作者单位：510630 广州，中山大学附属第三医院儿科(余婧，朱顺叶，唐本玉，潘思年，张敏，彭碧秀)；510080 广州，中山大学中山医学院在读硕士研究生(余婧)

    生命早期不同营养状态对大鼠体质量及下丘脑mTOR表达的影响

    余婧朱顺叶唐本玉潘思年张敏彭碧秀

    【摘要】目的研究生命早期的营养状态对各生长期大鼠体质量、下丘脑哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响。方法将84只1日龄SD大鼠分为小窝组(40只)与对照组(44只，哺乳期死亡2只)，母乳喂养至21日龄。断乳后将2组大鼠各自随机分为高脂组及普通组，于不同生长期取鼠测量体质量、Lee’s指数、内脏脂肪质量(VFM)及检测下丘脑mTOR的表达情况。结果未发育期小窝组体质量明显高于对照组(P

    于大鼠腹主动脉取血，采用颈椎脱臼法将其处死。取肠系膜、生殖器及肾脏等周围脂肪称质量，即为内脏脂肪质量(VFM)[9]。迅速分离大鼠下丘脑置于液氮中保存，下丘脑定位为，头侧至视交叉前3 mm，尾侧至乳头体，两侧至下丘脑沟，深度为3 mm。

    三、下丘脑总mTOR测定

    取适量大鼠下丘脑组织，加入相应组织细胞裂解液于玻璃匀浆器内匀浆，匀浆离心后取上清液1 μl用BCA法测定蛋白浓度。使用常规蛋白免疫印迹法制备蛋白样品，并进行垂直电泳、湿法转膜孵育一抗、二抗，用成像系统成像并进行灰度分析。半定量分析各样本下丘脑mTOR和内参β-actin的含量，计算各个实验组mTOR的相对表达量。

    四、统计学处理

    结果

    一、哺乳期喂养方式对未发育期大鼠体质量的影响

    大鼠初始体质量、喂养方式对未发育期大鼠体质量、Lee’s指数及VFM的影响见表1。2窝大鼠的初始体质量比较差异无统计学意义(P>0.05)。给予不同的哺乳方式后，S组体质量增长较快，断乳时S组与C组体质量及Lee’s指数比较差异均有统计学意义(P均0.05)。

    表1 不同喂养方式对S组及C组未发育期

    二、不同饲料对发育前期、发育期及成年期雌性大鼠体质量、Lee’s指数及VFM的影响

    不同饲料喂养对发育前期、发育期及成年期雌性大鼠的体质量、Lee’s指数及VFM的影响见表2 ......