胡佳雯 崔当鸽 周 宇 郑迷雪 项晓骏#

    1 浙江中医药大学附属第一医院 浙江 杭州 310006

    2 浙江大学医学院附属邵逸夫医院 浙江 杭州 310020

    本研究通过采用缺血再灌注法诱导急性肾损伤(AKI)小鼠模型，以期探讨消瘀泄浊饮对AKI小鼠的保护作用和潜在机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：8周龄清洁级雄性C57BL/6小鼠30只。购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物生产许可证号为SCXK(沪)2017-0005；饲养于杭州鹰旸生物科技有限公司动物中心，动物使用许可证号为SYXK(浙)2020-0024。饲养期间允许自由饮食饮水。

    1.2 实验材料：分述如下。

    1.2.1 药材：生黄芪15g，川牛膝、桃仁、地龙各6g，制大黄5g，车前草10g，配方药品由医院中药房提供。加水熬制浓缩到500ml，得到浓度为96mg/ml的消瘀泄浊饮。

    1.2.2 试剂：小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合成酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、ELISA试剂盒(批号：MM-0389M1、MM-0388M1、MM-0453M1、MM-0758R1，购于酶免)。抗体：LC3A/B、BECLIN 1、SQSTM1/P62、PI3K P85 ALPHA、AKT2、PHOSPHO-MTOR(SER2448)、MTOR、β-ACTIN(批号：AF5402、AF5128、AF5384、AF6241、AF6264、AF3308、AF7803、AF7018，购于 AFFINITY)。山羊抗兔 IGG H&L(HRP)(批号AB97080，购于ABCAM)

    1.2.3 设备：C16000型全自动生化检测仪，雅培公司生产；RM2016病理切片机，上海徕卡仪器有限公司生产；NIKON ECLIPSE E100型正置光学显微镜 ......