林湫泠 张定国 熊锋 姚君

    感染后肠易激综合征(PI-IBS)， 是肠易激综合征(IBS)的重要类型和研究热点[1]。PI-IBS 的发病机制目前尚不十分明确，报道表明肠道感染引起的黏膜炎症反应和免疫功能激活可能是PI-IBS发病的重要因素[2-4]。微RNA(miR)-142-3p 是一种在结直肠等多种组织器官中高表达的miRNA，对炎症反应具有重要的调控作用。我们对miR 测序数据进行分析时发现，表达差异显著的miR-142-3p 可能可以作为PI-IBS 的生物学标志物。前期临床实验表明，与正常人群的样品相比，PI-IBS患者样品中miR-142-3p 水平明显下调，提示miR-142-3p 与PI-IBS 发生发展有密切关系。本研究拟进一步在动物实验方面探讨miR-142-3p 在PI-IBS中的表达及意义，阐明miR-142-3p 调控PI-IBS 发生发展的分子机制，为PI-IBS 的临床治疗提供理论依据和治疗手段。

    材料与方法

    一、实验材料与试剂

    miR-142-3p、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll 样受体4(TLR4)引物(北京擎科生物科技有限公司)，HMGB1 小干扰RNA(siRNA)及阴性对照(广州艾基生物技术有限公司)，脂多糖(LPS)、胃蛋白酶(美国 Sigma 公司)，磷酸盐缓冲液(PBS)(上海碧云天生物技术有限公司)， 原代肠上皮细胞(武汉普诺赛生命科技有限公司)，TRIzol 试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司]，反转录试剂盒、实时荧光定量PCR 试剂盒(南京诺唯赞生物科技股份有限公司)，转染试剂(深圳市达科为生物技术股份有限公司)。

    二、 PI-IBS 大鼠模型建立

    1. 实验动物

    10 只SD 雄性大鼠由深圳市人民医院动物中心提供，鼠龄6～7 周，体质量23～26 g，所有大鼠饲养在恒温、恒湿的清洁级动物房，光线调整为12 h日/夜循环。采用旋毛虫感染建立PI-IBS 大鼠模型，采用旋毛虫造模过程如下：将旋毛虫保种大鼠乙醚麻醉后，颈椎脱臼处死 ......