碘化麝香草酚对结核杆菌消毒的研究
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作者：吴兆儒 焦凤华 王忠仁 张本 甄小红 宛淑贤
单位：吴兆儒(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；焦凤华(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；王忠仁(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；张本(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；甄小红(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；宛淑贤(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)
关键词：
中国防痨杂志000114 碘化麝香草酚是一种古老的化学药品，我们对其消毒结核杆菌的效果进行了研究，结果如下。
材 料
1.碘化麝香草酚消毒液：在水中加入适量碘、麝香草酚和WX添加剂，摇匀，密封48小时，成为无沉浮物、乳白色，pH2.0的溶液。
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2.结核杆菌繁殖体菌悬液：菌种：H37RV，批号93009(3)，由中国细菌保藏管理中心提供。取第4代至13代培养21～28天新鲜菌液作实验。将改良罗氏培养基上的菌液取下，置玛瑙乳钵中研磨，移至试管中，加入0.03mol/L PBS(缓冲液)稀释成1mg/ml备用。
3.培养基：改良罗氏培养基
4.中和液：0.3%吐温80和0.5%硫代硫酸钠水溶液，灭菌备用。
方 法
1.中和试验：消毒液含碘浓度50mg/L。试验按下列分组进行。①组：消毒液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟；②组：消毒液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟，取0.5ml加中和液4.5ml，混匀，10分钟；③组：中和液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟；④组：消毒液0.5ml中和液4.0ml；混匀，10分钟，加菌液0.5ml，混匀，5分钟；⑤组：缓冲液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟；⑥组：培养基对照。③④⑤组分别用中和液、消毒液加中和液产物和缓冲液分别稀释，同①②组分别取样，进行活菌单位计数接种，一式二份，37℃培养28天，记录最终结果。实验在22℃溶水中进行，重复5次。
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2.繁殖体杀灭试验：消毒液设4个含浓度：80mg/L、60mg/L、40mg/L和30mg/L；4个消毒时间：3、5、10和20分钟。按消毒液4.5ml加菌液0.5ml(用缓冲液代替消毒液作对照)，摇匀，作用至规定时间，取0.5ml加于4.5ml中和液中，摇匀，作用10分钟，作活菌计数接种，一式二份，37℃培养28天，记录最终结果，实验在22℃浴中进行重复5次。
3.表面消毒：取0.1ml菌液滴在消毒干燥玻片上，涂匀，范围2cm2，37℃干燥备用，试验消毒液含碘浓度1666.7mg/L，将消毒棉签在消毒液中浸湿(对照为缓冲液)，然后，涂抹载体上的菌斑，实难组30片，对照组5片。1分钟后，奖涂抹过菌的棉签在5ml中和液中反复冲洗80次，取样作活菌单位计数接种，一式二份，37℃培养28天，记录最终结果，实验在20℃室温进行。
4.痰菌消毒：试验消毒液含碘3333.3mg/L；本所内科肺结核患者24小时痰72份。每份痰分2组，每组1ml。试验组加入2.0ml消毒液，混匀。于2、3、4、5小时取少许痰加于2.0ml中和液中，混匀，10分钟。然后将痰涂在培养基表面，一式二份；对照组加入4%H2SO4 2.0ml，作用20分钟。分别取样作活菌单位接种，一式二份，每份0.1ml，37℃培养60天，每天观察记录结果。
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结 果
1.中和试验：在22℃溶水中，经5次重复试验，①组：消毒液+菌液、②组：(消毒液+菌液)+中和液、③组：中和液+菌液、④组：(消毒液+中和液)+菌液、⑤组：缓冲液+菌液、⑥组：培养基，平均活菌单位分别为0、7 700、3 080 000、2 920 000、3 030 000和O cfu/ml；OD分别为0、400、501 000、541 000、672 000和O cfu/ml。结果表明，0.3%吐温80和0.5%硫代硫酸钠水溶液可以有效地中和碘化麝香草酚对结核菌的作用。
