诺果宁、培高利特和降乳散对乙菧酚诱发的大鼠泌乳素瘤防治作用的初步研究
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37c医学网
作者：徐春 李江源 黄兆坚
单位：解放军总医院内分泌科，北京 100853
关键词：雌激素；泌乳素瘤；多巴胺受体-I激动剂；中药；大鼠
军医进修学院学报000214 【摘要】目的：研究多巴胺受体激动剂诺果宁、培高利特及中药汤剂降乳散对乙菧酚(DES)诱发的大鼠泌乳素(PRL)瘤的防治作用。方法：成年Wistar大鼠切除卵巢后随机分5组，用空白硅胶管皮下植入作为对照组；其它4组均植入DES硅胶管，其中有3组分别用诺果宁、培高利特和降乳散灌胃。8周后处死动物，做垂体的免疫组化检查，用放免法测定外周血PRL水平。结果：DES可使血清PRL水平、垂体重量和PRL阳性细胞计数明显增高(P<0.001)。结论：这三种药物对DES诱发的大鼠PRL瘤均具有一定程度的防治作用。下丘脑多巴胺水平的降低可能是大鼠PRL瘤的致病因素之一。
, 百拇医药 中图号：R589.9 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)02-0123-03
The preventive effects of Norprolac,Pergolide and Jiangrusan on Diethylstilbestrol-induced rat prolactinoma
XU Chun,LI Jiang-yuan,HUANG Zhao-jian
(Department of Endocrinology,PLA General Hospital Beijing 100853,China)
【Abstract】Objective:To study the preventive effects of chinese medicine,Jiangrusan,and two kinds of dopamine receptor agonists,Norprolac and Pergolide,on Diethystilbestrol (DES)-induced rat prolactinoma.Methods:forty-six adult Wistar rats,ovariectomized,were divided into 5 groups at random.Each rat in E(n=10),D1(n=9),D2(n=10) and D3(n=7) group was subscutaneously implanted with a DES implant.Rats in control group (C group,n=10) were implanted with blank implants.Meanwhile Norprolac,Pergolide or Jiangrusan was orally adimnstrated to rats in D1,D2 or D3 groups respectively.After 8 weeks,all the animals were executed.Each pituitary gland was weighed and collected for histopathological and immunocytochemical examination.Serum prolactin (PRL) levels were measured by RIA method.Results:The weights of pituitary gland,PRL immunoreactive cell countings and serum PRL levels in E,D1,D2 or D3 group were individually greater than those in C group (P<0.001 respectively).Conclusion:Norprolac,Pergolide and Jiangrusan all have potential prevenive effects on estrogen-induced rat prolactinoma.The decrease of dopamine contents in hypothalamas may be involved in the pathogenesis of estrgen induced rat prolactinoma.
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Key words:estrogen;prolactioma;dopamine receptor agonist;chinese medicine;rat
