牙周炎患者治疗前后龈沟液中可溶性细胞间粘附分子－1的变化108-110
作者：唐倩 梁焕友 刘穗芳 刘国萍
单位：广东中山医科大学口腔医学院 510630
关键词：牙周炎；龈沟液；可溶性细胞间粘附分子-1
实用口腔医学杂志000208 〔摘要〕 目的：了解成人牙周炎患者治疗前后龈沟液(GCF)中可溶性细胞间粘 附分子-1(sICAM-1)含量的变化。方法：采用常规滤纸条 法收集正常成年人以及成年人牙周炎患者治疗前后的GCF样本，用ELISA法检测其sICAM-1的 含量。结果：治疗后GCF中sICAM-1的水平显著下降(P<0.001)。 结论：GCF中sICAM-1水平可作为评价牙周炎症状态的一项较为敏感 和客观的实验指标。了解成人牙周炎患者治疗前后龈沟液(GCF)中可溶性细胞间粘 附分子-1(sICAM-1)含量的变化。方法：采用常规滤纸条 法收集正常成年人以及成年人牙周炎患者治疗前后的GCF样本，用ELISA法检测其sICAM-1的 含量。结果：治疗后GCF中sICAM-1的水平显著下降(P<0.001)。 结论：GCF中sICAM-1水平可作为评价牙周炎症状态的一项较为敏感 和客观的实验指标。
, 百拇医药
中图分类号：R781.4+2 文献标识码：A 文章编号：1001-3733(2000)02-0108-03
Soluble intercellular adhesion molecule -1 level in gingival crevicular fluid in the patients with periodontitis before and after conventional periodontal tre atment
Tang Qian,Liang Huanyou,Liu Suifang
(Department of Stomatology,Third Affili ated Hospital of Sun Yat-sen University of Medical Sciences.Guangzhou 510630)
, 百拇医药
〔Abstract〕Objective:To Study the soluble intercellular adhesion mol ecule (GCF-sICAM-1) level in gingival crevicular fluid (GCF) in the patients w ith periodontitis before and after conventional treatment.Methods:GCF-sICAM-1 content was analyzed using an ELISA technique following ca reful sampling of GCF with standardzed filter strips.Results:GCF-sICAM-1 levels (kU/ml) were 272.07 and 141.42 respectively before and 1 week after periodontal treatment (P<0.01),that was 70.75 1 month after trea tment.Conclusion:GCF-sICAM-1 level may be a sensitive an d objective marker for detection of periodontal tissue inflammation.
, 百拇医药
Key words Periodontitis;Gingival crevicular fluid; Soluble in tercellular adhesion molecule-1
在以前的实验中，我们已证实了龈沟液中有sICAM-1的存在，并且其含量在牙周健康者 、边缘性龈炎以及成人牙周炎患者中呈上升趋势(结果将另文讨论)。然而对于重度成人牙周 炎患者治疗前后，龈沟液中的sICAM-1的变化规律尚不清楚，因此本研究将对重度成人牙周 炎患者治疗前后龈沟液中sICAM-1的含量进行监测，以了解GCF中sICAM-1水平变化与临床 症状的关系，用于指导临床治疗。
1 材料和方法
1.1 病例选择
从我科门诊患者中采取完全随机抽样方法选择研究对象11人，全部研究对象要求 全身健康，无系统性疾病，3个月内未使用过抗生素，半年内无牙周治疗史，妇女未妊娠。 根据临床检查情况分为2组(每人各选择2～4个牙齿，分别位于4个不同象限)：牙周健康组(H )5人(17个牙)；重度成年人牙周炎组(AP)6人(13牙)，该组受检牙要求牙周袋深度(PD)>4 mm ，牙槽骨吸收量>根长的1/2。2组平均年龄分别为28.7岁和53.8岁。
