翁思颖 王 磊 柴可夫#

    1 浙江省宁波市中医院 浙江 宁波 315010 2 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

    糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见的慢性微血管并发症，由此导致的终末期肾病已成为糖尿病患者死亡主因。研究发现糖尿病血管病变存在“代谢记忆”效应[1]。若前期血糖控制不佳，即使后期血糖控制良好，血管病变发生率仍高于长期血糖控制良好者[2]。而沉默信息调节因子1(Sirt1)可通过对腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的调节，降低还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶水平、减少活性氧(ROS)积累、减轻高糖引起的氧化应激反应、减少肾损伤[3]。益气养阴活血汤是本团队基于对DN“气阴不足、阴虚耗津、炼津成瘀”的病机所形成的经验方。团队前期研究发现由该方所制的糖肾颗粒可改善DN大鼠肾脏内皮细胞功能、降低糖基化终末产物及其受体的表达[4-5]。故本研究拟通过建立人肾小管上皮细胞(HK-2)短暂高糖肾损伤模型，从Sirt1/AMPK通路途径探讨益气养阴活血汤缓解短暂高糖“代谢记忆”效应导致肾损伤的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料：人肾小管上皮HK-2细胞株购于中国科学院典藏细胞库。低糖DMEM/F-12培养液(CORNING)、胎牛血清(Gibco)、青霉素/链霉素溶液(Gibco)、50%葡萄糖注射液(中南科伦)；小鼠单克隆抗SIRT1抗体(abcam)、兔单克隆抗AMPK-α2/phospho S491抗体(abcam) ......