金黄色葡萄球菌的携带率为 17.3%(25/156)，其中产酶株占76%，对苯唑青霉素耐药株为4%。由于该菌引起感染的严重性，国内外报道很多，应引起有关部门的重视。(5)文献报道在严重的下呼吸道感染中，约有5%～10%是由流感嗜血杆菌引起，其中以Hib感染最为严重。但寄生于呼吸道的流感嗜血杆菌多为荚膜缺陷型，现有的分型血清是由流感嗜血杆菌的荚膜多糖制备而成，故不能将其分型。我们对所分离的20株 流感嗜血杆菌血型分型结果进行分析， 不可分型株占85%(17/20)，Hib只分离到1株， 所有菌株β-内酰胺酶均为阴性。
本次调查中所分离到的其他菌群，或是临床意义不明确，或是分离率不高，这里不多作讨论，有待日后进一步研究。
参考文献
1 叶应妮，王毓三. 全国临床检验操作规程.第2版 .南京：东南大学出版社出版, 1997. 347-570.
(收稿：1998-08-10 修回：1999-01-25), 百拇医药