, 百拇医药
1.2 临床检查项目
除检测菌斑指数〔plaque index,PLI,按Silness和Lue(1964)分4度记录〕、出血指数〔blee ding index,BI,按Mazza(1981)分6度记录〕外，还按照口腔内科学中介绍的方法，测定牙周 探诊深度(probing depth,PD)和附着丧失(attachment loss,AL),并对患牙进行X线根尖片检 查，所有患者的检查均由同一人完成。
1.3 GCF的收集
采用常规滤纸条法取样，将牙隔湿并去除龈上菌斑，将3个已用 分析天平称重的定量滤纸条(2 mm×8 mm)分别放在该牙的唇(颊)侧近中、远中和中央牙周袋 口30 s后取出(若有血迹则弃去另选一牙)。将3个定量滤纸条作为一个样本，取出后再称重 ，减去原重量，与比重(约1 mg/μl)换算成体积(μl)。称重后样本立即放入微离心管中， -70 ℃冻存。在对重度成人牙周炎患者进行牙周治疗后1周、4周再分别取样一次，并记录 各项牙周临床指标，所取样本在两个月内完成定量分析。
, 百拇医药
1.4 治疗方法
采用龈上、龈下洁治，调整咬合，牙周袋内放置甲硝唑 药条等局部治疗方法，并同时给予口服利君沙、灭滴灵和牙周宁。
1.5 GCF中sICAM-1的检测
从-70 ℃中取出样本，室温解冻，每管中分别加入一定量的体积分数为0.05% Tw een-20洗提液，使之成为1∶100的定比稀释液，室温摇床中(150±20) r/min(r=5 cm)放置 1 h，4 ℃、10 000 r/min(r=5 cm)离心10 min，取上清液。利用ICAM-1试剂盒，用EL ISA法对上清液进行检测。
1.6 统计学处理
用SPSS统计软件包对数据进行处理。
2 结 果
, 百拇医药
在对2组GCF-sICAM-1的表达水平的比较中发现，与健康组相比，AP组的sICAM-1 的表达明显增强，差异存在着显著性(P<0.001)，结果见表1。
表1 2组受检牙GCF中sICAM-1的比较 (kU/L) 分组
牙数
s
t值
P值
H
17
27.28
24.32
, 百拇医药
7.42
<0.001
AP
13
272.07
133.91
重度成人牙周炎患牙治疗前后牙周各项指标的追踪检查可见，治疗后牙周临 床症状有明显的改善，除AL外，其余指标均显著下降(P<0.01)，这表明BI、PD及PLI能 较好地反应牙周炎症状况。各项牙周指标的变化情况见表2。表2 AP组治疗前后各项牙周指标的比较
牙周指数
治疗前
治疗后1周
, http://www.100md.com
治疗后1月
F值
P值
BI
2.92±0.76
1.15±0.38
0.62±0.49
59.22
<0.01
PLI
2.31±0.48
0.69±0.48
, 百拇医药 0.54±0.52
99.13
<0.01
PD(mm)
5.83±1.27
3.79±1.02
3.20±0.37
45.02
<0.01
AL(mm)
5.10±0.45
4.95±0.46
, http://www.100md.com
4.85±0.43
3.26
>0.05
治疗后GCF中sICAM-1的水平明显下降，在治疗1周时，GCF-sICAM-1的水平由治疗前 的均数272.07 kU/L下降为141.42 kU/L，这种变化与牙周各项临床指标的变化相一致。治疗 前后GCF中sICAM-1的水平变化见表3。
3 讨 论
细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是介导细胞间粘附的重要功能分子，它能调节炎症信息的传递，参与机体的免 疫调节，促进白细胞在炎症或损伤部位的聚集，影响T细胞、B细胞的活化及其效应〔1 〕。近年来国外一些研究已证实细菌脂多糖能诱导牙周组织ICAM-1的高度表达〔2〕 ，而ICAM-1表达的增强能促进白细胞在牙周炎症区的聚集和活化，是牙周局部炎症反应的 前提和基础，无论在边缘性龈炎或慢性牙周炎的病损中，都存在随着ICAM-1表达水平的增 高，相应的炎症程度也随之加重的现象〔3,4〕。但对sICAM-1在牙周炎发生、发展 、转归过程中的变化情况，目前尚不完全清楚。
, 百拇医药
表3 不同取样时间里sICAM-1水平的变化 (kU/L)
取样时间
n
s
t值(两两比较)
P值
治疗前(t1)
13
272.07
133.91
4.97(t1与t2)
, http://www.100md.com
<0.001
治疗后1周(t2)
13
141.42
54.92
6.23(t与t)