2.杀灭结核杆菌繁殖体试验：在22℃浴水中，重复5次试验，结果证明，碘化麝香草酚对结核菌繁殖体有很强的杀灭作用(表1)。
表1 碘化麝香草酚杀灭结核杆菌试验结果(%) 消毒液碘
浓度(mg/L)
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消 毒 时 间 ( 分 )
3
5
10
20
杀 菌 率
OD
杀 菌 率
OD
杀 菌 率
OD
杀 菌 率
OD
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80
100.0
0.0
100.0
0.0
100.0
0.0
100.0
0.0
60
99.94
0.02
99.97
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0.02
99.98
0.0
100.0
0.0
40
99.62
0.23
99.89
0.03
99.97
0.0
99.98
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0.0
30
99.20
0.80
99.60
0.20
99.87
0.06
99.92
0.04
试验菌液起始浓度3 150 000 cfu/ml,OD 141 000 cfu/ml
3.表面消毒：试验组30片载体，用含碘浓度1 666.7mg/L消毒液涂抹1分钟，取样接种，均无结核菌生长。5片对照载体，平均活菌单位为56 000 cfu/ml，OD为6 100 cfu/ml，实验菌浓度为3 250 000 cfu/ml，结果表明，碘化麝香草酚可以有效地杀灭载体表面上的结核菌。
, 百拇医药
4.结核病患者痰消毒：试验72份痰，对照组培养阳性32份，经含碘浓度3 333.3mg/L碘化麝香草酚液消毒2、3、4、5小时，培阴率分别为3.1%、34.4%、84.4%和100%。说明用本消毒液进行痰菌消毒是可行的。讨 论
碘化麝香草酚是一种古老的化学药品，本研究表明，该药品对结核杆菌有较强的杀菌作用。含碘80mg/L，作用3分钟，可完全杀死试管中结核杆菌。含碘1 666.7mg/L，作用1分钟，可完全杀灭载体表面的结核菌，含碘3 333.3mg/L，浸泡肺结核患者痰5小时，可将痰中结核菌完全杀灭。上述结果说明，碘化麝香草酚有进一步研究和开发的价值。■
收稿日期：1999-03-17
修改日期：1999-07-26, 百拇医药
单位：吴兆儒(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；焦凤华(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；王忠仁(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；张本(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；甄小红(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)；宛淑贤(北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149)
关键词：
中国防痨杂志000114 碘化麝香草酚是一种古老的化学药品，我们对其消毒结核杆菌的效果进行了研究，结果如下。
材 料
1.碘化麝香草酚消毒液：在水中加入适量碘、麝香草酚和WX添加剂，摇匀，密封48小时，成为无沉浮物、乳白色，pH2.0的溶液。
, http://www.100md.com
2.结核杆菌繁殖体菌悬液：菌种：H37RV，批号93009(3)，由中国细菌保藏管理中心提供。取第4代至13代培养21～28天新鲜菌液作实验。将改良罗氏培养基上的菌液取下，置玛瑙乳钵中研磨，移至试管中，加入0.03mol/L PBS(缓冲液)稀释成1mg/ml备用。
3.培养基：改良罗氏培养基
4.中和液：0.3%吐温80和0.5%硫代硫酸钠水溶液，灭菌备用。
方 法
