王艳玲 谭芳 游意莹 余小芳 黄菲

    脓毒性急性肾损伤(SAKI)是一种重症患者术后常见且严重影响预后的并发症，发生率高达50%，是导致患者发展为慢性肾病甚至死亡的关键原因。前期研究已报道SAKI 主要发生在肾小管上皮细胞，且细胞焦亡是SAKI 发生发展过程中的重要事件，通过抑制炎症反应和细胞死亡可明显减轻SAKI，然而其机制尚未完全阐明。

    研究表明，细菌等伤害性信号刺激使caspase-1活化，活化的caspase-1 一方面切割Gasdermin D诱导细胞膜穿孔和破裂引起细胞死亡。另一方面促进IL-1β 和IL-18 活化和释放，引起强烈的炎症反应，导致细胞焦亡，而过度的细胞焦亡会因细胞死亡和级联炎症反应而导致器官损伤和疾病的发生。原钙黏附蛋白7(PCDH7)是钙黏蛋白超家族的一组跨膜糖蛋白，广泛参与细胞识别、通信、运动等细胞活动，介导生长分化、炎症、免疫应答及肿瘤转移等复杂生物学过程。有研究显示PCDH 可通过干预炎症因子、趋化因子等的募集和浸润，控制级联炎症反应，参与疾病的防治。本研究拟评价脂多糖(LPS)刺激引起肾小管上皮细胞PCDH7 表达和细胞焦亡过程的变化。

    材料与方法

    一、材 料

    肾小管上皮细胞株(HK-2)购自美国ATCC 公司，SYBR Green RT-PCR 试剂盒购自日本TOYOBO，BCA 蛋白浓度测定试剂盒购自美国Thermo Scientific 公司， PCDH7、NLR 家族Pyrin 域蛋白3(NLRP3)、caspase-1 和IL-1β 抗体购自美国Santa Cruz 公司，MTT 试剂盒、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒、TNF-α 和IL-1β 含量测定试剂盒均购自广州杰特伟生物科技有限公司，原位末端转移酶标记技术(TUNEL)试剂盒购自美国 Roche 公司 ......