α-2-巨球蛋白在人胚肺二倍体成纤维细胞衰老过程中的作用
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[摘要] 目的 了解α-2-巨球蛋白(A2M)对人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS细胞)衰老过程的影响。 方法 将正、反义真核表达载体，经脂质体(lipofectin)介导，转染年轻2BS细胞，分别获得正、反义转染细胞。经Southern及Northern印迹验证后，测定正、反义转染细胞的衰老相关指标，再用Western印迹法检测转染细胞中p16、p21的变化。 结果 转染的外源性A2M cDNA片段已完全整合到基因组中。与对照2BS/neo(空载体)细胞和正常细胞相比，正义A2M表达载体转染2BS细胞得到的稳定细胞(2BS/A2Ms细胞)生长更为迅速，S期和M期的比例略高于对照2BS/neo细胞和正常细胞组。衰老相关的β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率约为55.4%，而且细胞寿限较正常细胞和对照细胞组略有延长，但无统计学意义(P>0.05)。与之相反，反义A2M表达载体转染2BS细胞得到的稳定细胞(2BS/A2Ma细胞)较对照和正常细胞组生长更为缓慢，S期和M期的比例略低，SA-β-Gal染色阳性率约为72.3%，细胞形态扁平、增大，表现为衰老细胞的特征，细胞寿限略短于对照和正常细胞组，但也无统计学意义(P>0.05)。此外发现2BS/A2Ms细胞的生长速率、S期和M期的比例、细胞寿限均明显高于2BS/A2Ma细胞(P
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