王青华 朱敏丰

    浙江省湖州市中医院 浙江 湖州 313000

    实验研究

    补肾抗癌方配方颗粒对HeLa细胞增殖与细胞凋亡的影响及其机制的初步研究

    王青华 朱敏丰

    浙江省湖州市中医院 浙江 湖州 313000

    目的：考察自拟补肾抗癌方配方颗粒对宫颈癌细胞HeLa细胞增殖及细胞凋亡的影响，并对其机制进行初步探讨。方法：MTT法检测不同浓度自拟补肾抗癌方配方颗粒分别在24、48、72小时对HeLa细胞的抑制作用，流式细胞术检测补肾抗癌方配方颗粒对细胞周期的影响，Western Blot法检测Caspase-3蛋白的表达。通过进一步检测HeLa细胞内源性活性氧及氧化还原实验，考察补肾抗癌方配方颗粒对HeLa细胞内源性活性氧(ROS)分泌、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性，还原型谷胱甘肽(GSH)的含量影响。结果：自拟补肾抗癌方配方颗粒对HeLa细胞的生长具有抑制作用；能够诱导细胞周期发生变化，将细胞阻滞在G0期，抑制细胞增殖；能够剂量依赖性地激活Caspase-3蛋白，调节细胞凋亡；另外，还能够通过增加细胞内抗氧化酶(剂)SOD和GSH的活性，降低CAT的活性，来增加细胞内ROS的自分泌，调节氧化还原状态。结论：自拟补肾抗癌方配方颗粒对宫颈癌HeLa细胞增殖有一定的抑制作用，对其凋亡有一定的诱导作用，这种作用可能与其改变细胞内部的氧化还原状态有关。

    补肾抗癌方 细胞增殖 细胞凋亡 Caspase-3 氧化还原 实验研究

    自拟补肾抗癌方配方颗粒由知母、生地黄、黄柏、墨旱莲、重楼、泽泻、白花蛇舌草组成，本文旨在通过体外细胞实验的方法，初步观察自拟补肾抗癌方配方颗粒对人宫颈癌HeLa细胞的增殖及凋亡的作用，并初步探讨其可能机制，以期为药品研究开发和临床治疗应用提供实验依据及理论基础。

    1 材料和方法

    1.1 材料和试剂：分述如下。

    1.1.1 试验药物：补肾抗癌方配方颗粒：知母(批号1511002S)5g，生地黄(批号1511001W)5g，黄柏(批号1511001S)3g，墨旱莲(批号1511001W)10g，重楼(批号1511001W)7.5g，泽泻(批号1511002W)5g，白花蛇舌草(批号1511001S)15g。全部药物均由华润三九医药股份有限公司生产。给药前，将一剂补肾抗癌方配方颗粒加入50.5ml磷酸缓冲盐溶液(PBS)(pH=7.0)溶解，通过0.22μm的微孔滤膜，配制成1g/ml的母液备用。

    1.1.2 试剂：RPMI-1640培养基(Gibco公司 ......