<0.001
治疗后1月(t3)
13
70.75
30.33
7.06(t3与t1)
, 百拇医药
<0.001
sICAM-1是膜型ICAM-1通过蛋白酶裂解作用而脱落产生的，其总体结构与膜型ICAM-1的胞 外区结构非常相似，在调节淋巴细胞功能相关分子-1(LFA-1)依赖的白细胞粘附中有着重 要的生理功能〔5〕。1998年Mole 〔6〕首先报道证实了牙周病患者龈沟液中sICAM-1的变化情况，指出牙周病患者牙周组织中高度表达的ICAM-1可脱落形成 龈沟液中的sICAM-1，而且随着牙周组织炎症状态的加强，龈沟液中sICAM-1的含量亦明显 增加。本研究的结果也发现AP组受检牙龈沟液中sICAM-1的含量显著高于H组(P<0.001) ，而随着治疗后牙周临床症状的改善，GCF中sICAM-1的表达明显减少，其下降的变化趋势 与牙周临床指标相一致。可见牙周局部洁治不但能去除牙周菌斑，而且能影响龈沟液中sICA M-1的表达，使牙周炎症信息的传递不会迅速扩大，从而缓解了牙周局部过度的炎症反应和 免疫反应。
, 百拇医药 研究中显示AP患者治疗后1周，GCF中sICAM-1的含量已有明显的减少，而治疗1月后，龈沟 液中sICAM-1的水平仍持续下降。①可能是因为原来生成的ICAM-1和sICAM-1继续消耗， ②可能是由于牙周局部治疗改变了牙周致病菌的微生态环境，使细菌的粘附、繁殖、聚集能 力受到影响，再附着的致病菌减少，因此牙周组织细胞受细菌毒素侵袭而表达的ICAM-1数 量明显下降，脱落而形成的sICAM-1也进一步减少。但此时GCF中sICAM-1的含量仍高于H组 水平，这说明牙周局部治疗虽大量去除了牙周致病菌，缓解了牙周组织过度的炎症反应和免 疫反应，然而却不能在短期内使牙周组织完全恢复正常，因此对重度牙周炎患者进行追踪治 疗和疗效监测是十分必要的。
本研究从重度牙周炎患者治疗前后龈沟液中sICAM-1的水平变化角度，探讨了在牙周炎症过 程当中，sICAM-1的含量变化与牙周临床症状的相互关系，为将龈沟液中sICAM-1的水平作 为牙周炎活动的特异性指标提供了必要的实验依据，并有利于临床疗效的评价。 参考文献
, 百拇医药
1，Hynes RO,Lander AD.Contact and adhesive specificities in the associatio n,migrations,and targeting of cells and axons.Cell,1993,68(2):303
2，Hayashi J,Masaka T,Saito I,et al.Soluble CD14 mediates lipopolysaccharide -induced intercellular adhesion molecule 1 expression in cultured human gingiva l fibroblasts.Infect Immun,1996,64(12):4946
3，Hayashi J,Saito I,Ishikawa I,et al.Effects of cytokine and periodontopathi c bacteria on the leukocyte function associated antigen 1/intercellular adhesion molecule 1 pathway in gingival fibroblasts in adult periodontal disease.Infect Immun,1994,62(12):5205
, 百拇医药
4，唐倩综述,梁焕友审校.细胞间粘附分子在牙周组织的分布及其意义.国外医学口腔医学分 册,1998,25(4):232
5，Rothlein R,Mainolfi EA,Czajkowski M.A form of circulating ICAM-1 in human ser um .J Immunol,1991,147(1):3788
6，Mole N,Kennel de March A,Martin G,et al.High levels of soluble intercellul ar adhesion molecule-1 (ICAM-1) in crevicular fluid of periodontal disease pat ients with plaque.J Clin Periodontol,1998,25(9):754
(收稿：1999-05-22 修回：1999-10-22), http://www.100md.com
单位：广东中山医科大学口腔医学院 510630
