sCD44在结、直肠癌中的表达及临床意义
http://www.100md.com
37c医学网
作者：徐立友 田斌 战志勇 梁维强 汪运山
单位：济南市中心医院250013
关键词：
山东医药001211 细胞间粘附分子CD44(sCD44)是细胞外基质透明质酸酶的主要受体，在肿瘤的生长和转移过程中起重要作用。自1997年以来，我们选择结、直肠住院患者24例进行了sCD44测定。现报告如下
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择已确诊的结、直肠癌24例，男16例，女8例；年龄30～ 74岁。其中16例手术切除，根据癌肿浸润的深度及淋巴结转移的程度，采用Dukes分期，其中A期6例，B、C期10例，术后发现8例有广泛转移(均为B、C期患者)，其余8例为D期。另设2个健康对照组，分别为来自济南市中心医院健康献血青年组(年龄21～25岁)和来自本院健康查体者的老年组(年龄55～65岁)，各34例，每组男女各半。
, 百拇医药
1.2 标本收集 取空腹静脉血5ml，离心分离血清后按需分装冻存于-80℃冰箱内备用。收集中注意：①尽量避免溶血或高血脂标本；②血浆收集同试验方法进行，如EDTA或肝素抗凝剂等；③用去热源和内毒素的试管收集血液；④标本应清澈透明，如有悬浮物应离心去除。
1.3 实验方法 主要试剂包括sCD44标准品、HRP-酶联接物、TMB底物反应液、样本稀释液、洗涤液等。应用仪器：Bio-Rad450型酶标仪，ELISA微量振荡器，水浴恒温箱，进口加样器(5ul、10ul、100ul、200ul、1000ul)，低温冰箱等。采用夹心ELISA法和一步法ELISA方法。用t检验、中位数、百分位数及直线相关分析等统计方法对上述数据进行处理。
2 结果
2.1 sCD44正常值 ①健康对照青年组：17例女性血清中sCD44正常值为314±65ng/ml，中位数为306ng/ml，25%和75%的百分位数分别为314ng/ml、360ng/ml；17男性血清中sCD44正常值为382±99ng/ml，中位数363ng/ml，25%和75%的百分位数分别为345ng/ml、428ng/ml。男、女两组数值经统计学处理未见差异(P>0.05)。合并后的正常值为349±90ng/ml，中位数为330ng/ml，25%和75%的百分位数分别为315ng/ml、415ng/ml。②健康对照老年组：17例女性血清中sCD44正常值为326±45ng/ml，中位数309ng/ml，25%和75%的百分位数分别为318ng/ml、362ng/ml；17例男性血清中sCD44正常值为398±89ng ml；中位数369ng/ml，25%和75%的百分位数分别为389ng/ml、486ng/ml。男、女两组数值经统计学处理未见差异(P>0.05)。合并后的正常值为380±67ng/ml，中位数339ng/ml，25%和75%的百分位数分别为363ng/ml、424ng/ml。提示性别不是分析血清中sCD44水平的因素，故合并使用。
, 百拇医药
2.2 结、直肠癌患者血清sCD44值 6例A期结、直肠癌患者血清中sCD44浓度为357±105ng/ml；与两对照组相比均未见差异(P均>0.05)。10例B、C期结、直肠癌患者血清sCD44浓度为366±98ng/ml，与两对照组及6例A期结、直肠癌患者相比，均未见统计学差异(P均>0.05)。8例广泛转移者和8例D期患者血清中sCD44浓度为726±157ng/ml，分别与两对照组、6例A期患者相比，均有统计学差异(P值小于0.001、0.001和0.005)。提示sCD44浓度与结直肠癌转移有相关性。
3 讨论
CD44又叫P糖蛋白-1、细胞外基质受体Ⅲ、F10-44-2、H- CAM、 HUTCH -1、IN(LU)相关蛋白P80、Hermes抗原，透明质酸酶外基质成分的受体，属于CAM家族〔1〕。目前认为，CD44分子由三种变异体组成〔2〕。我们测定的是除细胞外区变异成分V2～V10外的所有成分的可溶性形式，即所谓标准形成的可溶性CD44(sCD44)。我们检测结果表明，正常男性血清中sCD44浓度尽管比女性有升高的趋势，但未见统计学差异，提示性别不是血清sCD44的影响因素。
, 百拇医药
CD44在多种细胞(上皮细胞、活化的淋巴细胞、巨噬细胞和肿瘤细胞)表面表达。肿瘤细胞表面表达CD44有助于肿瘤细胞转移，特别是通过细胞外基质进入血循环或通过血循 环进入外基质到达靶组织的过程中可能尤为重要〔3〕。我们推测，结、直肠癌患者的血清中sCD44可能来源是：①结、直肠癌细胞分泌或脱落而来；②免疫活性细胞分泌脱落而来；③其他细胞表面分泌、脱落或凋亡后的各类细胞经非特异性水解酶酶解其胞外区而来。
