王林 易基群 江高峰

    【摘要】目的 探討外泌体长链非编码RNA H19(lncRNA H19)调控人肺腺癌细胞迁移和侵袭作用及机制。方法 收集确诊肺腺癌并经影像学诊断已发生远处转移患者(转移组)或无远处转移患者(非转移组)以及正常人群(正常对照组)各30例外周血标本，分离单核细胞获得血浆上清液分离外泌体，同时取培养人肺腺癌细胞系A549细胞时收集的培养上清液分离外泌体，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测并比较组间外泌体lncRNA H19 mRNA表达差异。并采用慢病毒介导的lncRNA H19特异性小干扰RNA(shRNA)构建稳定敲低lncRNA H19的人肺腺癌A549细胞模型，荧光素酶验证lncRNA H19通过吸附结合微RNA-7(miR-7)，划痕实验、Transwell实验检测稳定敲低lncRNA H19对A549细胞迁移、侵袭能力的影响，蛋白免疫印迹法检测稳定敲低lncRNA H19对miR-7及其下游的信号通路蛋白Kruppel样因子4(KLF4)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平的影响。结果 外泌体被成功分离。与非转移组肺腺癌患者相比，转移组肺腺癌患者外周血外泌体lncRNA H19 mRNA表达增加(P 0.05)。A549细胞中，稳定敲低lncRNA H19后KLF4和VEGF蛋白表达水平均有所下调(P均

    0.05). The expression levels of KLF4 and VEGF in the A549 cells were significantly down-regulated after stable lncRNA H19 knockdown (both P < 0.05). Conclusion Exosomes lncRNA H19 may play a role in the migration and invasion of lung adenocarcinoma cells ......