Cx43对针灸治疗原发性痛经大鼠效应的影响(3)
(3)血浆PGE2、PGF2α含量测定
末次给予催产素1 h后,麻醉下,腹主动脉采血3 mL, 迅速注入含有10%EDTA-Na2(含0.7%NaCl)的塑料指形管中混匀,立即低温离心(3000 r/min) 15 min, 取上清, 置-70 ℃低温冰箱待测。
PGE2的检测:用放射免疫法检测PGE2,由同济医院核医学科完成。
PGF2α的检测:包被、封板后每孔加入0.3%的明胶封闭液,用PBS-Tween-20洗酶标板3次后,分别在空白孔、样本孔和标准孔,加入PBS、待测上清样本和不同浓度的标准液100 μL。每孔加入稀释的一抗100 μL,保温,用PBS-Tween-20洗板5次。加羊抗兔IgG-HRP 200 μL,再加入3 mol/L H2SO4 50 μL终止反应。阳性对照孔出现颜色反应后,测量吸光度(OD490)值。以标准孔的浓度为横坐标,相应的OD值/空白孔的OD(OD0)值为纵坐标,在半对数纸上做标准曲线,以样品孔OD/OD0从标准曲线上计算其PGF2α浓度(pg/mL) ......
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