长时间给予雌激素可以导致大鼠垂体泌乳素(PRL)细胞增生，泌乳素分泌增加，最后形成泌乳素瘤。雌激素诱发大鼠垂体泌乳素瘤模型对研究泌乳素瘤的形成机制和寻求有效的治疗措施具有重要意义。我们曾用乙NFDAD酚(DES)皮下植入于切除卵巢的雌性Wistar大鼠，在 8 周后全部实验动物形成垂体PRL瘤；同时发现在持续释放的雌激素的作用下，下丘脑组织多巴胺的含量降低，提示多巴胺减少在雌激素诱发大鼠PRL瘤中起重要作用[1]。基于上述研究，本实验在皮下植入DES的同时，分别用诺果宁(CV205-502 山德士制药有限公司产品)和甲磺酸培高利特(天津市中央制药厂产品)这两种多巴胺受体激动剂及中药降乳散灌胃，以研究它们对雌激素诱发大鼠泌乳素瘤的防治作用。
1 材料和方法
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1.1 泌乳素瘤模型的制备 46 只成年雌性Wistar大鼠，体重 120～150 g，腹腔内注射 10% 水合氯醛 50～80 mg/kg 麻醉，常规消毒，于背部腰椎两侧做长约 2～3 cm 的纵形切口，暴露腹腔，结扎子宫，切除卵巢，并逐层缝合。于其背部中线尾肌上 3 cm 偏左处作一约 1 cm 长纵形切口，游离皮下组织，将一含有DES 20 mg 的硅胶管(长 2cm，内径 1.5 mm，外径 2.41 mm) 或空白硅胶管植入皮下。全部动物随机分 5 组：①对照组(C组，n=10)，皮下植入空白硅胶管；②DES组(E组，n=10)皮下植入含有DES的硅胶管；③诺果宁组(D1组，n=9)、④培高利特组(D2组，n=10) 和 ⑤中药组(D3组，n=7)：在植入DES硅胶管的同时分别用诺果宁 (30 μg.kg-1.d-1)、培高利特 (10 μg.kg-1.d-1)、中药降乳散汤剂( 15 μg.kg-1.d-1，指干燥中药的重量)灌胃。在用药 8 周后，用乙醚麻醉大鼠，心脏穿刺取血分离血清于 -70 ℃ 保存，打开颅骨，翻开脑组织，摘下垂体，称重后将一半冻于液氮中，一半放于 4% 多聚甲醛中固定。
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1.2 血清PRL水平的放免测定 大鼠血清PRL放免测定的抗原和抗体均由NHPP的Parlow AF博士提供。用氯胺-T法标记PRL抗原，取少量标记混合物做纸层析，计算标记百分比为 31.2%，用不同稀释度的PRL抗体测定标记抗原的免疫活性，选择 1∶28 000 的PRL抗体浓度作标准曲线，测定样品。灵敏度为 0.312 ng/ml，批内CV为 4.5%，批间CV为 10.5%。
1.3 组织学及免疫组织化学观察 常规石腊包埋大鼠垂体组织，部分切片行HE染色。部分切片采用ABC免疫组化方法显示垂体组织PRL蛋白的表达和分布。石腊切片脱腊后用 3% H2O2 室温孵育 5～10 min，蒸馏水冲洗，用 1% BSA-PBS室温作用 20 min，以封闭非特异性结合位点，倾去血清，滴加抗大鼠PRL抗体(浓度为 1∶200)，室温 3 h，然后滴加辣根过氧化酶标记的三抗S-A/HRP (1∶200) 室温孵育 3 h，行DAB显色。
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1.4 统计学处理 实验结果以
±s表示，组间比较采用t检验和F检验处理。
2 结 果
2.1 各组大鼠体重的变化 C、E、D1、D2、D3 各组大鼠处理前后体重见附表，各组处理前体重无明显差别，具有可比性，用药 8 周后，E组平均体量比C组明显降低(P<0.001)，D1、D2、D3 各组体重虽无显著差别，但也均比C组明显减轻(P<0.001)，另外D1、D2、D3 各组体重与E组无明显差别(附表)。
, 百拇医药 附表 各组大鼠用药前后的体重(g)
C组
n＝10
E组
n＝10
D1组
n＝10
D2组
n＝10
D3组
n＝7
用药前
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138.5
±8.0
138.5
±9.5
134.4
±11.3
139.7
±7.7
137.5
±7.7
用药后
334.8
±40.3
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180.6*
±13.1
191.1*
±17.6
177.1*
±17.5
184.6*
±26.9
*与C组比P<0.001
