刘宏飞 何国浓王 杰 余伟方 史国军

    浙江中医药大学附属宁波中医院 浙江 宁波 315010

    我国胃癌发病率在恶性肿瘤中排第二位[1]。目前对胃癌机制研究和治疗方法不断深入，但治疗效果提高却不明显[2]。中医药治疗本病已经有深入研究[3]，藤梨根被证明有抗肿瘤等作用，在临床治疗消化道肿瘤有一定疗效[4,5]。本研究通过观察不同浓度的藤梨根提取物熊果酸(XGS)、齐墩果酸(QDGS)对人胃癌细胞SGC-7901增殖以及对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF)-1α表达的影响，为开发藤梨根及其制剂用于防治胃癌提供理论基础和科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验药品：熊果酸(批号：19062710)、齐墩果酸(批号：20032706)购于成都曼思特生物科技公司。

    1.2 实验细胞：人胃癌细胞SGC-7901，由浙江省中医药研究院提供，来源于中国科学院上海细胞库。

    1.3 主要试剂仪器：LV-HIF-1α、LV-NC由吉玛制药技术公司(上海)合成；HIF-1α、VEGF、EF-1α引物购于生物工程(上海)公司；xCELLigence RTCA DP多功能实时无标记细胞分析仪，艾森生物(杭州)公司；Nanodrop2000核酸蛋白质定量仪，Thermo公司；WES全自动蛋白表达分析系统，Protein Simple公司。

    1.4 方法：分述如下。

    1.4.1 细胞培养及慢病毒感染：SGC-7901细胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液，置37℃、5% CO2培养箱中培养，取对数生长期的细胞用于实验。构建HIF-1α过表达慢病毒载体LV-HIF-1α(3×108TU/ml)及阴性对照LV-NC(3×108TU/ml)，SGC-7901细胞按5×104个/ml ......