体外诱导小鼠心脏CD51+细胞分化为血管内皮细胞的研究(3)
基质胶4 ℃溶解并预冷96孔板、枪头,第二日冰上操作:96孔板每孔加入50 μl基质胶(过程避免气泡),置于温箱30 min,期间消化细胞并计数,调整浓度为2×106~3×106个/ml,随后每孔加50 μl细胞悬液(浓度为1×104~15×104个/ml),置CO2温箱中培养4~6 h,倒置显微镜下观察并拍照。四、统计学处理
采用SPSS 130进行数据分析。定量数据以±s表示,采用配对t检验进行统计分析。P<005为差异有统计学意义。
结果
一、小鼠心脏CD51+细胞的生长特性
在不含FBS的心脏干细胞培养基中,小鼠心脏CD51+细胞为大小不一的圆形,胞体折光性强,呈悬浮生长,并可见聚集成球现象。加入2% FBS后出现贴壁现象,细胞体积变大,形态变为扁平状长梭形,折光性逐渐减弱,并可见涡旋状生长,见图1。
二、小鼠心脏CD51+细胞诱导内皮分化后的细胞生长特性
诱导内皮分化后,小鼠心脏CD51+细胞形态逐渐变化,表现为胞体逐渐收缩变短,由长梭形变为短梭形或扁平多角形,并排列成铺路石样,细胞边界清楚,表现出典型的内皮细胞形态特点,见图2。
三、细胞诱导内皮分化后内皮相关基因的mRNA相对表达量增加
荧光定量PCR结果显示 ......
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