2.2 各组大鼠垂体重量的比较 E组垂体重量为 (64±5.8) mg，明显高于C组〔(13.4±0.9)mg,P<0.001〕，D1、D2、D3 各组垂体重量分别为 (22.4±2.8) mg、 (20.0±2.3) mg 和 (20.2±2.4) mg，均比E组有明显下降 (P<0.001)，但比C组仍有明显增大 (P<0.001)；D1、D2、D3 各组间垂体重量无明显差别。
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2.3 各组大鼠血清PRL水平的变化 E组大鼠血清PRL为 (4226.3±446.9) ng/ml，明显高于C组〔(16.2±5.6)mg,P<0.001〕，D1、D2、D3 各组大鼠血清PRL的水平分别为 (58.4±15.7) ng/ml、 (48.1±13.6) ng/ml、 (526.7±43.6) ng/ml，均比E组有显著下降 (P<0.001)，但仍然明显高于C组 (P<0.001)。其中D1、D2 两组的PRL水平无明显差别，D3 组的PRL水平比D1、D2 组增高，具有统计学意义 (P<0.001)。
2.4 各组大鼠垂体组织学的改变 在HE染色下，C组垂体细胞呈圆形，胞浆少，胞核大小一致，血窦形态规则，分布均匀，E组细胞数目明显增加，细胞呈圆形或多角形，胞体增大，胞浆带增宽，细胞分化差，核大小不一致，可见大核细胞，有核异型性，血窦数目减少，分布不均，形态不规则，均被增生的细胞挤压变形。D1、D2 两组均出现细胞异常增生，但是程度较E组低，部分区域可见形态分布正常的血窦，D3 组的组织相介于E组与D1、D2 组之间。
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2.5 各组大鼠垂体PRL免疫组织化学的改变 每 200 倍视野随机数 5 个小格的阳性细胞(压上线和左线的细胞计数，压下线和右线的细胞不计数)，取其平均值，每组数 5 个切片。C组阳性细胞散在分布，平均每格 (1.4±1.1) 个，E组的阳性细胞广泛存在并且分布密集，平均每个 (20.6±2.4) 个，明显高于C组 (P<0.001)，D1、D2 两组的阳性细胞数分别为 (6.2±1.3) 和 (7.0±1.0) 个，组间比较无差别，但均明显低于E组而大于C组 (P<0.001)，D3 组的阳性细胞数为每格 (16.0±1.6) 个，明显低于E组 (P<0.05) 而高于C组 (P<0.001)，比D1、D2 组也明显增高 (P<0.001)。
3 讨 论
在雌激素作用的第 8 周E组垂体平均重量为 (64.0±5.8) mg，根据Welsch等判断垂体PRL瘤折标准 (50 mg)[2]，说明E组大鼠已成功的诱发出PRL瘤。
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诺果宁(Norprolac)是在多巴胺受体激动剂原型阿朴吗啡结构的基础上改造合成的一种 8-羟苄喹啉，具有选择性作用于多巴胺受体的特性，因而药理作用较强，不良反应较少。培高利特(Pergolite)和溴隐亭相似，是一种麦角类泛多巴胺受体激动剂。临床上，诺果宁和培高利特都用于治疗垂体泌乳素瘤。我们的实验结果证明：诺果宁、培高利特均可使垂体重量和血清PRL水平明显下降，这一结果与Ribeiro等的研究结果相符[3]，再一次证实了多巴胺受体激动剂的抗高泌乳素血症作用和抗增殖作用，也说明这两种多巴胺受体激动剂对DES诱发的大鼠PRL瘤具有一定预防作用。D1、D2 组的垂体重量和血清PRL水平无明显差别，提示诺果宁和培高利特在抑制PRL合成和分泌方面疗效无明显的差别。
中医理论认为高PRL血症属肝郁肾虚，根据辨证调理原则我院中医科杨明会主任医师配制成的降乳散，由柴胡、白芍、当归、仙灵脾、穿山甲、郁金、夏枯草等 15 味中药组成，临床用于治疗高泌乳素血症患者有效。本实验将此中药用于DES诱发的大鼠PRL瘤，发现其具有降低血清PRL和垂体重量的作用，其中降低垂体重量的效果与诺果宁和培高利特无明显差别，降低血清PRL的效果则次于诺果宁和培高利特。中药降乳散的治疗原则为舒肝解郁，补肾健脾，至于其降低PRL的机制是否与多巴胺受体激动剂相似，还有待进一步研究。
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本研究在DES持续作用的情况下补充多巴胺受体激动剂后，发现大鼠血清PRL水平及垂体的重量均比单用DES组有明显降低，说明多巴胺水平降低是DES诱发PRL瘤的机制之一。有学者报告DES作用于大鼠正中隆起部位，使多巴胺合成的限速酶-酪氨酸羟化酶活性明显低于正常，正中隆起和门脉系统中的多巴胺浓度降低[4]。我们以往的研究表明，皮下植入DES可以显著降低下丘脑内多巴胺的含量，在DES作用的第 4 周时已降低到最低点，随着DES作用时间的延长，下丘脑内多巴胺含量处于持续受抑制状态[1]。
