叶茂高

    浙江省温州市中西医结合医院 浙江 温州 325000

    高尿酸血症是一种因嘌呤代谢紊乱而使尿酸产生增多或尿酸排泄减少所致的代谢性疾病。高尿酸血症不仅会发展成痛风[1]，从而侵犯关节发生关节炎症和变形，并且会损害肾脏及心血管等。高尿酸血症还与糖尿病、高血压病、冠状动脉粥样硬化性心脏病、动脉粥样硬化、脑卒中等疾病的发生具有密切联系。虎杖具有清热解毒，散瘀止痛，利湿退黄等功效。临床发现其具有明显的降尿酸作用。已知尿酸主要经肾脏及肠道排泄，肾小管中的尿酸转运蛋白在排泄尿酸过程中起主要作用。目前已经发现多种尿酸转运蛋白，本实验选择其中的几个主要转运蛋白作为测定指标，以探讨虎杖的降尿酸作用机理。

    1 材料

    1.1 实验动物：清洁级健康雄性SD大鼠60只，体质量200±20g，由浙江中医药大学实验动物中心提供。动物生产许可证号：scxk(沪)2008-0016。

    1.2 实验药物：虎杖由浙江省中医药大学门诊部制剂室提供；苯溴马隆片(昆山龙灯瑞迪制药有限公司)；腺嘌呤(美国Amresco公司)；氧嗪酸钾(苏州全辉生物科技有限公司)。

    1.3 试剂：尿酸测定试剂盒、肌酐测试盒、尿素氮测试盒由德赛诊断系统(上海)有限公司提供；引物(上海生工生物工程股份有限公司)；Trizol(Invitrogen)；DEPC处理水(基尔顿生物科技有限公司)；SYBR Green PCR试剂盒(Thermo)；逆转录试剂盒(Fermentas)；异丙醇、无水乙醇氯仿(国药集团药业股份有限公司)。

    1.4 主要仪器设备：低温高速离心机(北京东南仪诚实验室设备有限公司)；100℃金属浴箱(河南郑州南北仪器设备有限公司)；Real-time检测仪(ABI公司，型号ABI-7300)；低温冷冻离心机(上海卢湘仪离心机仪器有限公司，型号TG-16M)；旋涡振荡器(青浦泸西仪器厂，型号K30)；电动匀浆机(FLUKO，型号PRO200)。

    2 方法与结果

    2.1 实验动物分组：SD大鼠60只以10只为1组随机分为6组：空白组、模型组、西药组和虎杖低剂量组、中剂量组、高剂量组。

    2.2 模型建立与药物干预：各组自由供给水与普通大鼠饲料，适应性喂养1周后，除空白组外，其余每组每日上午参照目前较为成功的高尿酸血症造模方法，予以腹腔注射氧嗪酸钾联合腺嘌呤灌胃建立高尿酸血症大鼠模型[2]。氧嗪酸钾的剂量为200mg/kg ......