本实验结果显示：结、直肠癌患者A期和B、C两 期无广泛转移者与对照组相比未见统计学差异，提示sCD44浓度难以反应结、直肠癌的分期。本组16例广泛转移的结、直肠癌患者血清中sCD44浓度明显高于对照组、结、直肠癌A期 和B、C两期无广泛转移者。提示sCD44浓度的高低与结、直肠癌的转移密切相关。由于sCD44浓度难以反应结、直肠癌的分期，而在转移的结、直肠癌患者中都有高水平的sCD44出现，我们认为：①肿瘤转移是全身免疫系统失控的表现形式之一，因而涉及机体总的免疫状态；②肿瘤转移涉及多个过程或步骤，因而表达CD44的细胞数是显著增高的，以适应肿瘤转移的需要；③高水平的sCD44有助于肿瘤细胞的粘附和转移。我们认为，sCD44可作为结、直肠癌转移标志，有助于手术范围的判断。
, 百拇医药
4 参考文献
1，Aruffo A，Stamenkovic I，Melnick M，etal.Seed B CD44 is the principal cell surface receptor for hyaluronate.Cell，1990，61：1303～1313.
2，Screaton GR. Bell MV，Bell JI，et al.The identification of a new alternative exon with highly restricted tissue expression in transcripts edcoding the mouse Pgp-1(CD44) homing receptor.Comparison of all 10 variable exons between mouse，human and rat.J Biol Chem，1993，268：12235～12238.
3，Bazil V，Horejsi V.Shedding of the CD44 adhesion molecule from leucocytes induced by anti-CD44 monoclonal anti-body stimulating the effect of a natural receptor ligand. J Immunol，1992，149：747～753.
(2000-02-12收稿), http://www.100md.com
单位：济南市中心医院250013
关键词：
山东医药001211 细胞间粘附分子CD44(sCD44)是细胞外基质透明质酸酶的主要受体，在肿瘤的生长和转移过程中起重要作用。自1997年以来，我们选择结、直肠住院患者24例进行了sCD44测定。现报告如下
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择已确诊的结、直肠癌24例，男16例，女8例；年龄30～ 74岁。其中16例手术切除，根据癌肿浸润的深度及淋巴结转移的程度，采用Dukes分期，其中A期6例，B、C期10例，术后发现8例有广泛转移(均为B、C期患者)，其余8例为D期。另设2个健康对照组，分别为来自济南市中心医院健康献血青年组(年龄21～25岁)和来自本院健康查体者的老年组(年龄55～65岁)，各34例，每组男女各半。
, 百拇医药
1.2 标本收集 取空腹静脉血5ml，离心分离血清后按需分装冻存于-80℃冰箱内备用。收集中注意：①尽量避免溶血或高血脂标本；②血浆收集同试验方法进行，如EDTA或肝素抗凝剂等；③用去热源和内毒素的试管收集血液；④标本应清澈透明，如有悬浮物应离心去除。
1.3 实验方法 主要试剂包括sCD44标准品、HRP-酶联接物、TMB底物反应液、样本稀释液、洗涤液等。应用仪器：Bio-Rad450型酶标仪，ELISA微量振荡器，水浴恒温箱，进口加样器(5ul、10ul、100ul、200ul、1000ul)，低温冰箱等。采用夹心ELISA法和一步法ELISA方法。用t检验、中位数、百分位数及直线相关分析等统计方法对上述数据进行处理。
2 结果