1.中和试验：消毒液含碘浓度50mg/L。试验按下列分组进行。①组：消毒液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟；②组：消毒液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟，取0.5ml加中和液4.5ml，混匀，10分钟；③组：中和液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟；④组：消毒液0.5ml中和液4.0ml；混匀，10分钟，加菌液0.5ml，混匀，5分钟；⑤组：缓冲液4.5ml加菌液0.5ml，混匀，5分钟；⑥组：培养基对照。③④⑤组分别用中和液、消毒液加中和液产物和缓冲液分别稀释，同①②组分别取样，进行活菌单位计数接种，一式二份，37℃培养28天，记录最终结果。实验在22℃溶水中进行，重复5次。
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2.繁殖体杀灭试验：消毒液设4个含浓度：80mg/L、60mg/L、40mg/L和30mg/L；4个消毒时间：3、5、10和20分钟。按消毒液4.5ml加菌液0.5ml(用缓冲液代替消毒液作对照)，摇匀，作用至规定时间，取0.5ml加于4.5ml中和液中，摇匀，作用10分钟，作活菌计数接种，一式二份，37℃培养28天，记录最终结果，实验在22℃浴中进行重复5次。
3.表面消毒：取0.1ml菌液滴在消毒干燥玻片上，涂匀，范围2cm2，37℃干燥备用，试验消毒液含碘浓度1666.7mg/L，将消毒棉签在消毒液中浸湿(对照为缓冲液)，然后，涂抹载体上的菌斑，实难组30片，对照组5片。1分钟后，奖涂抹过菌的棉签在5ml中和液中反复冲洗80次，取样作活菌单位计数接种，一式二份，37℃培养28天，记录最终结果，实验在20℃室温进行。
4.痰菌消毒：试验消毒液含碘3333.3mg/L；本所内科肺结核患者24小时痰72份。每份痰分2组，每组1ml。试验组加入2.0ml消毒液，混匀。于2、3、4、5小时取少许痰加于2.0ml中和液中，混匀，10分钟。然后将痰涂在培养基表面，一式二份；对照组加入4%H2SO4 2.0ml，作用20分钟。分别取样作活菌单位接种，一式二份，每份0.1ml，37℃培养60天，每天观察记录结果。
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结 果
1.中和试验：在22℃溶水中，经5次重复试验，①组：消毒液+菌液、②组：(消毒液+菌液)+中和液、③组：中和液+菌液、④组：(消毒液+中和液)+菌液、⑤组：缓冲液+菌液、⑥组：培养基，平均活菌单位分别为0、7 700、3 080 000、2 920 000、3 030 000和O cfu/ml；OD分别为0、400、501 000、541 000、672 000和O cfu/ml。结果表明，0.3%吐温80和0.5%硫代硫酸钠水溶液可以有效地中和碘化麝香草酚对结核菌的作用。
2.杀灭结核杆菌繁殖体试验：在22℃浴水中，重复5次试验，结果证明，碘化麝香草酚对结核菌繁殖体有很强的杀灭作用(表1)。
表1 碘化麝香草酚杀灭结核杆菌试验结果(%) 消毒液碘
浓度(mg/L)
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消 毒 时 间 ( 分 )
3
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杀 菌 率
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杀 菌 率
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试验菌液起始浓度3 150 000 cfu/ml,OD 141 000 cfu/ml
3.表面消毒：试验组30片载体，用含碘浓度1 666.7mg/L消毒液涂抹1分钟，取样接种，均无结核菌生长。5片对照载体，平均活菌单位为56 000 cfu/ml，OD为6 100 cfu/ml，实验菌浓度为3 250 000 cfu/ml，结果表明，碘化麝香草酚可以有效地杀灭载体表面上的结核菌。
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4.结核病患者痰消毒：试验72份痰，对照组培养阳性32份，经含碘浓度3 333.3mg/L碘化麝香草酚液消毒2、3、4、5小时，培阴率分别为3.1%、34.4%、84.4%和100%。说明用本消毒液进行痰菌消毒是可行的。讨 论
碘化麝香草酚是一种古老的化学药品，本研究表明，该药品对结核杆菌有较强的杀菌作用。含碘80mg/L，作用3分钟，可完全杀死试管中结核杆菌。含碘1 666.7mg/L，作用1分钟，可完全杀灭载体表面的结核菌，含碘3 333.3mg/L，浸泡肺结核患者痰5小时，可将痰中结核菌完全杀灭。上述结果说明，碘化麝香草酚有进一步研究和开发的价值。■
收稿日期：1999-03-17
修改日期：1999-07-26, 百拇医药