本实验显示：D1、D2、D3 各组血清PRL水平、垂体PRL阳性细胞计数均明显高于C组，另外这三组大鼠体重的明显降低，以及它们的异常组织学改变，均说明多巴胺受体激动剂不能完全阻止PRL瘤的形成和发展，多巴胺水平下降可能仅是PRL瘤形成的促发因素，在垂体PRL细胞的增生以至肿瘤形成过程中尚有其它因素的参与。许氏等研究发现雌激素不仅可以增加垂体细胞PRL mRNA的表达和翻译，而且可以促进原癌基因c-myc的表达，进而促进细胞增殖[5]。Allen等发现雌激素能够特异性的诱发大鼠垂体泌乳素细胞表达c-fos基因，提示雌激素诱发大鼠PRL瘤，不仅作用于下丘脑水平而且可能直接作用于垂体PRL细胞[6]，故对垂体细胞中雌激素受体水平表达的研究有助于揭示这一奥秘，目前我们正在进行这一方面的研究。雌激素在许多组织中具有调节细胞生长和分化的作用，雌激素的致癌作用已在许多雌激素敏感的组织如子宫、乳腺和肾脏中得到证实。雌激素诱发大鼠PRL瘤的机制与雌激素的致癌作用是有关，有待于深入研究[7，8]。
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作者简介：徐春，女，1967-03-21生，湖南湘潭县人，汉族，武警总医院内分泌科医生。1991年毕业于华西医科大学，1997年获得中国协和医科大学硕士学位，现在军医进修学院内分泌科攻读博士学位，导师李江源教授；发表论文4篇。电话：(010)66937425
参考文献
1，李江源，张建振，黄兆坚等.乙菧酚对大鼠泌乳素瘤形成以及下丘脑多巴胺和去甲肾上腺素的影响[J].军医进修学院院报，1998，20(4)：256-258.
2，Welsch CW,Jenklins T,Amenomori Y et al.Tumorous development of in situ and grafted anterior pituitary in female rats treated with diethylstilbestrol[J].Experimentia,1971,27:1350-1352.
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3，Ribeiro MF,Spritzer PM,Barbosa-Coutinho LM et al.Effect of bromocriptine on serum prolactin leveles,pituitary weight immunoreactive prolactin cells in estrodiol-treated ovariectomized rats;an experimental model of estrogen-dependent hyperprolactinemia[J].Braz J Med Bil Res,1997,30:113-117.
4，EL-Azouzi M,Hsu RW,Black PM et al.The importance of dopamine in the pathogenesis of experimental prolactinomas[J].J Neurosurg,1990,72:273-281.
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5，许荣琨，郭传海，黄曼影等.17β-雌二醇诱发大鼠垂体泌乳素瘤的形成和原癌基因c-myc的表达[J].基础医学与临床，1993，13：29-32.
6，Allen DL,Mitchner NA,Uveges TE et al.Cell-specific induction of c-fos expression in the pituitary gland by estrogen[J].Endocrinology,1997,138:2128-2135.
7，Tsutsui T,Barrett JC.Neoplastic transformation of cultured mammalian cell by estrogens and estrogenlike chemicals[J].environ health perspect,1997,105(3 Suppl):619-624.
8，Tsutsui T.Mechanisms of estrogen-induced carcinogenesis-detection of DNA adducts in cultured mammalian cells by 32p-postlabeling[J].Nippon Yakurigaku Zassshi,1997,110;1-9.
