葛根素对实验性脑出血大鼠偏瘫状态和脑组织病理形态的影响
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关键词 葛根素 脑出血 偏瘫 病理形态 大鼠
脑出血是临床中老年常见的重症脑病。除手术治疗和保守治疗外，目前尚无特效的治疗方法。由于其常见性、高死亡率和高致残率，严重威胁人类的生命和健康，故对其发病机制、病理变化和治疗的研究成为当前热点。近年来有关于葛根素治疗脑出血并取得良好效果的报道不少，但其确切机制尚不清楚。本实验旨在通过动物实验验证其疗效，并初步探讨其作用机制，为其在脑出血的临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料：葛根素片，葛根黄豆苷元片，广州侨光制药有限公司生产，批准文号：H44020958，加水配成9.17g/L混悬液。脑血康片，通化东宝永健制药厂生产，批准文号(93)卫药准字Z-04号，生产批号021003，加水配成8.2g/L混悬液。Ⅶ型胶原酶由美国sigma公司提供。实验仪器包括江湾I型C立体定向仪，DE-200台式牙钻车，5ul微量进样器。
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1.2 动物模型复制：清洁级雄性SD大鼠，重量350～400g，由中科院上海实验动物中心提供。参照Rosenberg造模方法，大鼠用体积分数为10%的水合氯醛麻醉后，固定于脑立体定向仪上，头顶剪毛，常规消毒，矢状切开头正中额顶部皮肤，暴露颅骨，以前因为中心，向后0.2mm向右旁开2.9mm用牙科钻在颅骨表面钻孔，用固定在立体定向仪上的微量注射器沿钻孔进针垂直插入脑组织，深约6mm，缓慢注入含1u/ul胶原酶的生理盐水1.2ul，留针8min缓慢出针，用牙科水泥封闭颅骨上的钻孔，缝合切口。
1.3 分组与给药：随机将动物分为4组。假手术对照组仅钻开颅骨不注入药物，造模后自来水灌胃；模型组造模后自来水灌胃；脑血康组造模后脑血康混悬液灌胃；葛根素组造模后葛根素混悬液灌胃。均每天2次，每次3ml。以上各组，均于造模前半小时灌胃1次，造模后连续给水、给药4天，第5天断头处死取脑，取脑前12小时禁食，自由饮水。
1.4 观察指标：观察指标如下。
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1.4.1 神经症状：参照Bederson等的标准制定：Ⅰ级，无明显障碍；Ⅱ级，提起鼠尾使鼠头下垂位，患侧前肢回收屈曲于胸前，正常侧的前肢伸展；Ⅲ级，追尾；Ⅳ级，追尾且偏瘫侧腿长拖，眼眵多，睑模糊；Ⅴ级，站立不稳，倒向健侧不能自起。
1.4.2 组织形态改变：动物断头处死后，立即取出全脑弃嗅脑和小脑，用10%甲醛溶液固定，脱水、石蜡包埋、切片、HE染色，光镜下进行组织学观察、照相。
1.5 统计学方法：等级资料比较用Ridit分析。率的检验用X2检验。所有数据均采用SPSS10.0统计软件包。
2 实验结果
2.1 葛根素对脑出血大鼠偏瘫状态的影响：假手术组症状极轻，模型组的偏瘫程度明显重于用药组，脑血康组与葛根素组相比RIDIT偏高，表明葛根素抗脑出血效果更好，此处以造模后2天脑出血大鼠的神经症状为根据。结果见表1。卡方检验，P<0.01。结合RIDIT值，可见神经症状以模型组最高，脑血康组次之，葛根素组较轻，假手术组最低。
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2.2 葛根素对脑出血大鼠脑组织病理形态的影响：各组大鼠取全脑弃嗅脑和小脑，置10%福尔马林液中，固定，取常规石蜡切片，HE染色，切片光镜检查、照相。组织病理结果显示：①模型组各标本均有大片出血坏死灶，病灶边缘血管扩张，神经细胞肿大、疏松，空泡样变性。②脑血康组组织学改变均较模型组轻，病灶周围有较多的胶质细胞增生；③葛根素组病灶较小，细胞变性坏死程度轻，病灶周围胶质细胞增生活跃。见后附图。
3 分析与讨论
传统中医理论认为：“离经之血便是瘀”。清·唐容川《血证论》指出：“凡系离经之血与周身之血已睽绝而不合”，又说“此血在身不能加于好血，而反阻新血生化之机，故凡血证总以去瘀为要”。现代检验手段也发现脑出血患者的血浆粘稠度、红细胞电泳时间、纤维蛋白原等指标明显增加，从而证实脑出血有“瘀血”的病理改变存在。同时，脑出血后脑水肿和血肿的直接压迫以及血肿中血管活性物质的作用使血肿周围脑组织产生了持续性的脑缺血，即所谓的缺血半暗带概念，现代医学提出抢救缺血半暗带是改善脑出血患者预后的关键。因此，及早使用活血化瘀药，促进血肿吸收，改善神经组织缺血缺氧状态，挽救缺血半暗带神经细胞功能就显得至关重要。
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葛根为豆科植物葛的块根。《神农本草经》及《本草纲目》有用葛根治疗消渴，身热和诸痹等症的记载，《伤寒论》太阳病或太阳阳明合病应用葛根治疗项背拘急不舒、目痛及口渴等症。葛根素是葛根中提取的一种成分，主要为异黄酮。现代药理研究证实葛根素有降低血浆内皮素，扩张脑血管，降低外周血管阻力，抑制血小板和红细胞的聚集，改善微循环的作用。临床上常用于缺血性心脑血管性疾病。侯群等将葛根素应用于急性脑出血，发现葛根素能明显促进血肿的吸收和改善脑出血患者的神经功能。本实验通过对脑出血大鼠神经功能缺损程度的统计分析，发现葛根素组的神经功能损伤明显低于模型组。而组织病理学检查结果显示模型组标本有大片的出血坏死灶，病灶周围神经细胞肿大、疏松，空泡样变性；而葛根素组病灶较小，细胞变性坏死程度轻，病灶周围胶质细胞增生活跃。因此，葛根素对脑出血后的神经功能损伤有明显的改善作用。, 百拇医药(殷利春 黄晓明 杜杭根等)