一氧化氮对大鼠肺泡巨噬细胞增殖、凋亡及细胞内Bcl-2和Bax含量的影响
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作者：王殿华 陈晓玲 黄善生 李文斌 王新良
单位：王殿华(河北医科大学基础医学院病理生理教研室，河北 石家庄 050017)；陈晓玲 黄善生 李文斌 王新良(河北医科大学基础所病理生理研究室)
关键词：
中国病理生理杂志0010297
目的：以往的工作表明，在平阳霉素诱导大鼠纤维化形成过程中，肺内NO增多期，大鼠肺泡灌洗液中细胞数量和凋亡细胞数均增多，而细胞的增殖无明显的变化；肺纤维化形成期，肺泡灌洗液中细胞数量已有恢复，但凋亡细胞仍增多，细胞增殖受到抑制。为探讨NO对肺泡巨噬细胞增殖和凋亡的影响作用，本实验在离体水平观察NO供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)、NO前体L-精氨酸(L-arginine, L-Arg)和NOS的阻断剂L-硝基精氨酸(NW-nitro-L-arginine, L-NNA)对正常大鼠肺泡巨噬细胞(AM)增殖及凋亡的影响；此外，还观察凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白产物含量的相应变化。方法：实验分为SNP组(AM+SNP 1×10-3 mol/L, 24 h)， L-Arg组(AM+L-Arg 2×10-3 mol/L， 24 h)、L-NNA(AM+L-NNA 1.5×10-3 mol/L， 24 h)和对照组(contrl)。收集细胞，流式细胞仪测定细胞增殖、凋亡和细胞内Bcl-2和Bax蛋白含量。每项指标测定4例，每例测定1×104个细胞。结果：SNP组肺泡巨噬细胞的凋亡细胞数(7.7±0.6, ×102 cells,
±s下同)较control组(3.0±1.6，×102 cells)明显增多(P<0.01)；肺泡巨噬细胞的增殖指数的变化无明显差异。L-NNA组肺泡巨噬细胞的凋亡细胞数(12.1±1.8， ×102 cells)和增殖指数(14.9±0.8， ×102 cells)均较control组(3.0±1.6, ×102 cells； 12.8±0.6，×102 cells)增多(P<0.01，P<0.05)；L-Arg组肺泡巨噬细胞的凋亡细胞数及细胞增殖指数的变化均无明显差异。SNP或L-NNA所诱导的肺泡巨噬细胞的凋亡均伴有细胞内的Bcl-2含量(56.3±2.5， vs正常70.7±8.4道数/细胞)的降低和Bax含量(55.7±1.5，vs正常44.7±1.5道数/细胞)的升高(P<0.05， P<0.01)。结论：NO能促进肺泡巨噬细胞的凋亡，但对其增殖无作用；完全阻断内源性NO，肺泡巨噬细胞增殖和凋亡都增强；SNP和L-NNA诱导肺泡巨噬细胞凋亡的分子机制之一，可能与细胞内Bax蛋白上调和Bcl-2蛋白下调有关。这提示，肺内NO含量的变化，能影响肺巨噬细胞的凋亡。, 百拇医药
单位：王殿华(河北医科大学基础医学院病理生理教研室，河北 石家庄 050017)；陈晓玲 黄善生 李文斌 王新良(河北医科大学基础所病理生理研究室)
关键词：
中国病理生理杂志0010297
目的：以往的工作表明，在平阳霉素诱导大鼠纤维化形成过程中，肺内NO增多期，大鼠肺泡灌洗液中细胞数量和凋亡细胞数均增多，而细胞的增殖无明显的变化；肺纤维化形成期，肺泡灌洗液中细胞数量已有恢复，但凋亡细胞仍增多，细胞增殖受到抑制。为探讨NO对肺泡巨噬细胞增殖和凋亡的影响作用，本实验在离体水平观察NO供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)、NO前体L-精氨酸(L-arginine, L-Arg)和NOS的阻断剂L-硝基精氨酸(NW-nitro-L-arginine, L-NNA)对正常大鼠肺泡巨噬细胞(AM)增殖及凋亡的影响；此外，还观察凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白产物含量的相应变化。方法：实验分为SNP组(AM+SNP 1×10-3 mol/L, 24 h)， L-Arg组(AM+L-Arg 2×10-3 mol/L， 24 h)、L-NNA(AM+L-NNA 1.5×10-3 mol/L， 24 h)和对照组(contrl)。收集细胞，流式细胞仪测定细胞增殖、凋亡和细胞内Bcl-2和Bax蛋白含量。每项指标测定4例，每例测定1×104个细胞。结果：SNP组肺泡巨噬细胞的凋亡细胞数(7.7±0.6, ×102 cells,
±s下同)较control组(3.0±1.6，×102 cells)明显增多(P<0.01)；肺泡巨噬细胞的增殖指数的变化无明显差异。L-NNA组肺泡巨噬细胞的凋亡细胞数(12.1±1.8， ×102 cells)和增殖指数(14.9±0.8， ×102 cells)均较control组(3.0±1.6, ×102 cells； 12.8±0.6，×102 cells)增多(P<0.01，P<0.05)；L-Arg组肺泡巨噬细胞的凋亡细胞数及细胞增殖指数的变化均无明显差异。SNP或L-NNA所诱导的肺泡巨噬细胞的凋亡均伴有细胞内的Bcl-2含量(56.3±2.5， vs正常70.7±8.4道数/细胞)的降低和Bax含量(55.7±1.5，vs正常44.7±1.5道数/细胞)的升高(P<0.05， P<0.01)。结论：NO能促进肺泡巨噬细胞的凋亡，但对其增殖无作用；完全阻断内源性NO，肺泡巨噬细胞增殖和凋亡都增强；SNP和L-NNA诱导肺泡巨噬细胞凋亡的分子机制之一，可能与细胞内Bax蛋白上调和Bcl-2蛋白下调有关。这提示，肺内NO含量的变化，能影响肺巨噬细胞的凋亡。, 百拇医药