杨慧芬 毛娟娟

    1 杭州市中医院 浙江 杭州 310007

    2 宁波市中医院 浙江 宁波 315012

    三阴性乳腺癌(TNBC)靶向及内分泌治疗效果不佳，新辅助化疗方案对TNBC具有较高的缓解率和良好的预后，顺铂为首选化疗药物之一，但存在顺铂耐药性，逆转顺铂耐药性是有效治疗TNBC的潜在策略。缺氧诱导因子l(HIF-1)可促进肿瘤增殖和血管新生；HIF-1α功能性亚基与HIF-1活性水平密切相关。二至丸合桂枝汤可介导HIF-1α对TNBC细胞顺铂耐受机制进行调控，但其机制仍未阐明。基于此，本研究利用HIF-1αsiRNA转染顺铂耐药性MDA-MB-231(MDA-MB-231/CDDP)细胞株，深入探讨二至丸合桂枝汤介导HIF-1通路对TNBC细胞系顺铂耐药性的调控机制，以期为二至丸合桂枝汤的临床推广应用提供坚实的理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与细胞：健康SPF级SD大鼠，体质量200±30g[购于上海斯莱克动物实验有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2017-0015]，饲养于杭州鹰旸生物科技有限公司动物中心，动物使用SYXK许可证号为(浙)2020-0024。适应喂养1周。转移性乳腺癌细胞系MDA-MB-231(货号：iCell-h133，赛百慷)，于含青霉素(100U/ml)、链霉素(100μg/ml)、5%胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)的DMEM培养基培养，置于恒温培养箱中(37°C，含5%CO2)。

    1.2 实验试剂与仪器：二至丸合桂枝汤(女贞子、旱莲草各10g，桂枝、芍药、生姜各9g，炙甘草6g，大枣12枚，水煎至300ml，浓缩至1g/ml)。FBS(货号：11011-8615，浙江天杭生物科技)；DMEM高糖培养基(货号：SH30243.01，Hyclone)；CCK-8试剂盒(货号：HY-K0301 ......