陆周翔 陶 松

    浙江中医药大学附属湖州中医院 浙江 湖州 313000

    本研究旨在构建肾阳虚类风湿关节炎(RA)骨质疏松(OP)的中医病证结合模型，探讨肾阳虚在RA-OP中的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：SPF级DBA/1(H-2q)小鼠，雄性，8周龄，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2017-0005。在温度22±2oC，湿度50%～60%，光照12h光明和10h黑暗的环境明暗交替，换风次数15～20次/小时的环境下，饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心，实验饲养室许可证号SYXK(浙)2018-0012。

    1.2 试剂与仪器：牛Ⅱ型胶原(Chondrex，批号：Chondrex 20022)，弗 氏 佐 剂(Chondrex，批 号 ：Chondrex 7001,Chondrex 7002)，小鼠白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒(酶免，批号：MM-0170M1)，小鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒(酶免，批号：MM-0144M1)，SYBR Green qPCR试剂盒(康为世纪，批号：CW2601)，逆转录试剂盒(康为世纪，批号：CW2569)，RIPA裂解液(碧云天，批号：P0013D)，PMSF(碧云天，批号：ST506)。酶标仪(MD公司)，核酸定量仪(Thermo Scientific)，实时荧光定量PCR仪(罗氏公司)。

    1.3 肾阳虚小鼠模型建立：取10只雄性DBA/1(H-2q)小鼠，皮下注射20mg·kg-1氢化可的松，每日1次，连续7d，进行小鼠肾阳虚造模；末次注射7d后进行类风湿关节炎的OP造模。

    1.4 牛Ⅱ型胶原RA造模：取10只肾阳虚小鼠和10只正常小鼠进行RA造模 ......