王振宇 钱 祥 张爱琴

    1 浙江省杭州市丁桥医院 浙江 杭州 310021

    2 浙江省肿瘤医院 浙江 杭州 310022

    “肺与大肠相表里”是中医学的经典理论，笔者基于此，通过实验研究清肺合剂对肺癌小鼠疗效及肠道菌群多样性。报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 动物与药品：C57BL/6小鼠，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物生产许可证号：SCXK(沪)2017-0005。饲养条件：恒温，温度22±2℃，湿度50%～60%，光照每12小时明暗交替，换风次数15～20次/小时。实验饲养室许可证号SYXK(浙)2018-0012。清肺合剂(浙贝母、防己各41.1g，白花蛇舌草、龙葵、半枝莲、白茅根各109.6g，重楼35.6g，仙鹤草、夏枯草各54.8g，天龙3条。浙江省肿瘤医院采购)。

    1.2 建模与分组：小鼠LEWIS肺癌细胞置于含10%胎牛血清及高糖DMEM的完全培养基中，置于37℃、5%CO2培养箱中培养，1～2天更换培养液1次，每3天用0.25%胰酶传代1次。细胞汇合率达90%时收集细胞，离心去上清液加PBS吹打使细胞悬浮于PBS中，台盼蓝染色细胞活力测定大于95%，并进行细胞计数，调整细胞浓度为4×107/ml的细胞悬液备用，每只小鼠尾静脉注射0.2ml细胞量。将小鼠尾巴上毛剃干净，将混有Matrigel的细胞悬液用2ml针管在室温下放置2min后注射入尾静脉，获得肺癌小鼠组模型。将共计48只小鼠(肺癌小鼠32只，常态小鼠16只)分为对照组(常态小鼠)、模型组及清肺合剂组各16只。A：对照组：0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)灌胃；B：模型组：0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)灌胃；C：清肺合剂组：0.5%羧甲基纤维素钠+清肺合剂灌胃。

    1.3 测量及活体成像：肿瘤体积用游标卡尺测量长径和短径 ......