羟基喜树碱对兔晶体上皮细胞的抑制作用
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作者：罗莉霞 李平华 彭惠 骆云鹏 汤为学
单位：罗莉霞 李平华 彭惠(重庆医科大学临床学院眼科，重庆 400016)；骆云鹏 汤为学(重庆医科大学病理生理教研室，重庆 400046)
关键词：
中国病理生理杂志0010332
目的：为研究羟基喜树碱(Hydroxycamptothecine,HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLECs)生长的影响，探索预防后发性白内障的药物。方法：2～3月龄健康家兔20只；DMEM/F12培养基；胎牛血清；MTT；细胞培养瓶；96孔酶标板；全自动酶标光度仪；倒置显微镜；透射电子显微镜；离心机。(1)取2～3代的对数生长期RLECs于96孔板中，置入CO2孵箱中培养24 h后，将不同浓度的HCPT分别作用24及72 h，用MTT测定法观察其对RLECs增殖的抑制作用；(2)将传代的RLECs接种于96孔板中，立即加入HCPT(浓度为小于半效抑制量的1/10，因该浓度对细胞无杀伤作用)24 h后取出，加入MTT在酶标仪上比色；(3)将传代的RLECs培养在盖玻片上24 h后，加入一定浓度的HCPT，作用72 h后，用多聚甲醛固定，行苏木精-伊红染色，光镜下观察RLECs的形态变化。(4)将浓度为1.34 μg/mL的HCPT作用于2～3代的RLECs 24 h，用0.25%胰蛋白酶消化，PBS洗两次，离心弃上清液，戊二醛固定，电镜观察超微结构的变化(另设未加药组为对照)。结果：HCPT能有效抑制体外培养的RLECs的增殖。24 h的半效抑制量(ID50)为96.041 μg/mL,72 h的ID50为1.340 μg/mL；且HCPT对RLECs贴壁有影响，使部分RLECs不能贴壁。光镜下可见HCPT主要引起细胞核固缩、碎裂等病理变化，其胞浆的改变表现为空泡及深染的粗颗粒。电镜下见经HCPT处理的RLECs线粒体肿胀，可见典型的凋亡细胞及凋落小体的形成。结论：HCPT是一种新型的抗癌药，其作用靶是拓朴异构酶Ⅰ(Topo Ⅰ)。其低剂量、长时间作用于RLECs，抑制效果明显，该药不仅抑制细胞增殖，还影响细胞贴壁。因此是一种有潜力的预防后发性白内障的侯选药物。, 百拇医药
单位：罗莉霞 李平华 彭惠(重庆医科大学临床学院眼科，重庆 400016)；骆云鹏 汤为学(重庆医科大学病理生理教研室，重庆 400046)
关键词：
中国病理生理杂志0010332
目的：为研究羟基喜树碱(Hydroxycamptothecine,HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLECs)生长的影响，探索预防后发性白内障的药物。方法：2～3月龄健康家兔20只；DMEM/F12培养基；胎牛血清；MTT；细胞培养瓶；96孔酶标板；全自动酶标光度仪；倒置显微镜；透射电子显微镜；离心机。(1)取2～3代的对数生长期RLECs于96孔板中，置入CO2孵箱中培养24 h后，将不同浓度的HCPT分别作用24及72 h，用MTT测定法观察其对RLECs增殖的抑制作用；(2)将传代的RLECs接种于96孔板中，立即加入HCPT(浓度为小于半效抑制量的1/10，因该浓度对细胞无杀伤作用)24 h后取出，加入MTT在酶标仪上比色；(3)将传代的RLECs培养在盖玻片上24 h后，加入一定浓度的HCPT，作用72 h后，用多聚甲醛固定，行苏木精-伊红染色，光镜下观察RLECs的形态变化。(4)将浓度为1.34 μg/mL的HCPT作用于2～3代的RLECs 24 h，用0.25%胰蛋白酶消化，PBS洗两次，离心弃上清液，戊二醛固定，电镜观察超微结构的变化(另设未加药组为对照)。结果：HCPT能有效抑制体外培养的RLECs的增殖。24 h的半效抑制量(ID50)为96.041 μg/mL,72 h的ID50为1.340 μg/mL；且HCPT对RLECs贴壁有影响，使部分RLECs不能贴壁。光镜下可见HCPT主要引起细胞核固缩、碎裂等病理变化，其胞浆的改变表现为空泡及深染的粗颗粒。电镜下见经HCPT处理的RLECs线粒体肿胀，可见典型的凋亡细胞及凋落小体的形成。结论：HCPT是一种新型的抗癌药，其作用靶是拓朴异构酶Ⅰ(Topo Ⅰ)。其低剂量、长时间作用于RLECs，抑制效果明显，该药不仅抑制细胞增殖，还影响细胞贴壁。因此是一种有潜力的预防后发性白内障的侯选药物。, 百拇医药