四物汤对乙酰苯肼致溶血性贫血模型大鼠的治疗作用
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摘要 目的:考察四物汤对溶血性贫血模型大鼠的治疗作用。方法:用乙酰苯肼诱导动物模型,四物汤治疗后观察一般表现,检测肝脏、脾脏重量和外周血红白细胞计数、血红蛋白含量、网织红细胞计数。结果:模型大鼠表现萎靡,肝脾肿大,红细胞数、血红蛋白量明显减少,白细胞、网织红细胞数上升;四物汤治疗后大鼠一般表现好转,肝脾缩小,外周血象明显好转。结论:四物汤可以明显改善溶血性贫血模型大鼠外周血象,促进骨髓造血。
关键词 四物汤 溶血性贫血 乙酰苯肼 大鼠
西医的贫血和中医的血虚异曲同工,虽然概念不同,但性质相同,临床主要表现为血液不足,功能低下的一种病理状态。贫血种类多,其中溶血性贫血是由于红细胞破坏增速超过了造血补偿能力时所发生的一种贫血,各种中毒为其常见原因。随着工农业的飞速发展,人们接触化学物质的机会日趋增多,各种毒物对人类影响越来越受到人们的重视。毒物中毒成为溶血性贫血的一种常见原因。四物汤是治疗中医血虚证的传统名方,临床上广泛应用于多种血虚证和多种贫血。本实验用化学毒物乙酰苯肼诱导溶血性贫血动物模型,观察四物汤治疗作用,为临床中西医结合治疗溶血性贫血提供一定的实验依据。
1 材料
1.1 主要试剂与仪器:乙酰苯肼(APH)购自国药集团化学试剂有限公司,生产批号:F20050927。拜尔2120血常规分析仪。
1.2 中药:四物汤按《太平惠民和剂局方》的剂量取熟地黄15g,当归、白芍各10g,川芎6g。购自杭州胡庆余堂大药房。
1.3 实验动物:6~8周龄Wistar大鼠,体重160~200g,雌性,由浙江中医药大学实验动物研究中心提供。
2 方法
2.1 中药制备:按《中华人民共和国药典》附录中方法制成四物汤水煎液,每毫升含原生药1g,分装后4℃冰箱保存备用。大鼠四物汤的剂量参考人民卫生出版社2002年出版,徐叔云主编的《药理实验方法学》中的等效剂量。
2.2 动物模型制备[1-2]:24只Wistar大鼠随机分成3组,每组8只。模型组大鼠在第1、第4、第7天皮下注射2%乙酰苯肼生理盐水注射液,第1天10ml/kg体重,第4、第7天剂量减半,第4天起生理盐水灌胃。治疗组大鼠按前造模,并于第4天起每天按生药8g/kg体重四物汤灌胃,共7天。正常组用等剂量生理盐水皮下注射、灌胃。观察一般情况,实验结束称大鼠体重,断头处死后称取肝脏、脾脏湿重。
2.3 外周血象指标检测:实验第11天结束,眼眶取血,送本院医学检验室检测完成。选择主要指标:RBC、HGB、RCT、WBC。
2.4 数据处理、统计描述、统计推断:计量资料用均数±标准差(x±s)表示,采用成组t检验。用SPSS10.0软件分析。均以P<0.05为差异显著的标准。
3 结果
3.1 对大鼠一般情况的观察结果:正常组大鼠神气矫健,行动敏捷,眼睛明亮,呈鲜粉红色,鼻唇洁净潮润呈淡粉红色,尾圆色粉红,背腰平直,被毛光泽而密,大便黄软。贫血模型大鼠均表现精神萎靡,神疲乏力,易惊,行动迟缓,团缩弓腰,口唇、眼睑、耳廓苍白,易脱毛,毛蓬竖少光泽;饮水多,进食减少,大便干黑而少。经四物汤治疗后,外观状态迅速恢复并接近正常组。
3.2 体重、肝脏和脾脏湿重:与正常组比较,贫血组大鼠体重明显减轻;肝脏、脾脏湿重明显升高。正常大鼠肝脏外观柔嫩,颜色鲜红;贫血组大鼠肝脾外观明显肿大、颜色暗黑。四物汤治疗组大鼠体重有明显的恢复,肝脾较小,色泽暗红。差异显著,见表1。
3.3 外周血象检测结果:与正常组比较,贫血组大鼠红细胞数和血红蛋白量明显降低,白细胞、网织红细胞计数明显升高。四物汤治疗组大鼠红细胞、血红蛋白、网织红细胞数较明显上升;白细胞数降低。差异显著,见表2。
4 讨论
在中医证型研究中,APH诱导血虚模型在血虚动物模型的制作中具有代表性,相关研究多且已成熟[1]。APH是一种强氧化剂,可干扰红细胞内多种酶的活性,使机体出现溶血性贫血:红细胞和血红蛋白明显减少,网织红细胞代偿性增多,肝脾肿大。溶血性贫血多由遗传﹑免疫代谢﹑感染﹑物理化学因素和机械因素等造成。临床主要分为先天缺陷所致的溶血性贫血和后天获得性溶血性贫血,以贫血、黄疸、脾大等为主要表现。实验观察到注射APH后次日,大鼠即表现精神萎靡,神疲乏力,易惊,行动迟缓,团缩弓腰,口唇、眼睑、耳廓苍白,易脱毛,毛蓬竖少光泽;饮水多,进食减少,大便干黑而少等贫血症状。四物汤被誉为治疗血证之通剂,临床上广被应用。方中白芍、熟地、川芎、当归,四物相配,补而不滞,平调阴阳,补血养血。现代研究已从外周血、骨髓等多方面对四物汤补血功能进行了探讨,显示四物汤通过多成分、多环节改善血虚患者的造血功能;调节血清和骨髓蛋白质的表达等[3-4]。实验观察到四物汤治疗后,动物一般情况明显好转,外周血红细胞数、血红蛋白量明显回升,网织红细胞计数明显升高,骨髓造血加快。为四物汤临床施治溶血性贫血提供了实验依据。实验还发现,该药对肝脾肿大的恢复作用较明显,从另一个侧面反映出四物汤补肝血、护肝的重要作用。
5 参考文献
[1]杨岚,祝彼得,彭成 ......
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