4. 实验分组及共培养的建立

    将实验分为4个组：空白对照组、标准株组、色素株组和白化株组。细胞传代2 ～ 3次，细胞状态稳定后将细胞浓度调整为6×105 /ml，转种到6孔板，每孔1.8 ml，加入PMA(100 ng/ml)，在含5% CO2、37℃培养箱中共孵育6 h待细胞完全贴壁后以细胞∶孢子=1∶10的比例每孔加入提前配置好的菌悬液200 μl，在含5% CO2、37℃培养箱中继续培养42 h[10]。

    5. 细胞和F. monophora观察

    F. monophora与细胞共培养42 h后于相差倒置显微镜下观察细胞和F. monophora的变化并拍照记录。

    6. 总RNA提取、逆转录及定量PCR

    总RNA提取按照试剂说明书进行。逆转录及定量PCR反应均依据试剂盒说明进行。反应条件为：95℃预变性1 min;95℃变性 5 s，60℃扩增15 s并采集荧光信号，45个循环。引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成，引物序列见表1。

    以上实验均重复3次，定量PCR结果由Bio-Rad CFX Connect PCR扩增仪收集 ......