张家敏 张 骋 王 鹏 王建英 王楠楠 朱婉萍#

    1 浙江省金华市人民医院 浙江 金华 321000

    2 浙江大学医学院附属第一医院 浙江 杭州 310003

    3 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

    白藤梨根来源于猕猴桃科猕猴桃属植物毛花猕猴桃(Actinidia erianthaBenth)的干燥根[1]，具有清热、利湿、活血、消肿、解毒等功效，为浙江民间习用药材。白藤梨根是畲族民间常用的药材，被广泛用于抗肿瘤的治疗。现代临床疗效及基础研究结果表明白藤梨根具有显著的抗肿瘤、免疫调节等作用[2-3]。本次以白藤梨根为研究对象，初步探讨白藤梨根提取物体内外抗肿瘤作用，为临床应用和新药开发提供实验依据。

    1 材料

    1.1 动物：SPF级BALB/c-nu裸鼠40只，雄性，体重20±2g，购于浙江省实验动物中心，许可证号：SCXK(浙)2014-0001，由浙江省中医药研究院实验动物中心饲养。

    1.2 细胞株：人肺癌A549细胞株均购于中科院细胞库，由浙江省中医药研究院实验室液氮保存。

    1.3 药物：白藤梨根采自浙江省武义县，经金华职业技术学院中药学专业吴远文副教授鉴定为猕猴桃科猕猴桃属毛花猕猴桃(Actinidia erianthaBenth)的干燥根；RPMI-1640培养液(批号：16011505)、0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA，批号：2016062902)、PBS(批号：2016061304)均购于吉诺生物医药技术有限公司；胎牛血清(批号：20160323)购于浙江天杭生物科技股份有限公司；注射用环磷酰胺(Baxter，批号：6F124A)，Bcl-2抗体(三鹰，批号：60178-1-Ig)，Bax抗体(三鹰，批号：50599-2-Ig)，HRP标记山羊抗兔二抗(Servicebio，批号：G23303)，组化试剂盒DAB显色剂(Servicebio，批号：G1211)。

    1.4 仪器：Buchi R-210型旋转蒸发仪(瑞士BUCHI实验室仪器公司)；Centrifuge 5810R低温离心机(Eppendorf公司)；3111型 CO2培养箱(Thermo公司)；CK40-F200型倒置显微镜(日本OLYMPUS公司)；xCELLigence RTCA DP多功能实时无标记细胞分析仪[艾森生物(杭州)有限公司]；TC-20细胞计数仪(Bio-Rad公司) ......