金华倩 丁文倩 储利胜 李琳

    浙江中医药大学浙江杭州310053

    神经干细胞(NSCs)是一类位于中枢神经系统，具有自我更新和多项分化潜能的细胞。成体神经干细胞主要在侧脑室下区(SVZ)和海马齿状回颗粒下区(SGZ)。缺血性脑损伤诱导内源性神经干细胞增殖、迁移和分化。增强内源性神经发生或神经干细胞移植可以促进脑损伤后神经修复和功能恢复[1]。黄芪是常用的补气中药，能促进脑损伤后神经系统修复再生[2]。黄芪总皂苷(TSA)是中药黄芪的主要有效成分之一，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、扩张血管等作用[3-4]。本实验研究TSA对体外培养神经干细胞的增殖作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：孕13～14天SD(Sprague-Dawley)大鼠，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物质量合格证号：SCXK(沪)2013-0016。

    1.2 药品：黄芪总皂苷，200mg(UV≥98%)，购于上海源叶生物科技有限公司，批号：J20F7T9819。

    1.3 主要试剂与仪器：DMEM/F12培养基、0.25%胰酶、青-链霉素溶液、PBS、Hanks缓冲液(杭州吉诺生物技术有限公司)，胎牛血清(美国Gemini公司)，EGF、B27(美国Gibco公司)，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(美国PeproTech公司)，细胞消化液Accutase、MTT、BrdU粉末、BrdU小鼠单克隆抗体(美国Sigma公司)，多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)、FITC标记山羊抗小鼠二抗、DAPI(北京中杉金桥生物技术有限公司)，Cy3标记山羊抗小鼠二抗(杭州达文生物有限公司)，nestin小鼠单克隆抗体(美国Santa Cruz公司)。超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)，CO2培养箱(日本SANYO公司)，酶标仪(美国Bio-Tek公司)，倒置荧光显微镜(德国Leica公司)。

    1.4 神经干细胞培养和传代：取孕13～14天的SD大鼠 ......