碱性成纤维细胞生长因子及药物对兔晶体上皮细胞的相互作用
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作者：彭惠 李平华 罗莉霞 骆云鹏 汤为学
单位：彭惠 李平华 罗莉霞(重庆医科大学附属第一医院眼科，重庆 400016)；骆云鹏 汤为学(重庆医科大学病理生理教研室，重庆 400046)
关键词：
目的
目的：晶体后囊混浊(后发性白内障)是白内障囊外摘除术后的主要并发症，长期困扰着人们。尽管混浊的后囊膜可通过再次手术或激光的方法去除，但晶体后囊的屏障作用会被破坏，增加视网膜脱离、黄斑囊样水肿等并发症的发生率。研究后囊混浊的发病机制和寻找抑制其发生的方法，是当前提高术后效果的一项重要课题。此研究观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)及药物对兔晶体上皮细胞的相互作用。方法：进行兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLESs)的原代及传代培养，取2～3代已汇合的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，调整细胞浓度至5×104/mL和1×105/mL，接种于96孔培养板中(200μl/孔)。实验包括不同药物、bFGF及bFGF+不同药物试验组，其终浓度bFGF为 10-3、10-2、10-1、1及10 ng/mL，顺铂(cis-Platin, PDD)为2.5、5、10、20及40μg/mL，米托蒽醌(Mitoxantrone, Mit)为0.5、1、2、4及8μg/mL,阿糖胞苷(Cytosine Arabinoside,Ara-C,)为25、50、100、200及400μg/mL。将3种单药和bFGF的5个不同浓度分别加在96孔板内，培养24 h后取出，每孔加药量20μL，每种剂量6个平行孔。bFGF分别与3种单药合用(bFGF+PDD,bGFG+Mit,bFGF+Ara-C)采用合用比例为1∶1的方案，每孔加总量仍为20μL(每种单药剂量及bFGF剂量浓缩1倍各加10 μL)，在37℃饱和湿度7% CO2的培养箱中再分别培养24 h和72 h，用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium)比色法测试结果。结果：bFGF可明显促进晶体上皮细胞的增殖，而PDD和Mit明显抑制晶体上皮细胞的增殖，在bFGF存在的情况下此两种药物仍能抑制晶体上皮细胞的增殖。Ara-C单用无明显抑制晶体上皮细胞的增殖作用，而在bFGF存在时作用细胞72 h表现出抑制作用。结论：bFGF是促进培养兔晶体上皮细胞增殖的重要因素，虽然眼内存在bFGF，但其药物仍能抑制晶体上皮细胞的增殖。对晶体上皮细胞无抑制作用的Ara-C在bFGF存在时作用72 h表现出抑制作用，这可能与在bFGF作用下细胞进入S期增加了对药物Ara-C的敏感性有关。, 百拇医药
单位：彭惠 李平华 罗莉霞(重庆医科大学附属第一医院眼科，重庆 400016)；骆云鹏 汤为学(重庆医科大学病理生理教研室，重庆 400046)
关键词：
目的
目的：晶体后囊混浊(后发性白内障)是白内障囊外摘除术后的主要并发症，长期困扰着人们。尽管混浊的后囊膜可通过再次手术或激光的方法去除，但晶体后囊的屏障作用会被破坏，增加视网膜脱离、黄斑囊样水肿等并发症的发生率。研究后囊混浊的发病机制和寻找抑制其发生的方法，是当前提高术后效果的一项重要课题。此研究观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)及药物对兔晶体上皮细胞的相互作用。方法：进行兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLESs)的原代及传代培养，取2～3代已汇合的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，调整细胞浓度至5×104/mL和1×105/mL，接种于96孔培养板中(200μl/孔)。实验包括不同药物、bFGF及bFGF+不同药物试验组，其终浓度bFGF为 10-3、10-2、10-1、1及10 ng/mL，顺铂(cis-Platin, PDD)为2.5、5、10、20及40μg/mL，米托蒽醌(Mitoxantrone, Mit)为0.5、1、2、4及8μg/mL,阿糖胞苷(Cytosine Arabinoside,Ara-C,)为25、50、100、200及400μg/mL。将3种单药和bFGF的5个不同浓度分别加在96孔板内，培养24 h后取出，每孔加药量20μL，每种剂量6个平行孔。bFGF分别与3种单药合用(bFGF+PDD,bGFG+Mit,bFGF+Ara-C)采用合用比例为1∶1的方案，每孔加总量仍为20μL(每种单药剂量及bFGF剂量浓缩1倍各加10 μL)，在37℃饱和湿度7% CO2的培养箱中再分别培养24 h和72 h，用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium)比色法测试结果。结果：bFGF可明显促进晶体上皮细胞的增殖，而PDD和Mit明显抑制晶体上皮细胞的增殖，在bFGF存在的情况下此两种药物仍能抑制晶体上皮细胞的增殖。Ara-C单用无明显抑制晶体上皮细胞的增殖作用，而在bFGF存在时作用细胞72 h表现出抑制作用。结论：bFGF是促进培养兔晶体上皮细胞增殖的重要因素，虽然眼内存在bFGF，但其药物仍能抑制晶体上皮细胞的增殖。对晶体上皮细胞无抑制作用的Ara-C在bFGF存在时作用72 h表现出抑制作用，这可能与在bFGF作用下细胞进入S期增加了对药物Ara-C的敏感性有关。, 百拇医药