阿尼古力·沙比尔?甄雅惠?付玉霞?盛娟?阿依努尔·斯迪克?李瑞岐

    【摘要】目的 研究白蘆藜醇(RSV)对小鼠超排卵效果及胚胎发育的影响。方法 以2～3月龄的CD-1小鼠为研究对象，在超排卵同时腹腔注射RSV(RSV组)或二甲基亚砜(DMSO组)，观察RSV对小鼠超排卵子质量的影响。选取了小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)、卵巢和睾丸组织的模板DNA，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测沉默信息调节因子(SIRT1) mRNA在这三者中的表达情况。另外获取小鼠P1卵丘细胞，设置DMSO组、RSV(1 μmol/L)组和EX-527(SIRT1的抑制剂，10 μmol/L)组，使用荧光免疫染色检测各组SIRT的相对荧光强度、qRT-PCR检测各组的mtDNA相对表达量。结果 RSV组的卵裂率和囊胚率均高于DMSO组(P均 0.05)，见表1、图1。

    二、SIRT1 mRNA在生殖细胞组织内的表达情况

    RSV的作用基因为SIRT1，为了检测该基因对生殖细胞的作用，本研究以SIRT1在MEF中的表达量为对照，检测SIRT1在卵巢和睾丸组织内相对于MEF的表达情况。结果显示，SIRT1 mRNA在MEF、卵巢和睾丸组织中的相对表达量比较差异有统计学意义(F = 1303.958，P < 0.001)。其中，SIRT1 mRNA的相对表达量在卵巢是MEF的15 ～ 25倍(P < 0.001)，提示SIRT1在卵巢中可能有重要的生物学作用，见图2。

    三、添加RSV对体外培养小鼠卵丘细胞SIRT1表达及mtDNA相对表达量的影响

    为了观察RSV对卵丘细胞SIRT1表达的影响，本实验使用RSV处理P1代小鼠卵丘细胞48 h，

    通过免疫染色对比SIRT1在RSV组和DMSO组中的表达情况。结果显示，添加RSV后可提高SIRT1在卵丘细胞中的表达(t = -16.913， P < 0.001)，见图3A、B。进一步使用RSV和SIRT1抑制剂EX-527分别处理P1代小鼠卵丘细胞48 h，

    然后检测各组的mtDNA的相对表达量，结果显示3组mtDNA相对表达量比较差异有统计学意义(F = 114.416 ......