伍旭明 许亚萍

    浙江省中医院 浙江 杭州 310006

    夏枯草对胆管癌细胞增殖及凋亡的作用*

    伍旭明 许亚萍#

    浙江省中医院 浙江 杭州 310006

    夏枯草 人胆管癌细胞 增殖 凋亡

    胆管癌是一种起源于胆道上皮的少见的恶性肿瘤，手术仍是目前主要的治疗手段，但手术后生存率较低[1]。有研究表明夏枯草对多种肿瘤具有抑制作用，但是目前夏枯草对胆管癌的研究较少。因此本研究主要探讨夏枯草对胆管癌QBC939和RBE细胞的作用，为临床中医辅助治疗胆管癌提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 试剂:夏枯草购于福建中医药大学国医堂医院。小牛血清、低糖DMEM培养基、胰蛋白酶等试剂均购自GIBICO公司；MTT、Hoechest33258、DMSO，内参购自sigma公司。Trizol为Invit rogen公司产品；逆转录试剂盒、dNTP、Taq DNA聚合酶为promega公司产品。由上海生工生物工程有限公司合成引物。

    1.2 细胞培养:人QBC939、RBE胆管癌细胞购自上海中科院细胞库,将细胞培养于含10%的胎牛血清,1×105IU/L青霉素及125mg/L链霉素，低糖DMEM培养基中，在37℃、5%CO2条件下进行培养，取生长至对数生长期的细胞用于实验。

    1.3 实验方法:分述如下。

    1.3.1 药品的制备:对药材以水煎法提取2h，加入75%的乙醇进行溶解，获得夏枯草的粗提物，取夏枯草粗提物适量，精密称定，溶解于DMSO中。经高压灭菌后，于-20℃冰箱中保存。实验时母液用DMEM培养基进行稀释，获得所需要的干预浓度。DMSO最终浓度控制在1%以下。

    1.3.2 MTT比色实验:取对数生长期细胞(1×105)，用胰酶(EDTA)进行消化 ......