MnSOD基因转染对SGC79001胃癌细胞增殖的影响
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[摘要] 目的 观察改变胞内Mlg)D基因表达水平对SCC7901胃癌细胞增殖的影响。方法 采用电穿孔方法将反义和正义MnSOD cDNA真核表达载体pHβA-SOD(-)/pHβA—SCD(+)转染SC0901胃癌细胞,400mg/Lg418筛选稳定表达克隆并用RT—PCR及Western杂交法鉴定后扩大培养。用pHβA空质粒转染作为对照。放射免疫法检测正义、反义及空载SC0901胃癌细胞株内的铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD,SOD1)蛋白含量。分别用直接细胞计数法、四唑蓝(MTT)比色法、平皿克隆形成率试验及裸鼠移植瘤模型测定3组细胞在体外、体内的增殖活性。结果 与空载组(Vectors7901)相比,转染正义质粒的MnS(31)-7901胃癌细胞呈现抑增殖效应:(1)生长曲线示增殖速度减慢;(2)在平皿上的集落形成能力下降;(3)在裸鼠体内的成瘤性明显受抑制。转染反义质粒的MnSOD-AS7901胃癌细胞则出现促增殖效应:(1)生长曲线示增殖速度加快;(2)在平皿上的集落形成率上升;(3)裸鼠移植瘤生长加速。结论 通过基因转染提高胞内MnSC)D的表达可抑制胃癌细胞的增殖,MnSOD可能是胃癌基因治疗的一个新靶点。[关键词] 胃癌; 增殖; 基因转染; 超氧化物歧化酶[中国图书馆分类法分类号l R735.2
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