碱性成纤维细胞生长因子促进兔晶体上皮细胞增殖的实验研究
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作者：彭惠 李平华 罗莉霞 骆云鹏 汤为学
单位：彭惠 李平华 罗莉霞(重庆医科大学附属第一医院眼科，重庆 400016)；骆云鹏 汤为学(重庆医科大学病理生理教研室，重庆 400046)
关键词：
中国病理生理杂志0010335
目的：后囊混浊(后发性白内障)一直是白内障现代囊外摘出加人工晶体植入术后尚未解决的并发症之一，使复明的病人再次失明。此并发症与术后残留的晶体上皮细胞的增殖、移行、纤维化形成有关。研究影响晶体上皮细胞增殖的因素，对后囊混浊的发病机理及防治有极其重大的意义。本实验观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对兔晶体上皮细胞的作用。方法：首先将兔眼晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLECs)置于37℃饱和湿度含7% CO2的培养箱内进行原代及传代培养，将第2～3代培养细胞用0.25%胰蛋白酶消化后，以5×104/mL细胞浓度200 μL细胞悬液接种于96孔培养板上，培养24 h后加入bFGF,使其终浓度为10-3、10-2、10-1、1和10 ng/mL，分别再培养24 h和72 h后借助甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)测定方法观察bFGF对晶体上皮细胞增殖的影响。电镜观察细胞超微结构的变化，流式细胞仪观察细胞周期及DNA含量的变化。结果：在原代及传代培养兔晶体上皮细胞成功的基础上，添加bFGF后可促进兔晶体上皮细胞的增殖，尤其是在10 ng/mL剂量下显示出明显的促增殖作用。电镜显示细胞增殖明显活跃，胞浆中细胞器丰富，内质网囊腔扩张，并可见絮状物，核形态不规则、异形性、核仁肥大、数量增多、并见常染色质多，异染色质少。罕见凋落小体形成。流式细胞仪检查也显示进入S期的细胞比例明显增加，DNA合成增多，细胞功能活跃。结论：本实验用MTT法证实了bFGF对晶体上皮细胞有强的促增殖作用。其作用随浓度和时间的增加而增强。证明了bFGF在促进白内障术后晶体上皮细胞的增殖及后囊混浊上起着重要作用。若能在临床上寻找出一种天然的拮抗因子或其它对眼内组织无毒性的拮抗晶体上皮细胞增殖的物质，有望从根本上解决后囊混浊的问题，造福于人类。, http://www.100md.com
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中国病理生理杂志0010335
目的：后囊混浊(后发性白内障)一直是白内障现代囊外摘出加人工晶体植入术后尚未解决的并发症之一，使复明的病人再次失明。此并发症与术后残留的晶体上皮细胞的增殖、移行、纤维化形成有关。研究影响晶体上皮细胞增殖的因素，对后囊混浊的发病机理及防治有极其重大的意义。本实验观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对兔晶体上皮细胞的作用。方法：首先将兔眼晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLECs)置于37℃饱和湿度含7% CO2的培养箱内进行原代及传代培养，将第2～3代培养细胞用0.25%胰蛋白酶消化后，以5×104/mL细胞浓度200 μL细胞悬液接种于96孔培养板上，培养24 h后加入bFGF,使其终浓度为10-3、10-2、10-1、1和10 ng/mL，分别再培养24 h和72 h后借助甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)测定方法观察bFGF对晶体上皮细胞增殖的影响。电镜观察细胞超微结构的变化，流式细胞仪观察细胞周期及DNA含量的变化。结果：在原代及传代培养兔晶体上皮细胞成功的基础上，添加bFGF后可促进兔晶体上皮细胞的增殖，尤其是在10 ng/mL剂量下显示出明显的促增殖作用。电镜显示细胞增殖明显活跃，胞浆中细胞器丰富，内质网囊腔扩张，并可见絮状物，核形态不规则、异形性、核仁肥大、数量增多、并见常染色质多，异染色质少。罕见凋落小体形成。流式细胞仪检查也显示进入S期的细胞比例明显增加，DNA合成增多，细胞功能活跃。结论：本实验用MTT法证实了bFGF对晶体上皮细胞有强的促增殖作用。其作用随浓度和时间的增加而增强。证明了bFGF在促进白内障术后晶体上皮细胞的增殖及后囊混浊上起着重要作用。若能在临床上寻找出一种天然的拮抗因子或其它对眼内组织无毒性的拮抗晶体上皮细胞增殖的物质，有望从根本上解决后囊混浊的问题，造福于人类。, http://www.100md.com