关键词：牙周炎；龈沟液；可溶性细胞间粘附分子-1
实用口腔医学杂志000208 〔摘要〕 目的：了解成人牙周炎患者治疗前后龈沟液(GCF)中可溶性细胞间粘 附分子-1(sICAM-1)含量的变化。方法：采用常规滤纸条 法收集正常成年人以及成年人牙周炎患者治疗前后的GCF样本，用ELISA法检测其sICAM-1的 含量。结果：治疗后GCF中sICAM-1的水平显著下降(P<0.001)。 结论：GCF中sICAM-1水平可作为评价牙周炎症状态的一项较为敏感 和客观的实验指标。了解成人牙周炎患者治疗前后龈沟液(GCF)中可溶性细胞间粘 附分子-1(sICAM-1)含量的变化。方法：采用常规滤纸条 法收集正常成年人以及成年人牙周炎患者治疗前后的GCF样本，用ELISA法检测其sICAM-1的 含量。结果：治疗后GCF中sICAM-1的水平显著下降(P<0.001)。 结论：GCF中sICAM-1水平可作为评价牙周炎症状态的一项较为敏感 和客观的实验指标。
, 百拇医药
中图分类号：R781.4+2 文献标识码：A 文章编号：1001-3733(2000)02-0108-03
Soluble intercellular adhesion molecule -1 level in gingival crevicular fluid in the patients with periodontitis before and after conventional periodontal tre atment
Tang Qian,Liang Huanyou,Liu Suifang
(Department of Stomatology,Third Affili ated Hospital of Sun Yat-sen University of Medical Sciences.Guangzhou 510630)
, 百拇医药
〔Abstract〕Objective:To Study the soluble intercellular adhesion mol ecule (GCF-sICAM-1) level in gingival crevicular fluid (GCF) in the patients w ith periodontitis before and after conventional treatment.Methods:GCF-sICAM-1 content was analyzed using an ELISA technique following ca reful sampling of GCF with standardzed filter strips.Results:GCF-sICAM-1 levels (kU/ml) were 272.07 and 141.42 respectively before and 1 week after periodontal treatment (P<0.01),that was 70.75 1 month after trea tment.Conclusion:GCF-sICAM-1 level may be a sensitive an d objective marker for detection of periodontal tissue inflammation.
, 百拇医药
Key words Periodontitis;Gingival crevicular fluid; Soluble in tercellular adhesion molecule-1
在以前的实验中，我们已证实了龈沟液中有sICAM-1的存在，并且其含量在牙周健康者 、边缘性龈炎以及成人牙周炎患者中呈上升趋势(结果将另文讨论)。然而对于重度成人牙周 炎患者治疗前后，龈沟液中的sICAM-1的变化规律尚不清楚，因此本研究将对重度成人牙周 炎患者治疗前后龈沟液中sICAM-1的含量进行监测，以了解GCF中sICAM-1水平变化与临床 症状的关系，用于指导临床治疗。
1 材料和方法
1.1 病例选择
从我科门诊患者中采取完全随机抽样方法选择研究对象11人，全部研究对象要求 全身健康，无系统性疾病，3个月内未使用过抗生素，半年内无牙周治疗史，妇女未妊娠。 根据临床检查情况分为2组(每人各选择2～4个牙齿，分别位于4个不同象限)：牙周健康组(H )5人(17个牙)；重度成年人牙周炎组(AP)6人(13牙)，该组受检牙要求牙周袋深度(PD)>4 mm ，牙槽骨吸收量>根长的1/2。2组平均年龄分别为28.7岁和53.8岁。
, 百拇医药
1.2 临床检查项目
