Yes相关蛋白在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及与细胞增殖的相关性分析(2)
表1患者临床特点汇总表组别男∶女年龄病程对照组11∶23454±1167373±165CRSwNP组21∶64193±1384423±221t值--1658-0718P值1000a01050477注:aFisher确切概率法二、方法
1标本采集与处理
采集对照组下鼻甲或实验组鼻息肉组织1份,用生理盐水洗去血迹和分泌物后,把组织浸润于RNALater中并剪碎,4℃过夜,吸取RNALater后,-80℃保存,备qRTPCR。分别检测各组织中YAP、TEAD1、TSLP、IL33和Ki67的mRNA的表达。
2实时荧光定量PCR检测方法
组织在液氮中研磨后,采用Trizol试剂提取组织总RNA,以1 μg RNA为模板,逆转录合成cDNA,两步法逆转录反应: 42℃ 2 min去除基因组DNA; 37℃ 15 min,85℃ 5 s逆轉录。三步法实时荧光定量PCR反应:95℃ 5 min预变性;95℃ 15 s退火 ......
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