2.1 sCD44正常值 ①健康对照青年组：17例女性血清中sCD44正常值为314±65ng/ml，中位数为306ng/ml，25%和75%的百分位数分别为314ng/ml、360ng/ml；17男性血清中sCD44正常值为382±99ng/ml，中位数363ng/ml，25%和75%的百分位数分别为345ng/ml、428ng/ml。男、女两组数值经统计学处理未见差异(P>0.05)。合并后的正常值为349±90ng/ml，中位数为330ng/ml，25%和75%的百分位数分别为315ng/ml、415ng/ml。②健康对照老年组：17例女性血清中sCD44正常值为326±45ng/ml，中位数309ng/ml，25%和75%的百分位数分别为318ng/ml、362ng/ml；17例男性血清中sCD44正常值为398±89ng ml；中位数369ng/ml，25%和75%的百分位数分别为389ng/ml、486ng/ml。男、女两组数值经统计学处理未见差异(P>0.05)。合并后的正常值为380±67ng/ml，中位数339ng/ml，25%和75%的百分位数分别为363ng/ml、424ng/ml。提示性别不是分析血清中sCD44水平的因素，故合并使用。
, 百拇医药
2.2 结、直肠癌患者血清sCD44值 6例A期结、直肠癌患者血清中sCD44浓度为357±105ng/ml；与两对照组相比均未见差异(P均>0.05)。10例B、C期结、直肠癌患者血清sCD44浓度为366±98ng/ml，与两对照组及6例A期结、直肠癌患者相比，均未见统计学差异(P均>0.05)。8例广泛转移者和8例D期患者血清中sCD44浓度为726±157ng/ml，分别与两对照组、6例A期患者相比，均有统计学差异(P值小于0.001、0.001和0.005)。提示sCD44浓度与结直肠癌转移有相关性。
3 讨论
CD44又叫P糖蛋白-1、细胞外基质受体Ⅲ、F10-44-2、H- CAM、 HUTCH -1、IN(LU)相关蛋白P80、Hermes抗原，透明质酸酶外基质成分的受体，属于CAM家族〔1〕。目前认为，CD44分子由三种变异体组成〔2〕。我们测定的是除细胞外区变异成分V2～V10外的所有成分的可溶性形式，即所谓标准形成的可溶性CD44(sCD44)。我们检测结果表明，正常男性血清中sCD44浓度尽管比女性有升高的趋势，但未见统计学差异，提示性别不是血清sCD44的影响因素。
, 百拇医药
CD44在多种细胞(上皮细胞、活化的淋巴细胞、巨噬细胞和肿瘤细胞)表面表达。肿瘤细胞表面表达CD44有助于肿瘤细胞转移，特别是通过细胞外基质进入血循环或通过血循 环进入外基质到达靶组织的过程中可能尤为重要〔3〕。我们推测，结、直肠癌患者的血清中sCD44可能来源是：①结、直肠癌细胞分泌或脱落而来；②免疫活性细胞分泌脱落而来；③其他细胞表面分泌、脱落或凋亡后的各类细胞经非特异性水解酶酶解其胞外区而来。
本实验结果显示：结、直肠癌患者A期和B、C两 期无广泛转移者与对照组相比未见统计学差异，提示sCD44浓度难以反应结、直肠癌的分期。本组16例广泛转移的结、直肠癌患者血清中sCD44浓度明显高于对照组、结、直肠癌A期 和B、C两期无广泛转移者。提示sCD44浓度的高低与结、直肠癌的转移密切相关。由于sCD44浓度难以反应结、直肠癌的分期，而在转移的结、直肠癌患者中都有高水平的sCD44出现，我们认为：①肿瘤转移是全身免疫系统失控的表现形式之一，因而涉及机体总的免疫状态；②肿瘤转移涉及多个过程或步骤，因而表达CD44的细胞数是显著增高的，以适应肿瘤转移的需要；③高水平的sCD44有助于肿瘤细胞的粘附和转移。我们认为，sCD44可作为结、直肠癌转移标志，有助于手术范围的判断。
, 百拇医药
4 参考文献
1，Aruffo A，Stamenkovic I，Melnick M，etal.Seed B CD44 is the principal cell surface receptor for hyaluronate.Cell，1990，61：1303～1313.
2，Screaton GR. Bell MV，Bell JI，et al.The identification of a new alternative exon with highly restricted tissue expression in transcripts edcoding the mouse Pgp-1(CD44) homing receptor.Comparison of all 10 variable exons between mouse，human and rat.J Biol Chem，1993，268：12235～12238.
3，Bazil V，Horejsi V.Shedding of the CD44 adhesion molecule from leucocytes induced by anti-CD44 monoclonal anti-body stimulating the effect of a natural receptor ligand. J Immunol，1992，149：747～753.
(2000-02-12收稿), http://www.100md.com