除检测菌斑指数〔plaque index,PLI,按Silness和Lue(1964)分4度记录〕、出血指数〔blee ding index,BI,按Mazza(1981)分6度记录〕外，还按照口腔内科学中介绍的方法，测定牙周 探诊深度(probing depth,PD)和附着丧失(attachment loss,AL),并对患牙进行X线根尖片检 查，所有患者的检查均由同一人完成。
1.3 GCF的收集
采用常规滤纸条法取样，将牙隔湿并去除龈上菌斑，将3个已用 分析天平称重的定量滤纸条(2 mm×8 mm)分别放在该牙的唇(颊)侧近中、远中和中央牙周袋 口30 s后取出(若有血迹则弃去另选一牙)。将3个定量滤纸条作为一个样本，取出后再称重 ，减去原重量，与比重(约1 mg/μl)换算成体积(μl)。称重后样本立即放入微离心管中， -70 ℃冻存。在对重度成人牙周炎患者进行牙周治疗后1周、4周再分别取样一次，并记录 各项牙周临床指标，所取样本在两个月内完成定量分析。
, 百拇医药
1.4 治疗方法
采用龈上、龈下洁治，调整咬合，牙周袋内放置甲硝唑 药条等局部治疗方法，并同时给予口服利君沙、灭滴灵和牙周宁。
1.5 GCF中sICAM-1的检测
从-70 ℃中取出样本，室温解冻，每管中分别加入一定量的体积分数为0.05% Tw een-20洗提液，使之成为1∶100的定比稀释液，室温摇床中(150±20) r/min(r=5 cm)放置 1 h，4 ℃、10 000 r/min(r=5 cm)离心10 min，取上清液。利用ICAM-1试剂盒，用EL ISA法对上清液进行检测。
1.6 统计学处理
用SPSS统计软件包对数据进行处理。
2 结 果
, 百拇医药
在对2组GCF-sICAM-1的表达水平的比较中发现，与健康组相比，AP组的sICAM-1 的表达明显增强，差异存在着显著性(P<0.001)，结果见表1。
表1 2组受检牙GCF中sICAM-1的比较 (kU/L) 分组
牙数
s
t值
P值
H
17
27.28
24.32
, 百拇医药
7.42
<0.001
AP
13
272.07
133.91
重度成人牙周炎患牙治疗前后牙周各项指标的追踪检查可见，治疗后牙周临 床症状有明显的改善，除AL外，其余指标均显著下降(P<0.01)，这表明BI、PD及PLI能 较好地反应牙周炎症状况。各项牙周指标的变化情况见表2。表2 AP组治疗前后各项牙周指标的比较
牙周指数
治疗前
治疗后1周
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治疗后1月
F值
P值
BI
2.92±0.76
1.15±0.38
0.62±0.49
59.22
<0.01
PLI
2.31±0.48
0.69±0.48
, 百拇医药 0.54±0.52
99.13
<0.01
PD(mm)
5.83±1.27
3.79±1.02
3.20±0.37
45.02
<0.01
AL(mm)
5.10±0.45
4.95±0.46
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4.85±0.43
3.26
>0.05
治疗后GCF中sICAM-1的水平明显下降，在治疗1周时，GCF-sICAM-1的水平由治疗前 的均数272.07 kU/L下降为141.42 kU/L，这种变化与牙周各项临床指标的变化相一致。治疗 前后GCF中sICAM-1的水平变化见表3。
3 讨 论
细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是介导细胞间粘附的重要功能分子，它能调节炎症信息的传递，参与机体的免 疫调节，促进白细胞在炎症或损伤部位的聚集，影响T细胞、B细胞的活化及其效应〔1 〕。近年来国外一些研究已证实细菌脂多糖能诱导牙周组织ICAM-1的高度表达〔2〕 ，而ICAM-1表达的增强能促进白细胞在牙周炎症区的聚集和活化，是牙周局部炎症反应的 前提和基础，无论在边缘性龈炎或慢性牙周炎的病损中，都存在随着ICAM-1表达水平的增 高，相应的炎症程度也随之加重的现象〔3,4〕。但对sICAM-1在牙周炎发生、发展 、转归过程中的变化情况，目前尚不完全清楚。
, 百拇医药
表3 不同取样时间里sICAM-1水平的变化 (kU/L)
取样时间
n
s
t值(两两比较)
P值
治疗前(t1)
13
272.07
133.91
4.97(t1与t2)
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<0.001
治疗后1周(t2)
13
