【摘要】 目的 克隆桩蛋白基因(PXN)的蛋白编码区并构建PXN基因真核表达载体，建立PXN稳转肝癌细胞株，分析PXN基因对肝癌细胞的作用。方法 Trizol法提取肝癌细胞总RNA并逆转录成cDNA，PCR法扩增PXN基因蛋白编码区并构建真核表达质粒pEBFP-PXN。脂质体法转染肝癌细胞Hep G2，G418筛选培养获得桩蛋白高表达稳转肝癌细胞株。实时无标记细胞分析检测细胞生长速率，细胞创伤-愈合实验分析细胞迁移速率。蛋白免疫印迹法检测细胞内蛋白表达变化。结果 成功克隆PXN基因并构建真核表达载体pEBFP-PXN。获得桩蛋白高表达单克隆稳转肝癌细胞株，胞内显示蓝色荧光，蛋白免疫印迹法显示稳转株内表达外源融合蛋白BFP-PXN。桩蛋白表达不影响Hep G2肝癌细胞的生长速率但可以抑制其细胞迁移，稳转细胞上皮标志蛋白E-Cadherin表达升高、间质标志物N-Cadherin和Vimentin表达下降。结论 PXN基因不影响Hep G2肝癌细胞生长增殖速率但可以抑制其细胞迁移，这可能与其可以影响肝癌细胞上皮-间质转化标志蛋白表达有关 ......