分泌尿鸟苷素工程菌的构建及其对结肠上皮细胞cGMP合成的影响(1)
【摘要】目的构建能够分泌尿鸟苷素的婴儿双歧杆菌,观察其对结肠上皮细胞环磷酸鸟苷(cGMP)合成的影响,为用尿鸟苷素基因重组双歧杆菌治疗便秘做前期准备。方法以质粒pBV220为模板,构建表达质粒pBV220-ESS-uroguanylino重组质粒pBV 220-ESS-uroguanylin电击转化婴儿双歧杆菌。用ELISA检测重组婴儿双歧杆菌中尿鸟苷素的表达情况及其上调结肠癌细胞T84内cGMP合成的能力。结果pBV 220-ESS-uroguanylin阳性克隆提取质粒并进行基因测序,证实载体构建成功,测序正确无突变。ELISA检测证实重组婴儿双歧杆菌成功表达尿鸟苷素,具有上调结肠癌细胞T84内cGMP合成的能力。结论重组双歧杆菌构建成功并能分泌尿鸟苷素,提高结肠上皮细胞cGMP的合成。【关键词】尿鸟苷素;双歧杆菌;环磷酸鸟苷
尿鸟苷素是小肠黏膜细胞分泌的一种具有调节肠道水钠代谢作用的16肤[1]。尿鸟苷素作用于小肠黏膜上皮细胞鸟苷酸环化酶2C受体,使细胞内第二信使环磷酸鸟苷(cGMP)含量升高,进而激活蛋白激酶A,使囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)磷酸化 ......
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