【摘要】 目的 建立穩定过表达IL-9的小鼠CT-26肿瘤细胞株及BALB/C小鼠皮下移植瘤模型，为后续研究IL-9在结肠癌肿瘤微环境中的作用及其机制提供实验基础。方法 将目的基因IL-9片段插入带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体GV492，构建重组过表达IL-9-GV492质粒，转染293T细胞后，用倒置荧光显微镜观察GFP的表达强度，用蛋白免疫印迹法检测IL-9的表达;包装病毒后检测病毒滴度。将过表达IL-9的慢病毒转染小鼠结肠癌CT-26细胞后，用倒置荧光显微镜观察GFP的表达强度，用流式细胞仪检测GFP及IL-9的表达，用qRT-PCR法检测IL-9的mRNA表达。过表达IL-9的CT-26细胞皮下接种BALB/C小鼠建立皮下移植瘤模型后，用免疫组化法检测肿瘤中IL-9的蛋白表达，用qRT-PCR法检测IL-9的mRNA表达。结果 阳性重组质粒PCR扩增产物大小约617 bp，DNA测序显示重组质粒的编码序列与目标序列完全一致 ...... 婵″倹鐏夐幃銊ユ躬娴ｈ法鏁ら幍瀣簚缁涘绁︾憴鍫熸閺冪姵纭堕弻銉ф箙閹存牔绗呮潪钘夊弿閺傚浄绱濋崣顖濆厴閺勵垵顫﹂幖婊呭偍瀵洘鎼告径杈╂埂閳ユ粏娴嗛惍浣测偓婵撶礉鐠囬鍋ｉ崙璇茬潌楠炴洘娓舵稉瀣煙閻ㄥ嫧鈧粎鏁搁懘鎴犲閳ユ繃鍨ㄩ垾婊冨斧缂冩垿銆夐垾婵婎問闂傤喓鈧拷


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