收稿日期：1999-09-21
修回日期：1999-11-08, http://www.100md.com
单位：解放军总医院内分泌科，北京 100853
关键词：雌激素；泌乳素瘤；多巴胺受体-I激动剂；中药；大鼠
军医进修学院学报000214 【摘要】目的：研究多巴胺受体激动剂诺果宁、培高利特及中药汤剂降乳散对乙菧酚(DES)诱发的大鼠泌乳素(PRL)瘤的防治作用。方法：成年Wistar大鼠切除卵巢后随机分5组，用空白硅胶管皮下植入作为对照组；其它4组均植入DES硅胶管，其中有3组分别用诺果宁、培高利特和降乳散灌胃。8周后处死动物，做垂体的免疫组化检查，用放免法测定外周血PRL水平。结果：DES可使血清PRL水平、垂体重量和PRL阳性细胞计数明显增高(P<0.001)。结论：这三种药物对DES诱发的大鼠PRL瘤均具有一定程度的防治作用。下丘脑多巴胺水平的降低可能是大鼠PRL瘤的致病因素之一。
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The preventive effects of Norprolac,Pergolide and Jiangrusan on Diethylstilbestrol-induced rat prolactinoma
XU Chun,LI Jiang-yuan,HUANG Zhao-jian
(Department of Endocrinology,PLA General Hospital Beijing 100853,China)
【Abstract】Objective:To study the preventive effects of chinese medicine,Jiangrusan,and two kinds of dopamine receptor agonists,Norprolac and Pergolide,on Diethystilbestrol (DES)-induced rat prolactinoma.Methods:forty-six adult Wistar rats,ovariectomized,were divided into 5 groups at random.Each rat in E(n=10),D1(n=9),D2(n=10) and D3(n=7) group was subscutaneously implanted with a DES implant.Rats in control group (C group,n=10) were implanted with blank implants.Meanwhile Norprolac,Pergolide or Jiangrusan was orally adimnstrated to rats in D1,D2 or D3 groups respectively.After 8 weeks,all the animals were executed.Each pituitary gland was weighed and collected for histopathological and immunocytochemical examination.Serum prolactin (PRL) levels were measured by RIA method.Results:The weights of pituitary gland,PRL immunoreactive cell countings and serum PRL levels in E,D1,D2 or D3 group were individually greater than those in C group (P<0.001 respectively).Conclusion:Norprolac,Pergolide and Jiangrusan all have potential prevenive effects on estrogen-induced rat prolactinoma.The decrease of dopamine contents in hypothalamas may be involved in the pathogenesis of estrgen induced rat prolactinoma.
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Key words:estrogen;prolactioma;dopamine receptor agonist;chinese medicine;rat
