芮晓薇 郑思慧 赵方敏 蒋佳怡 柯雅妮 张 璐 蔡利军#

    1 浙江中医药大学第一临床医学院 浙江 杭州 310053

    2 浙江中医药大学附属第一医院 浙江 杭州 310006

    腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是以反复发作的腹痛腹泻为临床特征的慢性功能性胃肠道疾病，常伴心理障碍。IBS-D发病可能与脑-肠轴功能紊乱、内脏高敏感性、肠道动力异常及精神心理因素等有关[1-2]。而内脏高敏感性、肠道动力异常与5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)等脑肠肽及SCF/c-Kit信号系统密切相关[3]。痛泻要方对于治疗肝郁脾虚证IBS-D具有良好疗效，然而其作用机制尚未完全明确，故本研究通过观测大鼠血清5-HT和结肠组织SP、SCF和c-Kit mRNA表达量的变化，探讨痛泻要方对肝郁脾虚证IBS-D的作用机制，为疏肝健脾方药在IBS-D中的运用提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：SD雄性大鼠24只，体质量200±20g。饲养条件：室温 20～24℃，相对湿度 40%～70%，噪音<60dB，光照周期12h/12h。

    1.2 实验药物：番泻叶、痛泻要方(炒白术30g，炒白芍20g，炒陈皮15g，防风10g)，中药饮片由浙江省中医院中药房提供并进行质量鉴定。

    1.3 实验试剂及仪器：大鼠SP ELISA试剂盒；大鼠5-HT ELISA试剂盒；BCA蛋白法含量测试盒(ADS-FDB005)；RNA提取试剂盒(TaKaRa，AHF1991D)；RT反转录试剂盒(TaKaRa，RR036A)；SYBR Green荧光定量PCR染料(TaKaRa，AK9301)。悬尾测试仪(济南益延科技发展有限公司，YLS-18A)；大鼠旷场(深圳市瑞沃德生命科技有限公司，63007)；荧光定量PCR仪(ABI)。

    1.4 造模及干预方法：具体如下。

    1.4.1 药物制备：番泻叶水煎剂：番泻叶水浸泡5h，煎煮20min，过滤浓缩至含生药0.45g/ml药液备用。痛泻要方水煎剂：炒白术、炒白芍、炒陈皮、防风水浸泡30min，煎煮30min ......