多因素复合建立脾气虚证大鼠模型及以方测证研究
摘要 目的:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法多因素复合建立一种新的脾气虚证大鼠模型。方法:动物随机分为对照组、模型组及中药组,以多因素复合法对模型组及中药组大鼠进行造模,21天后处理部分大鼠,检测指标。其余大鼠继续实验,以黄芪建中汤灌服中药组,生理盐水灌服对照组及模型组,21天后处理大鼠,检测指标。结果:造模大鼠血清木糖浓度、血清肌酸磷酸激酶活性、血清胃泌素水平下降,胃窦G细胞数减少,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:多因素复合复制的脾气虚证大鼠模型稳定性良好,克服了单因素造模持续时间短、自愈性强的缺点,经得起药物反证,是一种可行而稳定的脾气虚证造模方法。关键词 多因素 脾气虚证 大鼠模型 以方测证
脾气虚证的造模方法虽多,但较多存在稳定性、重复性差等不足。本实验尝试采用大黄法、游泳力竭法、饥饿法多因素复合的方法制作脾气虚证大鼠模型,并以健脾中药反证,以期找寻一种稳定、可靠的脾气虚造模方法。
1 材料与方法
1.1 动物与分组:清洁级Wistar大鼠48只,由浙江中医药大学实验动物中心提供,雌雄各半,体重180±20g。动物随机分为对照组、模型组、中药组,各组16只。
1.2 药物与试剂:大黄制剂液:将生大黄饮片碎成粉,用蒸馏水浸泡,置于50℃水浴6h,去渣取汁。黄芪建中汤(黄芪、桂枝、生姜各9g,炙甘草6g,白芍18g,大枣12g,饴糖30g)水煎剂:常规煎煮,浓缩为含生药6kg/L。D—木糖试剂盒,南京建成生物工程研究所;胃泌素放免试剂盒,北京北方生物技术研究所;兔抗大鼠胃泌素抗,北京北方生物技术研究所;酶标记HRP二抗,美国DAKO公司;二氨基联苯胺(DAB),北京中山生物技术公司。
1.3 主要仪器:SN-695型智能放免γ测量仪、LX-20型Beckman全自动生化分析仪、722型光栅分光光度计、石蜡包埋机、Leitz1512型组织切片机、OLYMPUS双目显微镜、LEICADMLB偏光摄像显微镜 ......
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