长时间给予雌激素可以导致大鼠垂体泌乳素(PRL)细胞增生，泌乳素分泌增加，最后形成泌乳素瘤。雌激素诱发大鼠垂体泌乳素瘤模型对研究泌乳素瘤的形成机制和寻求有效的治疗措施具有重要意义。我们曾用乙NFDAD酚(DES)皮下植入于切除卵巢的雌性Wistar大鼠，在 8 周后全部实验动物形成垂体PRL瘤；同时发现在持续释放的雌激素的作用下，下丘脑组织多巴胺的含量降低，提示多巴胺减少在雌激素诱发大鼠PRL瘤中起重要作用[1]。基于上述研究，本实验在皮下植入DES的同时，分别用诺果宁(CV205-502 山德士制药有限公司产品)和甲磺酸培高利特(天津市中央制药厂产品)这两种多巴胺受体激动剂及中药降乳散灌胃，以研究它们对雌激素诱发大鼠泌乳素瘤的防治作用。
1 材料和方法
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1.1 泌乳素瘤模型的制备 46 只成年雌性Wistar大鼠，体重 120～150 g，腹腔内注射 10% 水合氯醛 50～80 mg/kg 麻醉，常规消毒，于背部腰椎两侧做长约 2～3 cm 的纵形切口，暴露腹腔，结扎子宫，切除卵巢，并逐层缝合。于其背部中线尾肌上 3 cm 偏左处作一约 1 cm 长纵形切口，游离皮下组织，将一含有DES 20 mg 的硅胶管(长 2cm，内径 1.5 mm，外径 2.41 mm) 或空白硅胶管植入皮下。全部动物随机分 5 组：①对照组(C组，n=10)，皮下植入空白硅胶管；②DES组(E组，n=10)皮下植入含有DES的硅胶管；③诺果宁组(D1组，n=9)、④培高利特组(D2组，n=10) 和 ⑤中药组(D3组，n=7)：在植入DES硅胶管的同时分别用诺果宁 (30 μg.kg-1.d-1)、培高利特 (10 μg.kg-1.d-1)、中药降乳散汤剂( 15 μg.kg-1.d-1，指干燥中药的重量)灌胃。在用药 8 周后，用乙醚麻醉大鼠，心脏穿刺取血分离血清于 -70 ℃ 保存，打开颅骨，翻开脑组织，摘下垂体，称重后将一半冻于液氮中，一半放于 4% 多聚甲醛中固定。
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1.2 血清PRL水平的放免测定 大鼠血清PRL放免测定的抗原和抗体均由NHPP的Parlow AF博士提供。用氯胺-T法标记PRL抗原，取少量标记混合物做纸层析，计算标记百分比为 31.2%，用不同稀释度的PRL抗体测定标记抗原的免疫活性，选择 1∶28 000 的PRL抗体浓度作标准曲线，测定样品。灵敏度为 0.312 ng/ml，批内CV为 4.5%，批间CV为 10.5%。
1.3 组织学及免疫组织化学观察 常规石腊包埋大鼠垂体组织，部分切片行HE染色。部分切片采用ABC免疫组化方法显示垂体组织PRL蛋白的表达和分布。石腊切片脱腊后用 3% H2O2 室温孵育 5～10 min，蒸馏水冲洗，用 1% BSA-PBS室温作用 20 min，以封闭非特异性结合位点，倾去血清，滴加抗大鼠PRL抗体(浓度为 1∶200)，室温 3 h，然后滴加辣根过氧化酶标记的三抗S-A/HRP (1∶200) 室温孵育 3 h，行DAB显色。
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1.4 统计学处理 实验结果以
±s表示，组间比较采用t检验和F检验处理。2 结 果
2.1 各组大鼠体重的变化 C、E、D1、D2、D3 各组大鼠处理前后体重见附表，各组处理前体重无明显差别，具有可比性，用药 8 周后，E组平均体量比C组明显降低(P<0.001)，D1、D2、D3 各组体重虽无显著差别，但也均比C组明显减轻(P<0.001)，另外D1、D2、D3 各组体重与E组无明显差别(附表)。
, 百拇医药 附表 各组大鼠用药前后的体重(g)
C组
n＝10
E组
n＝10
D1组
n＝10
D2组
n＝10
D3组
n＝7
用药前
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138.5
±8.0
138.5
±9.5
134.4
±11.3
139.7
±7.7
137.5
±7.7
用药后
334.8
±40.3
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180.6*
±13.1
191.1*
±17.6
177.1*
±17.5
184.6*
±26.9
*与C组比P<0.001
2.2 各组大鼠垂体重量的比较 E组垂体重量为 (64±5.8) mg，明显高于C组〔(13.4±0.9)mg,P<0.001〕，D1、D2、D3 各组垂体重量分别为 (22.4±2.8) mg、 (20.0±2.3) mg 和 (20.2±2.4) mg，均比E组有明显下降 (P<0.001)，但比C组仍有明显增大 (P<0.001)；D1、D2、D3 各组间垂体重量无明显差别。
