6.心脏组织病理学观察

    各组大鼠下腔静脉取血后处死，取出心脏用生理盐水清洗干净，切取左心室缺血组织(假手术组在相应位置切取)约3 mm3×3 mm3×3 mm3浸泡于10%甲醛中固定，常规脱水、浸蜡、包埋和切片，剩余组织置于-80℃保存。进行苏木素-伊红(HE)染色：切片常规脱蜡至水，按照说明使用苏木素对切片染色30 s后用蒸馏水清洗，清水返蓝3 min，伊红染液浸泡45 s，95%乙醇脱水后二甲苯透明后中性树胶封固。进行马松染色：按照说明使用苏木素对切片染色30 s后用蒸馏水清洗，清水返蓝3 min，丽春红酸性品红浸泡3 min，随后1%磷钼酸分化2次，每次3 min，再用1%苯胺蓝复染5 min，最后1%冰醋酸溶液分化10 s，二甲苯透明后中性树胶封固。

    7.免疫组化法测毛细血管密度

    切片常规脱蜡至水，使用柠檬酸钠缓冲液进行高温抗原修复，3% H2O2阻断内源性过氧化氢，5%山羊血清封闭30 min ......