141.42
54.92
6.23(t与t)
<0.001
治疗后1月(t3)
13
70.75
30.33
7.06(t3与t1)
, 百拇医药
<0.001
sICAM-1是膜型ICAM-1通过蛋白酶裂解作用而脱落产生的，其总体结构与膜型ICAM-1的胞 外区结构非常相似，在调节淋巴细胞功能相关分子-1(LFA-1)依赖的白细胞粘附中有着重 要的生理功能〔5〕。1998年Mole 〔6〕首先报道证实了牙周病患者龈沟液中sICAM-1的变化情况，指出牙周病患者牙周组织中高度表达的ICAM-1可脱落形成 龈沟液中的sICAM-1，而且随着牙周组织炎症状态的加强，龈沟液中sICAM-1的含量亦明显 增加。本研究的结果也发现AP组受检牙龈沟液中sICAM-1的含量显著高于H组(P<0.001) ，而随着治疗后牙周临床症状的改善，GCF中sICAM-1的表达明显减少，其下降的变化趋势 与牙周临床指标相一致。可见牙周局部洁治不但能去除牙周菌斑，而且能影响龈沟液中sICA M-1的表达，使牙周炎症信息的传递不会迅速扩大，从而缓解了牙周局部过度的炎症反应和 免疫反应。
, 百拇医药 研究中显示AP患者治疗后1周，GCF中sICAM-1的含量已有明显的减少，而治疗1月后，龈沟 液中sICAM-1的水平仍持续下降。①可能是因为原来生成的ICAM-1和sICAM-1继续消耗， ②可能是由于牙周局部治疗改变了牙周致病菌的微生态环境，使细菌的粘附、繁殖、聚集能 力受到影响，再附着的致病菌减少，因此牙周组织细胞受细菌毒素侵袭而表达的ICAM-1数 量明显下降，脱落而形成的sICAM-1也进一步减少。但此时GCF中sICAM-1的含量仍高于H组 水平，这说明牙周局部治疗虽大量去除了牙周致病菌，缓解了牙周组织过度的炎症反应和免 疫反应，然而却不能在短期内使牙周组织完全恢复正常，因此对重度牙周炎患者进行追踪治 疗和疗效监测是十分必要的。
本研究从重度牙周炎患者治疗前后龈沟液中sICAM-1的水平变化角度，探讨了在牙周炎症过 程当中，sICAM-1的含量变化与牙周临床症状的相互关系，为将龈沟液中sICAM-1的水平作 为牙周炎活动的特异性指标提供了必要的实验依据，并有利于临床疗效的评价。 参考文献
, 百拇医药
1，Hynes RO,Lander AD.Contact and adhesive specificities in the associatio n,migrations,and targeting of cells and axons.Cell,1993,68(2):303
2，Hayashi J,Masaka T,Saito I,et al.Soluble CD14 mediates lipopolysaccharide -induced intercellular adhesion molecule 1 expression in cultured human gingiva l fibroblasts.Infect Immun,1996,64(12):4946
3，Hayashi J,Saito I,Ishikawa I,et al.Effects of cytokine and periodontopathi c bacteria on the leukocyte function associated antigen 1/intercellular adhesion molecule 1 pathway in gingival fibroblasts in adult periodontal disease.Infect Immun,1994,62(12):5205
, 百拇医药
4，唐倩综述,梁焕友审校.细胞间粘附分子在牙周组织的分布及其意义.国外医学口腔医学分 册,1998,25(4):232
5，Rothlein R,Mainolfi EA,Czajkowski M.A form of circulating ICAM-1 in human ser um .J Immunol,1991,147(1):3788
6，Mole N,Kennel de March A,Martin G,et al.High levels of soluble intercellul ar adhesion molecule-1 (ICAM-1) in crevicular fluid of periodontal disease pat ients with plaque.J Clin Periodontol,1998,25(9):754
(收稿：1999-05-22 修回：1999-10-22), http://www.100md.com