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2.3 各组大鼠血清PRL水平的变化 E组大鼠血清PRL为 (4226.3±446.9) ng/ml，明显高于C组〔(16.2±5.6)mg,P<0.001〕，D1、D2、D3 各组大鼠血清PRL的水平分别为 (58.4±15.7) ng/ml、 (48.1±13.6) ng/ml、 (526.7±43.6) ng/ml，均比E组有显著下降 (P<0.001)，但仍然明显高于C组 (P<0.001)。其中D1、D2 两组的PRL水平无明显差别，D3 组的PRL水平比D1、D2 组增高，具有统计学意义 (P<0.001)。
2.4 各组大鼠垂体组织学的改变 在HE染色下，C组垂体细胞呈圆形，胞浆少，胞核大小一致，血窦形态规则，分布均匀，E组细胞数目明显增加，细胞呈圆形或多角形，胞体增大，胞浆带增宽，细胞分化差，核大小不一致，可见大核细胞，有核异型性，血窦数目减少，分布不均，形态不规则，均被增生的细胞挤压变形。D1、D2 两组均出现细胞异常增生，但是程度较E组低，部分区域可见形态分布正常的血窦，D3 组的组织相介于E组与D1、D2 组之间。
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2.5 各组大鼠垂体PRL免疫组织化学的改变 每 200 倍视野随机数 5 个小格的阳性细胞(压上线和左线的细胞计数，压下线和右线的细胞不计数)，取其平均值，每组数 5 个切片。C组阳性细胞散在分布，平均每格 (1.4±1.1) 个，E组的阳性细胞广泛存在并且分布密集，平均每个 (20.6±2.4) 个，明显高于C组 (P<0.001)，D1、D2 两组的阳性细胞数分别为 (6.2±1.3) 和 (7.0±1.0) 个，组间比较无差别，但均明显低于E组而大于C组 (P<0.001)，D3 组的阳性细胞数为每格 (16.0±1.6) 个，明显低于E组 (P<0.05) 而高于C组 (P<0.001)，比D1、D2 组也明显增高 (P<0.001)。
3 讨 论
在雌激素作用的第 8 周E组垂体平均重量为 (64.0±5.8) mg，根据Welsch等判断垂体PRL瘤折标准 (50 mg)[2]，说明E组大鼠已成功的诱发出PRL瘤。
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诺果宁(Norprolac)是在多巴胺受体激动剂原型阿朴吗啡结构的基础上改造合成的一种 8-羟苄喹啉，具有选择性作用于多巴胺受体的特性，因而药理作用较强，不良反应较少。培高利特(Pergolite)和溴隐亭相似，是一种麦角类泛多巴胺受体激动剂。临床上，诺果宁和培高利特都用于治疗垂体泌乳素瘤。我们的实验结果证明：诺果宁、培高利特均可使垂体重量和血清PRL水平明显下降，这一结果与Ribeiro等的研究结果相符[3]，再一次证实了多巴胺受体激动剂的抗高泌乳素血症作用和抗增殖作用，也说明这两种多巴胺受体激动剂对DES诱发的大鼠PRL瘤具有一定预防作用。D1、D2 组的垂体重量和血清PRL水平无明显差别，提示诺果宁和培高利特在抑制PRL合成和分泌方面疗效无明显的差别。
中医理论认为高PRL血症属肝郁肾虚，根据辨证调理原则我院中医科杨明会主任医师配制成的降乳散，由柴胡、白芍、当归、仙灵脾、穿山甲、郁金、夏枯草等 15 味中药组成，临床用于治疗高泌乳素血症患者有效。本实验将此中药用于DES诱发的大鼠PRL瘤，发现其具有降低血清PRL和垂体重量的作用，其中降低垂体重量的效果与诺果宁和培高利特无明显差别，降低血清PRL的效果则次于诺果宁和培高利特。中药降乳散的治疗原则为舒肝解郁，补肾健脾，至于其降低PRL的机制是否与多巴胺受体激动剂相似，还有待进一步研究。
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本研究在DES持续作用的情况下补充多巴胺受体激动剂后，发现大鼠血清PRL水平及垂体的重量均比单用DES组有明显降低，说明多巴胺水平降低是DES诱发PRL瘤的机制之一。有学者报告DES作用于大鼠正中隆起部位，使多巴胺合成的限速酶-酪氨酸羟化酶活性明显低于正常，正中隆起和门脉系统中的多巴胺浓度降低[4]。我们以往的研究表明，皮下植入DES可以显著降低下丘脑内多巴胺的含量，在DES作用的第 4 周时已降低到最低点，随着DES作用时间的延长，下丘脑内多巴胺含量处于持续受抑制状态[1]。
