大鼠胰岛分离纯化技术的改进

http://www.100md.com 2006年4月1日 李永翔 李 戈 董维平 陈 静 卢大儒 谭建明

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     [摘要] 目的 探索成年大鼠胰岛的分离纯化理想方法，并对获得的胰岛进行体外功能鉴定。方法 通过用胶原酶P液灌注分离成年SD大鼠胰岛，不连续密度梯度离心法纯化胰岛，STZ染色鉴定胰岛，AO/PI染色鉴定胰岛活率，胰岛素释放试验判定胰岛功能，光镜观察体外培养胰岛的形态学变化。结果 纯化后每只大鼠胰岛收获量为(629±102)IEQ，胰岛纯度>90%，胰岛细胞活率>90%，胰岛细胞体外培养液中胰岛素含量在低糖和高糖刺激下的浓度分别为(3.701 5±0.492 0)mlU/L和(10.477 1±2.233 4)mlU/L，刺激指数为2.837 8±0.102 3，体外培养48h几乎完全贴壁，培养3周生长状况仍良好。结论 分离条件把握好后，胶原酶P消化、Fi—c011400非连续密度梯度离心法可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。

    [关键词] 胰岛； 分离； 纯化

    [中图分类号] R 617；R 699

    [文献标识码) B

    http://www.100md.com/html/paper/0257-8131/2006/02/32.htm

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