脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞株耐受与致敏并存的研究
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作者：孙卫民 刘辉 朱晓燕 徐仁宝
单位：孙卫民(免疫学教研室，上海 200433)；刘辉 朱晓燕 徐仁宝(第二军医大学 病理生理学教研室)
关键词：
目的
目的：全身炎症反应综合征(SIRS)和多器官衰竭(MODS)时血中出现多种炎症介质，一般认为这是白细胞致敏(primed)的结果。我们用巨噬细胞株作为研究对象，建立了代表单克隆细胞水平耐受与致敏并存的细胞模型，并对其机制做了初步探讨。方法：巨噬细胞株RAW 264.7以不同刺激作用后测上清中TNF-α(L929杀伤活性)、NO(Griess反应)、IL-1(胸腺细胞增殖，MTT法)和细胞内游离浓度([Ca2+]i，用荧光显微镜成像系统，Frua-2负载)。结果至少重复6次。结果及结论：10 ng/mL LPS预处理(pretreat)18 h，洗去，加入100 ng/mL LPS攻击(challenge) 24 h, TNF-α和NO分别由未预处理组的7.3±1.7 ng/mL和29.7±3.2 μmol/L减少到1.2±0.5 ng/mL和20.2±1.9 μmol/L(P<0.05)，说明已诱导了耐受；同时，IL-1由未预处理组的0.50±0.02 pg/mL增至3.30±0.08 pg/mL(P<0.05)，说明LPS耐受细胞也可出现高反应，即LPS预处理对TNF-α和NO来说是诱导耐受，而对IL-1来说却起到了致敏作用。10 ng/mL LPS预处理18 h后用15 μg/mL MDP、1 μmol/L fMLD、1 mg/mL酵母多糖及1 μg/mL PMA攻击，则NO分别由未预处理组的5.1±1.2、4.2±0.9、14.4±2.7和8.1±3.1 μmol/L增至16.9±2.5、12.9±1.9、18.8±3.1和26.4±3.8 μmol/L(均P<0.05)；而TNF-α在酵母多糖组不变，在PMA组由未预处理组的3.8±0.7降至0.8±0.4 ng/mL(P<0.05)。结论：LPS在同一细胞克隆确可同时诱导耐受和致敏，而判断耐受或致敏应由特定攻击条件和特定的检测指标决定。
国家自然科学基金(No. 39730210)资助, http://www.100md.com
单位：孙卫民(免疫学教研室，上海 200433)；刘辉 朱晓燕 徐仁宝(第二军医大学 病理生理学教研室)
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目的：全身炎症反应综合征(SIRS)和多器官衰竭(MODS)时血中出现多种炎症介质，一般认为这是白细胞致敏(primed)的结果。我们用巨噬细胞株作为研究对象，建立了代表单克隆细胞水平耐受与致敏并存的细胞模型，并对其机制做了初步探讨。方法：巨噬细胞株RAW 264.7以不同刺激作用后测上清中TNF-α(L929杀伤活性)、NO(Griess反应)、IL-1(胸腺细胞增殖，MTT法)和细胞内游离浓度([Ca2+]i，用荧光显微镜成像系统，Frua-2负载)。结果至少重复6次。结果及结论：10 ng/mL LPS预处理(pretreat)18 h，洗去，加入100 ng/mL LPS攻击(challenge) 24 h, TNF-α和NO分别由未预处理组的7.3±1.7 ng/mL和29.7±3.2 μmol/L减少到1.2±0.5 ng/mL和20.2±1.9 μmol/L(P<0.05)，说明已诱导了耐受；同时，IL-1由未预处理组的0.50±0.02 pg/mL增至3.30±0.08 pg/mL(P<0.05)，说明LPS耐受细胞也可出现高反应，即LPS预处理对TNF-α和NO来说是诱导耐受，而对IL-1来说却起到了致敏作用。10 ng/mL LPS预处理18 h后用15 μg/mL MDP、1 μmol/L fMLD、1 mg/mL酵母多糖及1 μg/mL PMA攻击，则NO分别由未预处理组的5.1±1.2、4.2±0.9、14.4±2.7和8.1±3.1 μmol/L增至16.9±2.5、12.9±1.9、18.8±3.1和26.4±3.8 μmol/L(均P<0.05)；而TNF-α在酵母多糖组不变，在PMA组由未预处理组的3.8±0.7降至0.8±0.4 ng/mL(P<0.05)。结论：LPS在同一细胞克隆确可同时诱导耐受和致敏，而判断耐受或致敏应由特定攻击条件和特定的检测指标决定。
国家自然科学基金(No. 39730210)资助, http://www.100md.com