本实验显示：D1、D2、D3 各组血清PRL水平、垂体PRL阳性细胞计数均明显高于C组，另外这三组大鼠体重的明显降低，以及它们的异常组织学改变，均说明多巴胺受体激动剂不能完全阻止PRL瘤的形成和发展，多巴胺水平下降可能仅是PRL瘤形成的促发因素，在垂体PRL细胞的增生以至肿瘤形成过程中尚有其它因素的参与。许氏等研究发现雌激素不仅可以增加垂体细胞PRL mRNA的表达和翻译，而且可以促进原癌基因c-myc的表达，进而促进细胞增殖[5]。Allen等发现雌激素能够特异性的诱发大鼠垂体泌乳素细胞表达c-fos基因，提示雌激素诱发大鼠PRL瘤，不仅作用于下丘脑水平而且可能直接作用于垂体PRL细胞[6]，故对垂体细胞中雌激素受体水平表达的研究有助于揭示这一奥秘，目前我们正在进行这一方面的研究。雌激素在许多组织中具有调节细胞生长和分化的作用，雌激素的致癌作用已在许多雌激素敏感的组织如子宫、乳腺和肾脏中得到证实。雌激素诱发大鼠PRL瘤的机制与雌激素的致癌作用是有关，有待于深入研究[7，8]。
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作者简介：徐春，女，1967-03-21生，湖南湘潭县人，汉族，武警总医院内分泌科医生。1991年毕业于华西医科大学，1997年获得中国协和医科大学硕士学位，现在军医进修学院内分泌科攻读博士学位，导师李江源教授；发表论文4篇。电话：(010)66937425
参考文献
1，李江源，张建振，黄兆坚等.乙菧酚对大鼠泌乳素瘤形成以及下丘脑多巴胺和去甲肾上腺素的影响[J].军医进修学院院报，1998，20(4)：256-258.
2，Welsch CW,Jenklins T,Amenomori Y et al.Tumorous development of in situ and grafted anterior pituitary in female rats treated with diethylstilbestrol[J].Experimentia,1971,27:1350-1352.
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3，Ribeiro MF,Spritzer PM,Barbosa-Coutinho LM et al.Effect of bromocriptine on serum prolactin leveles,pituitary weight immunoreactive prolactin cells in estrodiol-treated ovariectomized rats;an experimental model of estrogen-dependent hyperprolactinemia[J].Braz J Med Bil Res,1997,30:113-117.
4，EL-Azouzi M,Hsu RW,Black PM et al.The importance of dopamine in the pathogenesis of experimental prolactinomas[J].J Neurosurg,1990,72:273-281.
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5，许荣琨，郭传海，黄曼影等.17β-雌二醇诱发大鼠垂体泌乳素瘤的形成和原癌基因c-myc的表达[J].基础医学与临床，1993，13：29-32.
6，Allen DL,Mitchner NA,Uveges TE et al.Cell-specific induction of c-fos expression in the pituitary gland by estrogen[J].Endocrinology,1997,138:2128-2135.
7，Tsutsui T,Barrett JC.Neoplastic transformation of cultured mammalian cell by estrogens and estrogenlike chemicals[J].environ health perspect,1997,105(3 Suppl):619-624.
8，Tsutsui T.Mechanisms of estrogen-induced carcinogenesis-detection of DNA adducts in cultured mammalian cells by 32p-postlabeling[J].Nippon Yakurigaku Zassshi,1997,110;1-9.
收稿日期：1999-09-21
修回日期：1999-11-08, http://www.100md.com