材料与方法

    一、材 料

    LO2人正常肝细胞系由中国科学院干细胞库提供。DMEM培养基、胎牛血清、0.25%胰酶和嘌呤霉素均购自美国Gibco公司;D-GalN购自Sigma公司;TNF-α购自R&D公司;RNA快速提取试剂盒购自奕杉生物;ReverTra Ace cDNA合成试剂盒购自TOYOBO公司;qRT-PCR SYBR Green Kit购自南京诺唯赞生物科技公司。β-actin单克隆抗体购自Sigma公司，PTTG1单克隆抗体购自Abcam公司，GRP 78 抗体购自ABclonal公司 ，CHOP、cleaved Caspase-3及WB二抗购自Cell Signaling Technology公司。免疫组织化學(免疫组化)二抗购于碧云天生物技术公司。PTTG1 shRNA慢病毒及阴性对照病毒由上海吉凯基因公司构建。

    二、方 法

    1. 细胞培养与处理

    用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养LO2肝细胞 ......