人血管生成素相关蛋白2重组腺病毒体外转染对小鼠毛细血管内皮细胞分化的作用
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[摘要] 目的 研究血管生成素相关蛋白2重组腺病毒(Ad.ARP2)体外的转染效率、产物表达和其表达产物对血管内皮细胞分化的作用。 方法 体外培养扩增ICR小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞(CMECs)，通过免疫荧光染色评价人腺病毒转染CMECs的转染效率；应用Westernbl。t和ELISA方法检测ARP2在细胞的内表达和分泌，并分别与对照组(空病毒载体(Ad.Null)组和PBS组)比较。观察种植在Matrigel凝胶上分别转染Ad，ARP2和Ad Null的CMECs的生长状态。 结果 腺病毒转染倍数为200时，转染效率为93.5%，且对细胞生长无影响。Ad.ARP2转染CMECs后有ARP2蛋白表达，ELISA检测第1、2、3、5、8 d的ARP2分泌量分别为76.0±1.7、490.1±9.5、389.6±2.5、240.1±1.1、73.4±1.3 pg/ml，而对照组未检测到有ARP2蛋白表达和分泌。含有ARP2的培养上清能促进血管内皮细胞分化。 结论 腺病毒可以安全、有效地转染CMECs，其携带ARP2基因可获得高水平表达，并能促进血管内皮细胞分化。
[关键词] 血管生成诱导剂； 腺病毒，人； 内皮，血管； 转染
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